石墨爐法測(cè)定復(fù)方氨基酸注射液中限量呂方法研究

周寶紅

第一章

前言

鋁是一種自然界分布廣泛的具有慢性蓄積性的低毒金屬，人體攝入過(guò)多的Al將直接破壞神經(jīng)內(nèi)的遺傳物質(zhì)脫氧核酸的功能。注射液中的鋁離子由于不經(jīng)胃腸道消化吸收而直接進(jìn)入血液，增加了對(duì)人體的危害。近年來(lái)，注射液引起人體功能的危害在國(guó)內(nèi)外已經(jīng)受到了廣泛的關(guān)注和重視。美國(guó)藥典明確要求做出如下說(shuō)明：本制劑中含有的鋁具有毒性，在全非胃腸道給藥時(shí)，如果腎功能不全會(huì)達(dá)到中毒水平。研究顯示腎功能不全者，在全非胃腸道給藥時(shí)，如果接受鋁的水平超過(guò)4-5μg/kg，累積的鋁與中樞神經(jīng)和骨骼的毒性水平相關(guān)。在前期研究中，我們參照日本藥局方，中國(guó)飲用水標(biāo)準(zhǔn)及其它相關(guān)文獻(xiàn)[1，2]，對(duì)紫外比色法，高效液相熒光法，ICP-OES，ICP-MS進(jìn)行了考察。本文進(jìn)一步對(duì)原子吸收分光光度-石墨爐法測(cè)定復(fù)方氨基酸中痕量鋁方法的可行性進(jìn)行了全面研究。

第二章實(shí)驗(yàn)部分

1.材料與方法

1.1儀器

PE公司analyst600型

島津AA6300型

VarianspectrAA220Z型

分析天平（型號(hào)：sartoriousCP225D）

鋁空心陰極燈（北京有色金屬研究總院）

1.2試劑和試藥

硝酸（優(yōu)級(jí)純北京化學(xué)試劑研究所批號(hào)：070808）

硝酸鎂（分析純國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司批號(hào)：F0070905）

重蒸餾水

金屬鋁單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/mL）（國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心，GSB04-1713-2004，批號(hào)08733）

1.3樣品來(lái)源

廠家提供的市售基酸注射液。

1.4溶液的配制

1.4.1硝酸鎂溶液的制備

精密稱(chēng)取六水合硝酸鎂15g，至量瓶中，加重蒸水使溶解，并稀釋至50ml，搖勻，即得。

1.4.2鋁貯備液的制備

精密量取鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液0.25ml，加硝酸鎂溶液1ml，濃硝酸0.5ml，加水定容至50ml，搖勻，即得。

1.4.3空白溶液的配制

精密量取硝酸鎂溶液1ml，濃硝酸0.5ml，加重蒸餾水定容至50ml，搖勻，即得。

1.4.4鋁系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分別精密量取鋁儲(chǔ)備液0，100，200，300，400，500？L，加硝酸鎂溶液1ml，濃硝酸0.5ml，加水定容至50ml，得到濃度分別為0，10，20，30，40，50μg/mL的鋁系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.4.5樣品溶液的配制

分別精密量取鋁儲(chǔ)備液0，100，200，300，400，500？L，加硝酸鎂溶液1ml，濃硝酸0.5ml，加供試品定容至50ml，得到濃度分別為0，10，20，30，40，50μg/mL的系列樣品溶液。

1.5樣品的測(cè)定

將鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液，樣品放在自動(dòng)進(jìn)樣盤(pán)中，調(diào)節(jié)儀器使在最佳工作狀態(tài)，設(shè)定儀器工作條件，依次對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液進(jìn)行測(cè)定，進(jìn)樣量為10？L，以峰面積計(jì)算含量。

2.結(jié)果與討論

2.1石墨管的選擇采用石墨爐原子吸收法進(jìn)行元素分析，有三種石墨管可供選擇：高密石墨管，熱解涂層石墨管和熱解涂層平臺(tái)石墨管。由于碳原子可與鋁形成難解離的化合物，在鋁元素進(jìn)行分析中，無(wú)法采用高密石墨管。熱解涂層石墨管和熱解涂層平臺(tái)石墨管由于在結(jié)構(gòu)上進(jìn)行了改進(jìn)，均可顯著降低干擾，但由于以下原因，最終決定采用熱解涂層平臺(tái)石墨管進(jìn)行分析：（1）目前，部分橫向加熱儀器只支持平臺(tái)石墨管，不支持熱解涂層石墨管的使用，兩種石墨管在升溫程序設(shè)定上存在差異，固定采用單一石墨管，可提高測(cè)定方法的通用性，便于調(diào)節(jié)儀器。（2）熱解涂層平臺(tái)石墨管性能優(yōu)于熱解涂層石墨管，具有加熱更均勻，數(shù)值更穩(wěn)定的特點(diǎn)；且無(wú)論是橫向加熱還是縱向加熱的設(shè)備均可使用熱解涂層平臺(tái)石墨管進(jìn)行分析，應(yīng)用面廣。

