毛滴蟲(chóng)病引起牛低育的臨床癥狀、診斷及防控

韓貞珍

1 臨床癥狀

牛群中有胎兒三毛滴蟲(chóng)介入后生育力嚴(yán)重下降，后發(fā)展為返情、產(chǎn)犢間隔時(shí)間延長(zhǎng)，因不能妊娠被淘汰牛的比例上升，出現(xiàn)子宮積膿和妊娠早期流產(chǎn)時(shí)提示低育。未孕牛常在返情時(shí)出現(xiàn)陰道膿性分泌物，直腸檢查觸摸子宮時(shí)常引起陰門流出分泌物，分泌物中能檢測(cè)到活動(dòng)的胎兒三毛滴蟲(chóng)。同樣，因胎兒三毛滴蟲(chóng)感染所致子宮大量積膿，膿汁稀薄、無(wú)氣味、灰白色并且含有大量的胎兒三毛滴蟲(chóng)。

患牛的臨床癥狀為妊娠并能妊娠至足月，沒(méi)有感染發(fā)生。病牛屢配不孕，但是沒(méi)有明顯的感染癥狀；發(fā)情規(guī)律或不規(guī)律。不能妊娠并發(fā)展成子宮內(nèi)膜水腫，帶有絮狀的粘液性分泌物?；寂Ｈ焉铮窃谌焉锏牡?～4個(gè)月流產(chǎn)，發(fā)展成子宮積膿并且無(wú)發(fā)情周期。

有的流產(chǎn)發(fā)生在妊娠的第2～4個(gè)月，妊娠第4個(gè)月后很少發(fā)生流產(chǎn)。妊娠晚期流產(chǎn)時(shí)，能在絨毛膜、胎肺和胎兒的胃腸道內(nèi)檢測(cè)到胎兒三毛滴蟲(chóng)。由于生長(zhǎng)延遲，所以流產(chǎn)胎兒比相應(yīng)的妊娠時(shí)期正常胎兒小。流產(chǎn)的病例，胎兒呈灰白色，并且連同胎膜一起被排出，沒(méi)有化膿癥狀，并且在羊水中很容易找到毛滴蟲(chóng)。病牛流產(chǎn)后，寄生蟲(chóng)很快（通常在7天內(nèi)）從陰道分泌物中消失。

2 診斷方法

2.1 診斷樣品

奶牛胎兒三毛滴蟲(chóng)的診斷最好能從子宮膿汁、陰道分泌物、子宮頸粘液或者流產(chǎn)材料中找到胎兒三毛滴蟲(chóng)。最好的樣品是胎膜或流產(chǎn)胎兒的器官。交配感染后，感染的消除速率各不相同，因此未能找到微生物并不一定意味著早期沒(méi)有該病原。不要用被糞便污染的物質(zhì)作為樣品檢測(cè)，因?yàn)檫@種樣品中可能含有非致病性的類似毛滴蟲(chóng)樣的微生物。

公牛毛滴蟲(chóng)病需檢查包皮的刮下物和包皮洗液。傳統(tǒng)的采樣方法是，用力刮包皮黏膜，盡可能多地獲得包皮垢。也有人建議，診斷毛滴蟲(chóng)病時(shí)須用力刮包皮采樣。將公牛深度麻醉，用大約50毫升磷酸鹽緩沖液沖洗其包皮，檢測(cè)沖洗液，對(duì)診斷毛滴蟲(chóng)病很可靠。最好在公牛性行為后5～10天進(jìn)行檢測(cè)，以便檢測(cè)到更多的毛滴蟲(chóng)。

2.2 檢測(cè)蟲(chóng)體

任何可能包含毛滴蟲(chóng)的材料都應(yīng)該小心處置，因?yàn)槊蜗x(chóng)很脆弱，且死亡后迅速降解。如果對(duì)采集到的樣本處理不當(dāng)，在檢測(cè)時(shí)蟲(chóng)體將會(huì)消失。多種培養(yǎng)基可以用來(lái)培養(yǎng)毛滴蟲(chóng)，其中有克勞森培養(yǎng)基、黛蒙德氏培養(yǎng)基、InPouch TF系統(tǒng)。培養(yǎng)后能觀測(cè)到蟲(chóng)體。

現(xiàn)場(chǎng)培養(yǎng)用的InPouch TF系統(tǒng)由1個(gè)透明柔韌的塑料小袋組成，小袋分2層。上層含有特殊培養(yǎng)基，樣品接種于此。現(xiàn)場(chǎng)采集的用于直接接種到培養(yǎng)袋中的樣品，應(yīng)是經(jīng)包皮刮擦技術(shù)采集的。樣品與培養(yǎng)基充分混合后，擠入小袋下層，然后將小袋密封并在37℃條件下培養(yǎng)?？梢灾苯訉⑺芰闲〈棚@微鏡下檢查毛滴蟲(chóng)。在放大200～400倍的視野中觀察到活動(dòng)的毛滴蟲(chóng)可初步診斷。經(jīng)常會(huì)在角落以及下半部近底部或小袋的接種層觀測(cè)到毛滴蟲(chóng)。通過(guò)蟲(chóng)體的大小、鞭毛和波狀膜來(lái)確定毛滴蟲(chóng)。對(duì)于從公牛收集到的樣品，InPouch TF系統(tǒng)的靈敏度估計(jì)為84%～96%，而黛蒙德氏培養(yǎng)基的靈敏度為78%～99%，特異性達(dá)到100%。

近年來(lái)PCR檢測(cè)法也用于毛滴蟲(chóng)的檢測(cè)。使用PCR檢測(cè)法可以區(qū)別牛陰莖包皮陷窩中是胎兒三毛滴蟲(chóng)感染還是糞便毛滴蟲(chóng)污染，可用于鑒別初步培養(yǎng)的胎兒三毛滴蟲(chóng)，還可以用來(lái)直接診斷現(xiàn)場(chǎng)采集樣品中的毛滴蟲(chóng)，并且比只采用培養(yǎng)法的靈敏度高。但是，采集到的樣品必須盡快進(jìn)行檢測(cè)，保存會(huì)迅速降低靈敏度。

3 防控措施

淘汰公牛，并用人工授精代替自然交配；對(duì)母牛采取靈活的分組管理，合理使用公牛；對(duì)公牛和母牛進(jìn)行治療或疫苗接種。

通過(guò)人工授精控制毛滴蟲(chóng)感染的基礎(chǔ)是假設(shè)母牛在自行康復(fù)，并且如果用健康公牛的精液輸精代替自然交配，健康母牛不會(huì)發(fā)生感染。在所有的防控方法中，淘汰牛群中感染的公牛和采集未感染公牛的精液進(jìn)行人工授精是最有效的方法。采用人工授精時(shí)，至少需要在同一個(gè)配種季節(jié)內(nèi)對(duì)母牛完成配種，最好是在2個(gè)配種季節(jié)。在采用人工授精方法的起初階段，妊娠率較低。