• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    鹽脅迫對鹽生杜氏藻生長及葉綠素熒光特性的影響*

    2015-10-16 03:43:28帥,梁
    關(guān)鍵詞:鹽生微藻鹽度

    王 帥,梁 英

    (1.中國海洋大學海水養(yǎng)殖教育部重點實驗室,山東 青島266003;2.國家海洋局第一海洋研究所海洋生態(tài)研究中心,山東 青島266061;3.中國海洋大學海洋生命學院,山東 青島266003)

    鹽度是影響海洋微藻生長的重要環(huán)境因子,鹽度的高低必然會促進或抑制海洋微藻的生長,直接或間接影響其光合作用和呼吸作用。大量實驗結(jié)果表明[1-4],鹽度會通過多條途徑來影響植物光合作用,例如:離子脅迫和滲透脅迫,高鹽條件下還會造成水分平衡的紊亂、影響光合電子傳遞效率和CO2同化作用。傳統(tǒng)方法確定微藻生存鹽度和最適生長鹽度范圍是通過比較微藻在不同鹽度條件下的細胞密度,耗時較多[5]。為了解決這一問題,國外某些學者利用植物體內(nèi)葉綠素作為天然探針,在黑暗環(huán)境中適應數(shù)分鐘,然后置于適當?shù)募ぐl(fā)光下,通過檢測植物發(fā)出的隨時間變化的微弱熒光信號(Kautsky效應)來測定微藻對鹽度的適應范圍[6]。

    利用葉綠素熒光分析技術(shù)可對植物進行活體測定和診斷,這一方法具有快速、準確和需要樣品量少等優(yōu)點,目前,采用葉綠素熒光分析技術(shù)研究不同鹽度對高等植物光合作用影響的報道相對較多,但由于實驗材料、生長階段和處理時間等因素的不同,研究結(jié)果不太一致。Singh等[7]研究結(jié)果表明鹽脅迫能促進PSII的功能;而Allakhverdiev等[8]研究發(fā)現(xiàn)鹽脅迫會抑制PSII的功能;Qia等[9]報道鹽脅迫對PSII的功能沒有造成明顯的影響。迄今為止,有關(guān)鹽脅迫對植物葉綠素熒光特性影響已有較多的報道[10-14],但目前還未見鹽脅迫對高耐鹽藻株—鹽生杜氏藻葉綠素熒光特性影響的報道。

    鹽生杜氏藻是綠藻門中唯一一種無細胞壁的單細胞海洋微藻,是高鹽環(huán)境中常見藻株,具有很強的耐鹽性,因其富含胡蘿卜素和甘油而逐漸受到重視,近年來已被國內(nèi)外廣泛應用于環(huán)境脅迫的研究[15]。本文采用Water-PAM葉綠素熒光儀研究不同鹽濃度對1株具有很好的耐受高鹽脅迫特性的鹽生杜氏藻生長及葉綠素熒光特性的影響,以期為篩選耐鹽微藻藻株提供重要的方法,并為揭示鹽生杜氏藻光合作用抵抗鹽脅迫時的響應機制提供參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 藻種

    實驗所用鹽生杜氏藻(Dunaliella salina)(代號MACC/C43)藻種來源于中國海洋大學藻種庫。

    1.2 微藻培養(yǎng)及鹽脅迫處理

    培養(yǎng)采用f/2培養(yǎng)基[16],培養(yǎng)條件為:培養(yǎng)溫度為(20±1)℃,光照強度為100μmol·m-2·s-1,采用連續(xù)光照進行培養(yǎng)。

    在250mL的錐形瓶中進行鹽脅迫實驗,將處于指數(shù)生長期的鹽生杜氏藻離心洗滌后,以2.08×104個/mL的接種量分別培養(yǎng)在不同鹽度的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)液鹽度設(shè)定為5,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,110,120,130等梯度,每個鹽度3個平行組。培養(yǎng)過程中隨機調(diào)換錐形瓶并搖動3次/d。在接種12、24和48h后取樣,測定鹽生杜氏藻的葉綠素熒光參數(shù)、細胞密度和葉綠素含量。

    1.3 葉綠素熒光參數(shù)、葉綠素含量的測定及數(shù)據(jù)處理

    按照王帥等[13]的方法,采用 Water-PAM 葉綠素熒光儀進行熒光參數(shù)和葉綠素含量的測定。

    采用Origin Pro8.0軟件進行作圖。采用SPSS11.0軟件進行多因子方差分析(鹽度、脅迫時間以及二者的交互作用(鹽度×時間))和相關(guān)性分析。

