探析臨床免疫檢驗影響原因及措施

段曉芳

摘要：目的： 探討臨床免疫檢驗的影響因素及相關(guān)控制措施。方法： 選取我院收治的患者96例作為研究對象，按照免疫檢驗控制方法劃分，對照組46例患者采用常規(guī)免疫檢驗，觀察組50例從標本采集到檢測全程均采用嚴格監(jiān)控措施，對比兩組患者免疫檢驗假陽性檢出率。結(jié)果： 觀察組假陽性檢出率為6.0%，顯著低于對照組28.3%，對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0. 05）。結(jié)論 ：有諸多因素會影響臨床免疫檢驗結(jié)果，因此一定要控制好檢驗室溫濕度，選擇高質(zhì)量儀器與試劑，提升檢驗人員水平，避免影響檢驗結(jié)果。

關(guān)鍵詞：免疫檢驗；影響原因；措施

臨床免疫檢驗范圍較大，包括放射免疫檢驗、免疫原制備、抗血清制備、酶免疫檢驗、化學(xué)發(fā)光免疫檢驗以及抗原抗體反應(yīng)等[1]。臨床醫(yī)師在對疾病種類進行判斷并選擇最佳治療方法時多將檢驗結(jié)果作為主要依據(jù)，因此疾病治療療效在很大程度上受到免疫檢驗結(jié)果準確性的影響，故此一定要保證免疫檢驗結(jié)果的準確性。然而，臨床免疫檢驗工作影響因素較多，因此對其檢驗質(zhì)量進行控制的關(guān)鍵在于做好免疫檢驗前的質(zhì)量控制工作。本文為探討臨床免疫檢驗的主要影響因素并采取針對性預(yù)防措施，現(xiàn)選取患者96例作為研究對象，對其臨床資料進行回顧性分析，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2013年3月至2014年3月收治的患者96例作為研究對象，對其臨床資料進行回顧性分析。按照免疫檢驗控制方法劃分，對照組46例患者采用常規(guī)的免疫檢驗，觀察組50例從標本采集到檢測全程均采用嚴格監(jiān)控措施。對照組患者中男性27例，女性19例；年齡為36至71歲，平均（53.6±6.2）歲。觀察組患者中男性29例，女性21例；年齡為35至70歲，平均（52.8±5.8）歲。

1.2 一般方法

對照組采用常規(guī)免疫檢驗，觀察組從標本采集到檢測全程均采用嚴格監(jiān)控措施，具體如下：

1.2.1 免疫檢驗前監(jiān)控措施 標本質(zhì)量得以保證是采集標本的前提，與此同時還要將標本采集時間、止血帶使用方式以及采血姿勢等全方位考慮進來。若患者口服過激素類藥物，在采集其血液標本時應(yīng)高度關(guān)注患者體位變化以及采集時間，防止出現(xiàn)生長激素、促卵泡激素以及促黃體激素的激素峰值。同時在保存標本時要按照標本特性進行分類，比如對于熱敏感標本在送檢之前需要冰凍，心鈉素或者血栓素等在檢測之前需要添加抗凝劑。在開始免疫檢驗前需對酶標儀、比濁儀、水浴箱、恒溫箱、分光光度計以及溫度計等行校正與核對，同時還要對反應(yīng)板、吸量管、微量加樣器以及稀釋棒進行定期檢查，最大程度降低實驗誤差，此外對于免疫檢驗儀器應(yīng)防止對制造商予以頻繁更換。

1.2.2 免疫檢驗中監(jiān)控措施 主要采用EQA（室間質(zhì)量評價），每個季度按照相關(guān)要求對臨檢中心與衛(wèi)生部下發(fā)的標本予以嚴格檢驗。應(yīng)用IQC（室內(nèi)質(zhì)量控制）：在檢測艾滋病、乙型肝炎、丙型肝炎以及甲型肝炎等患者時推薦第三代夾心法酶免試劑盒，在選取試劑時應(yīng)注重其保存條件、有效期等。最好固定廠家，避免頻繁更換。醫(yī)院在選擇自行配置的試劑時應(yīng)確保其配置過程的嚴格性，且經(jīng)過鑒定顯示合格后才能夠使用。

1.2.3 臨床免疫檢驗后監(jiān)控措施 初檢全部樣本，同時檢驗人員還要審查初檢結(jié)果，對可疑樣本或者結(jié)果為陽性樣本需復(fù)檢，且每次都對血清采用室內(nèi)質(zhì)量控制。同時檢驗室還要對標本予以保留，認真記錄，便于后期查詢。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用軟件SPSS21.0對所有數(shù)據(jù)行統(tǒng)計學(xué)處理，若P<0.05代表差異存在統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