2.2基體改進(jìn)劑的種類(lèi)和用量的選擇在石墨爐原子吸收光譜分析中，為了減少和消除基體組分的干擾，常采用基體改進(jìn)技術(shù)，文獻(xiàn)[1，2]和標(biāo)準(zhǔn)中普遍使用的基體改進(jìn)劑為硝酸鎂。硝酸鎂的加入，可提高鋁的灰化溫度，有利于去除基體干擾，改善峰形。由于硝酸鎂試劑中均含有一定量的鋁，加入量的增加會(huì)使空白值升高，增加測(cè)定誤差，降低測(cè)量準(zhǔn)確性，不利于微量鋁的分析測(cè)定。溶液中每1ml含有6mg六水合硝酸鎂時(shí)，測(cè)定結(jié)果較為穩(wěn)定，峰形無(wú)分裂。結(jié)果表明，在分析中采用1ml含6mg六水硝酸鎂溶液作為測(cè)試溶液，可得到滿(mǎn)意的結(jié)果。

2.3灰化及原子化溫度考察以18合氨基酸注射液樣品進(jìn)行測(cè)定，隨灰化溫度的不斷提高，樣品基體干擾逐漸減少，當(dāng)灰化溫度升到到1600℃以上時(shí)吸收度值基本穩(wěn)定，色譜峰基本不再分裂。繼續(xù)升溫至1750℃時(shí)，鋁出現(xiàn)損失，因此選擇灰化溫度為1650℃。原子化溫度由2300℃開(kāi)始，吸收度至2500℃開(kāi)始逐漸穩(wěn)定，峰形趨于對(duì)稱(chēng)，基本回落至基線，考慮在實(shí)際測(cè)定中，以峰面積計(jì)算時(shí)的穩(wěn)定性，選擇原子化溫度為2550℃。

2.4介質(zhì)的選擇

石墨爐原子吸收測(cè)定時(shí)，常選用硝酸或鹽酸作為酸性介質(zhì)。鹽酸作為介質(zhì)對(duì)鋁的測(cè)定影響很復(fù)雜，主要是鋁的氯化物容易升華，在灰化階段會(huì)損失，測(cè)定結(jié)果會(huì)降低，同時(shí)，硝酸酸性過(guò)強(qiáng)，會(huì)降低石墨管使用壽命，因此，選用1%硝酸作介質(zhì)。

2.5降低空白的方法

石墨爐測(cè)定鋁經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)空白過(guò)高的問(wèn)題，要從以下幾方面嚴(yán)格把關(guān)：（1）注意測(cè)定用水，多次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，普通蒸餾水的吸光度偏高，新鮮的二次蒸餾水能滿(mǎn)足測(cè)定要求。（2）在石墨管使用前，先空燒數(shù)次，將殘留在石墨管內(nèi)的雜質(zhì)消除（3）試劑的選擇，試劑質(zhì)量各有不同，造成的污染也難以估計(jì)，因此硝酸應(yīng)該采用有認(rèn)證廠家的優(yōu)級(jí)純?cè)噭＃?）實(shí)驗(yàn)用品須經(jīng)硝酸浸泡12小時(shí)以上，用重蒸水反復(fù)沖洗干凈后方可使用。

2.6 線性考察

（1）分別精密量取鋁標(biāo)準(zhǔn)貯備液：0，200，400，600，800，1000μL，加硝酸鎂溶液1ml，濃硝酸0.5ml，加氨基酸溶液定容至50ml，濃度分別為0，20，40，60，80.100μg/L系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，10μL進(jìn)樣，測(cè)定峰面積。進(jìn)樣量在0～1μg-范圍內(nèi)r=0.9960，線性良好。

（2）不同氨基酸介質(zhì)線性關(guān)系存在差異，與標(biāo)準(zhǔn)溶液斜率不完全一致，因此，為消除基體干擾，采用標(biāo)準(zhǔn)加入法進(jìn)行鋁元素含量分析。

2.7精密度取30μg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，連續(xù)6次測(cè)定，結(jié)果顯示，精密度良好。

2.8定量限取空白溶液，重復(fù)進(jìn)樣11次，以10倍標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)算鋁元素的定量限為3.3μg/L。

2.9回收率按標(biāo)準(zhǔn)加入法，在供試品溶液中，加入不同濃度的鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液及相應(yīng)試劑，測(cè)定并計(jì)算在18AA、6AA、9AA三種氨基酸注射液中，高中低不同濃度鋁元素的回收率分別為99.7%、101.9%、99%。結(jié)果表明，回收率良好。

3方法耐用性

采用標(biāo)準(zhǔn)加入法分別測(cè)定空白及供試品溶液中鋁元素總量，扣空白計(jì)算氨基酸注射液中含量。分別用3種不同廠家儀器進(jìn)行測(cè)定（PEanalyst600、島津AA6300、varianspectrAA220Z），并與ICP-MS測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較，結(jié)果基本一致，無(wú)明顯差異，不影響結(jié)果判斷。

4.小結(jié)

本文建立了原子吸收分光光度-石墨爐法測(cè)定復(fù)方氨基酸溶液中痕量鋁的方法。該方法中樣品不需要經(jīng)過(guò)復(fù)雜前處理，在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中避免了多次轉(zhuǎn)移，減少了樣品污染的機(jī)率，所用儀器普及率高，操作簡(jiǎn)便，并具有良好的精密度和重現(xiàn)性，適用于復(fù)方氨基酸注射液中痕量鋁的分析測(cè)定。

參考文獻(xiàn)

[1]孫梅.原子吸收光譜法測(cè)定人血白蛋白制劑中的痕量鋁《藥物分析雜志》2007.27（1）

[2]田佩瑤呂靜魏建榮.石墨爐原子吸收法直接測(cè)定水中鋁《中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志》2005.15（2）