分散固相萃取—?dú)庀嗌V法測定水果中的六六六農(nóng)藥殘留研究

摘要[目的]建立采用多壁碳納米管（MWCNTs）和乙二胺-N-丙基硅烷（PSA） 為吸附劑的分散固相萃取 （dSPE）凈化、氣相色譜測定水果中六六六殘留量的方法。[方法]水果樣品用乙腈提取，再加入 NaCl 和無水 MgSO4液液分離，然后在樣品提取液中加入無水 MgSO4、PSA和多壁碳納米管進(jìn)行分散固相凈化。[結(jié)果]所測定的4種六六六的質(zhì)量濃度在0.005～0.200 mg/L范圍內(nèi)與其峰面積比呈線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)（R2）均大于0.998 8，方法對所測定的9種物質(zhì)的檢出限均小于1.000 mg/L，樣品加標(biāo)回收率為80%～110%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）為2.42%～5.99%。[結(jié)論]該方法有較好的靈敏度，能夠滿足樣品測定的要求。

關(guān)鍵詞分散固相萃??；六六六；多壁碳納米管

中圖分類號(hào)S481+.8文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼

A文章編號(hào)0517-6611（2015）05-199-02

基金項(xiàng)目新疆自治區(qū)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)資助項(xiàng)目。

作者簡介朱然（1986- ），女，山東單縣人，助理研究員，碩士，從事色譜分析研究。

收稿日期2014-12-22

六六六（BHC）即六氯環(huán)己烷，曾是廣泛使用和生產(chǎn)的有機(jī)氯類農(nóng)藥，具有穩(wěn)定性強(qiáng)、不易分解的特點(diǎn)，大量使用除了會(huì)直接對農(nóng)作物造成污染外，還具有高度持久性和生物蓄積性的特點(diǎn)。雖然我國已經(jīng)禁止使用，但長期使用后它們可以通過長期的生物富集依然能夠?qū)θ梭w健康和生態(tài)環(huán)境造成不利影響[1]。國標(biāo)中規(guī)定六六六農(nóng)藥的殘留限量為再殘留限量[2]。再殘留限量是指一些持久性農(nóng)藥雖已禁用，但還長期存在環(huán)境中，從而再次在食品中形成殘留，為控制該類農(nóng)藥殘留物對食品的污染而制定的其在食品中的殘留限量即為再殘留限量。

水果中本身含有糖類、氨基酸、蛋白質(zhì)、色素、維生素、有機(jī)酸、無機(jī)鹽等復(fù)雜的化學(xué)成分，對農(nóng)藥殘留量的測定產(chǎn)生嚴(yán)重干擾。近年來，QuEChERS方法[3]以其準(zhǔn)確、快速、簡便、成本低廉的優(yōu)點(diǎn)，迅速成為農(nóng)藥多殘留的高效分析方法。目前，該方法已成為歐洲標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)認(rèn)可的試驗(yàn)方法。該方法在實(shí)際應(yīng)用中經(jīng)過不斷改良，主要用于各類食品、蔬菜、水果等樣品的前處理。碳納米管由于其具有納米級(jí)別的中空管狀結(jié)構(gòu)、大的比表面積、某些表面功能團(tuán)和疏水的表面能強(qiáng)烈吸附某些重金屬離子和有機(jī)化合物，而成為一種新的固相萃取吸附劑廣泛應(yīng)用于分析領(lǐng)域[4-5]。近年來碳納米管材料作為固相萃取填料在農(nóng)獸藥殘留分析中有一定的應(yīng)用[6-8]，但作為分散固相萃取劑的應(yīng)用較少。為此，筆者通過對QuEChERS方法的改良和氣相色譜電子捕獲檢測器建立了一種水果中六六六的殘留量分析檢測方法，以期為水果中六六六殘留檢測提供借鑒。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1儀器。

美國Thermo Trace 1300氣相色譜儀（配有電子捕獲檢測器ECD）；超聲波清洗器；熱電低溫高速離心機(jī)；渦旋混勻器。

1.1.2試劑。α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC 4種標(biāo)準(zhǔn)品均購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所。乙腈、丙酮、正己烷、乙酸乙酯均為色譜純，無水硫酸鎂（650 ℃灼燒4 h）。PSA和多壁碳納米管均購自天津艾杰爾公司。氮?dú)猓杭兌取?9.999%。

1.2方法

1.2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。分別移取4種六六六標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 100 μl至10 ml 容量瓶中，乙腈定容，配成 10 mg/L 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。用空白樣品提取液配成不同濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，用于求取標(biāo)準(zhǔn)工作曲線?；|(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配?？瞻讟悠窞榱礄z出的水果樣品。