3 討論

3.1 臨床免疫檢驗影響因素

3.1.1 內(nèi)源性感染因素 包括異嗜性抗體、濃度較高的非特異性免疫球蛋白、類風(fēng)濕因子、部分自身抗體。補體以及交叉反應(yīng)物質(zhì)等均屬于免疫檢查的內(nèi)源性干擾因素。一般而言臨床血清標本中均存有程度不一的內(nèi)源性干擾因素，進而會導(dǎo)致結(jié)果產(chǎn)生假陽性現(xiàn)象。在本研究中觀察組假陽性檢出率為6.0%，對照組為28.3%，對比差異明顯（P<0.05）。為避免行ELISA檢驗時受到類風(fēng)濕因子干擾，需對血清標本予以稀釋，最大限度降低非特異性類風(fēng)濕因子濃度，進而將ELISA測定遭受的類風(fēng)濕因子干擾程度降至最低，以提升檢驗結(jié)果的有效性與精準度。此外，還可對酶標抗體進行改變，首先用變性IgG對類風(fēng)濕因子進行封閉，再檢測抗原，亦可添加LgY（特異性雞蛋黃抗體）或者還原劑至標本中[2]，降解類風(fēng)濕因子，將干擾充分消除。

3.1.2 外源性感染因素 在免疫檢驗中外源性影響因素包括溫度、洗液更換、實驗員素質(zhì)、標本質(zhì)量以及試劑平衡時間等。在免疫學(xué)檢驗中多為血液類標本，除血液標本外還有腦脊液、大小便等標本，其標本質(zhì)量會受到采集時間、過程以及方法的影響，比如在采集血漿時患者姿勢一定要正確，同時還要觀察是否需要應(yīng)用添加劑等。此外標本放置時間過長、溶血、凝固不全以及遭受細菌污染等都會影響檢驗結(jié)果，因此要想確保檢驗質(zhì)量就一定要避免標本出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。而采血會受到不良習(xí)慣及劣質(zhì)采血器具影響等會導(dǎo)致標本溶血。因為血紅素基團存在于血紅蛋白中，故而其性質(zhì)與過氧化物相似，在ELLSA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）中主要將HPR（辣根過氧化物酶）當(dāng)做標記酶，在該實驗中若血清有較高的血紅蛋白濃度，就會在溫育時吸附固定相，而后顯色于HRP底物，對檢驗結(jié)果造成干擾。且在實驗過程中使用電化學(xué)發(fā)生免疫分析法對NSE（神經(jīng)特異性酸純化酶）予以檢測時若發(fā)生溶血現(xiàn)象其影響較為明顯。當(dāng)溶血在1g/L Hb標準時會明顯提升NSE檢測結(jié)果，且血紅蛋白提升水平與NSE檢測結(jié)果的影響為正相關(guān)關(guān)系。一般而言，血紅蛋白提升1g/LNSE檢測結(jié)果會上升25mg/ml左右[3]，因此一旦出現(xiàn)溶血現(xiàn)象需重新采血，避免檢驗結(jié)果受到誤差影響。此外，檢驗設(shè)備、試劑與檢驗人員等均會影響檢驗結(jié)果。一定要定期校正與檢查儀器設(shè)備，確保使用時具有高精密度。檢驗人員參與檢驗全程，因此其專業(yè)水平、操作熟練度以及工作態(tài)度等均會對檢驗結(jié)果產(chǎn)生影響。

3.2 相關(guān)措施

①在孵箱中放置酶標板時溫度為25℃或者4℃，其時間顯示差在10min左右，且若實驗室濕度在40%以下則會受到靜電影響，帶電微粒會吸附于塑料器皿上，污染標本。因此應(yīng)控制好實驗室溫濕度，溫度最好在18至25℃，濕度最好在30%至60%范圍中。②采集標本時方法應(yīng)正確，在恰當(dāng)時間采集，再應(yīng)用抗凝劑或者穩(wěn)定劑。若檢驗患者生長激素需陣發(fā)性釋放激素，并告知患者相關(guān)注意事項，在血液采集前14d科學(xué)飲食與規(guī)律作息，前3天應(yīng)避免食用高脂肪食物，前1d避免攝取酒精，前12至16h應(yīng)確保處于空腹狀態(tài)。標本采集時間最好為清晨，患者坐位或者平臥時采集，止血帶時間應(yīng)在1min以內(nèi)。③選取采血器物時應(yīng)注重其質(zhì)量，避免使用劣質(zhì)品。在選用試劑時應(yīng)選擇相同生產(chǎn)廠家同批次產(chǎn)品，在檢驗過程中要按照要求操作試劑，使用后于專用冰箱中放置。若較長時間沒使用則要先測試其特性，及時更換不合格試劑，避免影響檢驗結(jié)果。④檢驗完成后倒出洗液并用蒸餾水清洗，強化檢驗人員素質(zhì)，防止不良習(xí)慣。

綜上所述，有諸多因素會影響臨床免疫檢驗結(jié)果，因此一定要控制好檢驗室溫濕度，選擇高質(zhì)量儀器與試劑，提升檢驗人員水平，避免影響檢驗結(jié)果。

參考文獻：

[1]陶小美.臨床免疫檢驗影響因素及對策分析[J].大家健康（下旬版），2014，（2）：64-64.

[2]梁輝.臨床免疫檢驗質(zhì)量的影響因素及控制措施研究[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2014，（7）：145-145，146.

[3]胡偉.控制臨床免疫檢驗質(zhì)量的方法及措施分析[J].醫(yī)藥前沿，2014，（20）：382-382.