于金濤 劉文國 郭長義 宋雪冬 宋任浩★
RhD陰性獻血者不規(guī)則抗體篩查及鑒定結(jié)果分析
于金濤劉文國郭長義宋雪冬宋任浩★
目的 回顧分析RhD陰性獻血者不規(guī)則抗體篩查及鑒定結(jié)果,探討對RhD陰性獻血者進行不規(guī)則抗體篩查的意義。方法 采用間接抗球蛋白試驗對初篩RhD陰性獻血者進行確認,采用抗體篩查細胞和譜細胞進行不規(guī)則抗體篩查及特異性鑒定,采用單克隆抗-C、抗-c、抗-E及抗-e試劑對含有不規(guī)則抗體的RhD陰性獻血者進行Rh表型鑒定。結(jié)果 1205份 RhD陰性獻血者標本共檢出不規(guī)則抗體29份,檢出率為2.41%。其中女性23例,男性6例;特異性抗體25例(包括抗-D、抗-M、抗-JKa、抗-P、抗-S)、非特異性抗體4例。抗體篩查陽性RhD陰性獻血者表型分布比例依次為ccdee、Ccdee、CCdee、CcdEe、ccdEe和ccdEE。結(jié)論 RhD陰性的獻血者不規(guī)則抗體檢出率較高,對RhD陰性的獻血者進行不規(guī)則抗體篩查具有重要意義。
RhD陰性血型 獻血者 不規(guī)則抗體
Rh血型系統(tǒng)是最具多態(tài)性的紅細胞血型系統(tǒng),與臨床輸血密切相關(guān)的有D、C、c、 E、e等5種抗原,其中D抗原具有較強的免疫原性,RhD陰性個體經(jīng)由輸血、懷孕等接觸D抗原后,產(chǎn)生抗體的幾率明顯大于其他血型抗原。對RhD陰性獻血者不規(guī)則抗體的產(chǎn)生頻率、種類及性質(zhì)進行相關(guān)檢測與分析是確保RhD陰性受血者輸血安全而進行的質(zhì)量管理的重要內(nèi)容,目前在發(fā)達國家已經(jīng)普遍實施[1]。本中心自2011年5月對初篩RhD陰性獻血者在原有的RhD確證基礎(chǔ)上增加了不規(guī)則抗體篩查及血清學(xué)表型鑒定試驗,現(xiàn)將檢測結(jié)果報道如下。
1.1一般資料 選擇2011年1月至2014年5月河北省血液中心間接抗人球蛋白試驗確認為RhD陰性無親緣關(guān)系獻血者的血液標本1680份。
1.2主要試劑與儀器 RhD陰性初篩試劑:單克隆IgM抗-D(上海血液生物醫(yī)藥公司);RhD陰性確認試劑:人源單克隆IgG抗-D(加拿大Dominion公司)、單克隆IgG抗-D(北京金豪制藥公司)、單克隆IgG+IgM抗-D(德國Biotest公司、法國Diagast公司、上海血液生物醫(yī)藥公司);單克隆抗-C、抗-c、抗-E、抗-e和抗球蛋白試劑(北京金豪制藥有限公司);抗體篩查細胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)、譜細胞(上海血液生物公司)。2991型血細胞洗滌機(美國Gambro公司)、80-2 型離心沉淀器(上海手術(shù)機械廠)、TD4M血細胞洗滌離心機 (長沙平凡儀器儀表有限公司)、BHW 2型水浴箱(北京醫(yī)療設(shè)備廠)、奧林巴斯CX21BIM-SET5生物顯微鏡(上海皖寧精密科學(xué)儀器有限公司) 和QL-861漩渦混合器(常州杰博森儀器有限公司)。
1.3方法 (1)RhD陰性獻血者的確認:操作方法參照《中國輸血技術(shù)操作規(guī)程》[2]。單克隆IgM抗-D初篩為RhD陰性紅細胞分別與不同來源的人源單克隆抗-D、單克隆IgG抗-D和3個不同廠家和批號的單克隆IgG+IgM抗-D進行間接抗人球蛋白試驗,同時做陰陽對照。只要與1種試劑有凝集反應(yīng)即判定為陽性,全部不凝集者判定為RhD陰性。(2)不規(guī)則抗體篩查及特異性鑒定:應(yīng)用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗體篩查細胞和自身細胞對RhD陰性獻血者血漿標本進行不規(guī)則抗體篩查(凝聚胺法)。應(yīng)用譜細胞對不規(guī)則抗體篩查陽性標本進行特異性鑒定,鑒定抗體的類型。按試劑盒使用說明書進行操作。(3)對含有不規(guī)則抗體的RhD陰性獻血者進行Rh表型鑒定:含有不規(guī)則抗體的RhD陰性的3%~5%紅細胞50μl分別加單克隆抗-C、抗-c、抗-E及抗-e試劑50μl,混勻,1000g離心15s,肉眼和鏡下觀察結(jié)果。凝集者為陽性,否則為陰性。