1.2.2氣相色譜條件。

色譜柱：美國Thermo TR-5毛細(xì)管柱（30.0 m×0.32 mm，0.25 μm）。程序升溫：100 ℃保持1 min，以10 ℃/min的速率升溫至150 ℃，保持1 min；以5 ℃/min的速率升溫至270 ℃，保持5 min；以280 ℃后運(yùn)行2 min。進(jìn)樣口溫度：230 ℃，進(jìn)樣量：1 μl。氮?dú)饬髁浚?.2 ml/min。ECD檢測器溫度：320 ℃。

1.2.3樣品處理。

1.2.3.1提取。稱取新鮮水果樣品約10 g（精確到0.000 1 g）置于50 ml離心管中，加20 ml乙腈，超聲提取0.5 h。加入5 g固體NaCl，離心分層。

1.2.3.2凈化。取上清液 2 ml 于已加入 400 mg 無水 MgSO4、50 mg PSA和 60 mg多壁碳納米管的離心管中，渦旋2 min，以10 000 r/min 離心5 min；取上清液過0.22 μm 有機(jī)濾膜；取濾液于進(jìn)樣小瓶中，待測。

2結(jié)果與分析

2.1色譜行為六六六的標(biāo)準(zhǔn)色譜見圖1。

2.2提取溶劑的選擇

水果基質(zhì)復(fù)雜，試驗(yàn)選擇乙腈、乙酸乙酯、正己烷、丙酮4種提取劑進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，丙酮、乙酸乙酯對枸杞中的雜質(zhì)提取較多，在色譜圖上雜質(zhì)峰干擾嚴(yán)重、基線較差，無法滿足分析檢測需求；正己烷和乙腈提取的樣品雜質(zhì)較少，但正己烷回收率較差；乙腈極性大、穿透性強(qiáng)，適合多農(nóng)藥殘留的提取。因此，選擇乙腈作為提取劑。

2.3QuEChERS方法的優(yōu)化

對葡萄等水果樣品的乙腈提取液用多壁碳納米管替代 PSA 進(jìn)行分散固相凈化，其效果優(yōu)于 PSA 凈化的效果（圖2）。對多壁碳納米管用量進(jìn)行考察，發(fā)現(xiàn)用量為60 mg時(shí)均能得到較好的凈化效果和回收率（圖3）。

PSA有2個(gè)氨基，比NH2柱有更強(qiáng)的離子交換能力，能有效去除有機(jī)酸、金屬離子和酚類等。試驗(yàn)進(jìn)一步研究了50 mg PSA 和60 mg 多壁碳納米管聯(lián)合凈化的效果，結(jié)果表明二者聯(lián)合使用優(yōu)于兩者單獨(dú)使用。故試驗(yàn)最終采用50 mg PSA 和60 mg 多壁碳納米管聯(lián)合凈化的方法處理水果樣品。

2.4工作曲線、線性范圍與檢出限

用空白樣品提取液配成不同濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，用于作標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，按“1.2.2”氣相色譜條件對4種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列進(jìn)行測定，4種農(nóng)藥的質(zhì)量濃度在一定范圍內(nèi)與其峰面積比成線性關(guān)系，線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)（n=6）、線性范圍、檢出限結(jié)果見表1。

2.5方法的回收率

將3個(gè)不同質(zhì)量濃度水平的標(biāo)樣添加到空白樣品中（n=6），進(jìn)行樣品前處理和氣相色譜分析，測定添加回收率。由表2可知，回收率在80%～110%，平均回收率大于89%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）小于6%，說明該方法準(zhǔn)確可靠。

2.6實(shí)際樣品檢測

采用該研究所建立的方法對從市場上采購的葡萄、蘋果、梨、桃、杏、柑橘等水果進(jìn)行了分析檢測，方法適用于大多數(shù)水果的分析，可應(yīng)用于實(shí)際的監(jiān)測分析。

3結(jié)論

通過對QuEChERS方法的改良，以多壁碳納米管和 PSA 混合使用進(jìn)行樣品凈化，能有效去除水果中的基質(zhì)干擾物，

提高了六六六提取效率和檢測靈敏度，建立了一個(gè)便捷的凈化處理方法，采用氣相色譜電子捕獲檢測器測定，取得了較好的效果，實(shí)現(xiàn)了水果中六六六的殘留量分析檢測。方法簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于實(shí)際樣品分析。

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責(zé)任編輯張彩麗責(zé)任校對李巖