2.1RhD陰性獻血者不規(guī)則抗體篩查及鑒定結(jié)果 見表1。
表1 RhD陰性獻血者不規(guī)則抗體檢測結(jié)果
2.229例不規(guī)則抗體篩查陽性RhD陰性獻血者表型分布情況 見表2。
表2 不規(guī)則抗體篩查陽性獻血者表型分布情況(n)
不規(guī)則抗體是指不符合ABO血型系統(tǒng)Landsteiner法則的抗體,即抗A、抗B以外的紅細胞血型抗體。不規(guī)則抗體的分布具有多態(tài)性和復(fù)雜性的特點,不規(guī)則抗體的發(fā)生頻率和特異性分布在不同人群中有一定差別。Rh 血型系統(tǒng)是臨床上最重要的血型系統(tǒng)之一,其重要性僅次于 ABO 血型系統(tǒng)。其中D抗原具有較強的免疫原性,RhD陰性獻血者產(chǎn)生不規(guī)則抗體的幾率明顯大于RhD陽性獻血者,因此對RhD陰性獻血者進行不規(guī)則抗體檢測和分析,是保證輸血安全有效的重要措施。
目前我國大部分血站采用反定型O型紅細胞在鹽水介質(zhì)中篩查不規(guī)則抗體,由于受檢驗方法的限制,易造成一部分免疫性抗體的漏檢。而大部分有臨床意義的不規(guī)則抗體多為免疫性IgG類抗體,只有借助于酶法、抗人球蛋白試驗、凝聚胺法等才能檢出。如果將含有不規(guī)則抗體的RhD陰性血輸注給RhD陰性受血者,不僅可能影響輸血效果,而且可能產(chǎn)生溶血性輸血不良反應(yīng)。本中心對初篩RhD陰性的獻血者采用抗人球蛋白試驗篩查不規(guī)則抗體,陽性檢出率為2.41%,高于以往報道的0.29%~0.42%的檢出率[3],一方面可能與篩查方法有關(guān),另一方面可能與獻血人群的不同來源有關(guān),還有待于大樣本的進一步研究。本資料結(jié)果發(fā)現(xiàn),不規(guī)則抗體篩查陽性RhD陰性獻血者表型分布以ccdee和Ccdee多見,與有關(guān)調(diào)查相符[4,5]。不規(guī)則抗體篩查陽性RhD陰性獻血者中,女性所占比例較高,有可能與女性除輸血免疫等外又增加了妊娠免疫產(chǎn)生不規(guī)則抗體的機會有關(guān)。
1 鄭小凡,祝宏,吳亞玲,等. 應(yīng)用Olympus PK 7200血型儀篩查獻血者意外抗體.中國輸血雜志,2009,22(1):48~49.
2 中華人民共和國衛(wèi)生部.中國輸血技術(shù)操作規(guī)程(血站部分).第三版,天津: 天津科學(xué)技術(shù)出版社,1997.80~86.
3 任本春,池泉.獻血者紅細胞血型不規(guī)則抗體篩查必要性的探討.中國輸血雜志,2010,23(2):126~127.
4 李健,周英,呂文彬,等.Rh(D)陰性獻血者不規(guī)則抗體檢測的結(jié)果分析.四川醫(yī)學(xué),2012,33 (2):341~343.
5 陳榮倉,陳筱華,林碧,等. Rh(D)陰性獻血者的表型和不規(guī)則抗體篩選結(jié)果分析.臨床血液學(xué)雜志,2009,22(8):429~430.
河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點課題計劃(20130133)
054800 河北省清河縣人民醫(yī)院檢驗科(于金濤)065700 河北省廊坊市第四人民醫(yī)院檢驗科(劉文國郭長義 宋雪冬)050071 河北省血液中心檢驗科(宋任浩)