    2 結(jié)果

    2.1 鹽度對鹽生杜氏藻葉綠素熒光參數(shù)的影響

    圖1和表1給出了鹽度和脅迫時間對鹽生杜氏藻葉綠素熒光參數(shù)的影響。表1(a)的多因子方差分析結(jié)果表明,在整個培養(yǎng)過程中,鹽度和脅迫時間對鹽生杜氏藻的熒光參數(shù) Fv/Fm、ΦPSII、Fv/Fo、rETR、qP 和NPQ均有顯著影響(P<0.001),其中鹽度對參數(shù)Fv/Fm、Fv/Fo和 qP 的 影 響 更 顯 著,而 脅 迫 時 間 對rETR和NPQ的影響更顯著。表1(b)給出的多重比較結(jié)果表明,F(xiàn)v/Fm、ΦPSII和Fv/Fo值在鹽度100時最高,但在鹽度20~110范圍內(nèi)無顯著性差異;rETR值在鹽度為60時達到最高;qP值在鹽度為5時最高;NPQ值則在鹽度為90時最高。脅迫時間對該藻的上述6個熒光參數(shù)值均有顯著影響,各參數(shù)值均隨脅迫時間的延長而逐漸升高。

    鹽生杜氏藻的熒光參數(shù)與鹽度之間的相關(guān)性見表2,鹽度在5~70之間的范圍內(nèi),脅迫12和48h后,鹽生杜氏藻的Fv/Fm、ΦPSII、Fv/Fo和rETR與鹽度呈極顯著的正相關(guān)關(guān)系,脅迫48h后qP與鹽度呈顯著的正相關(guān)關(guān)系。NPQ在脅迫12h時與鹽度無明顯的相關(guān)性,在脅迫24和48h時,該參數(shù)與鹽度呈極顯著正相關(guān);鹽度在70~130范圍內(nèi)時,熒光參數(shù)Fv/Fm、ΦPSII、Fv/Fo、rETR 以及qP均與鹽度呈極顯著的負相關(guān)性;脅迫12h后,NPQ與鹽度呈顯著的負相關(guān);脅迫24h后,NPQ與鹽度呈極顯著的負相關(guān);脅迫48h后與鹽度無明顯的相關(guān)性。

    圖1 鹽度對鹽生杜氏藻熒光參數(shù)、細胞密度和葉綠素含量的影響Fig.1 Effects of salinity on the fluorescence parameters,cell density and chlorophyll content of D.salina

    ?

    表2 鹽生杜氏藻熒光參數(shù)、細胞密度及葉綠素含量與鹽度的相關(guān)系數(shù)Table 2 The interrelated coefficients of fluorescence parameters,cell density and chlorophyll content with salinity of D.salina

    2.2 鹽度對鹽生杜氏藻細胞密度和葉綠素含量的影響

    圖1和表1給出了鹽度和脅迫時間對鹽生杜氏藻細胞密度和葉綠素含量的影響。表1(a)的多因子方差分析表明,在整個培養(yǎng)過程中,鹽度、脅迫時間及其交互作用對該藻的葉綠素含量和細胞密度均產(chǎn)生了顯著影響(P<0.001),脅迫時間對上述2個參數(shù)的影響最為顯著。表1(b)給出的多重比較結(jié)果表明,鹽度在5~100之間的范圍內(nèi),48h后隨著鹽度的升高,細胞密度和葉綠素含量的值明顯增加,且均在鹽度100時達到最大值;鹽度在100~130之間時,上述2個參數(shù)的值隨鹽度升高而逐漸降低。鹽生杜氏藻的細胞密度和葉綠素含量數(shù)值均隨脅迫時間的延長而逐漸增加。

    表3給出的鹽生杜氏藻的熒光參數(shù)與細胞密度之間的相關(guān)關(guān)系,由表3可見,鹽生杜氏藻的Fv/Fm、ΦPSII、Fv/Fo和rETR與細胞密度呈極顯著的正相關(guān);脅迫12和24h后,qP和NPQ與細胞密度的相關(guān)性較差,qP和NPQ在脅迫48h后與細胞密度呈顯著的正相關(guān)性。

    表3 鹽生杜氏藻熒光參數(shù)及葉綠素含量與細胞密度的相關(guān)系數(shù)Table 3 The interrelated coefficient of fluorescence parameters and chlorophyll content with cell density of D.salina

    3 討論

    作為一種研究植物光合功能的新型植物活體檢測和診斷技術(shù),葉綠素熒光分析技術(shù)在測定植物光合作用的過程中,利用植物中葉綠素作為天然探針,在光能的吸收、傳遞、分配和耗散等方面具有獨特的優(yōu)勢,并且其快速、靈敏、不會對細胞造成損傷。國際上對葉綠素熒光分析技術(shù)的研究已成為熱點,并針對耐寒性、耐熱性、耐強光性和耐鹽性等多種逆境生理條件進行了研究,結(jié)果表明,葉綠素熒光技術(shù)在研究植物逆境生理方面有許多優(yōu)勢[17-19],但有關(guān)鹽脅迫對微藻光合作用影響的研究不多[12-13,20-22]。Fv/Fm比值是 PSII最大光化學量子產(chǎn)量,可以反映PSII的活性大小。正常生理狀態(tài)下參數(shù)Fv/Fm很穩(wěn)定,浮游植物Fv/Fm值保持在0.65左右[23],該參數(shù)不具有種間特異性,但植物受到脅迫后,F(xiàn)v/Fm值會明顯降低。有研究結(jié)果表明,微藻在鹽脅迫條件下,其PSII的活性會降低,反映在Fv/Fm會隨鹽度的增加而下降。畢永紅等[20]研究發(fā)現(xiàn),隨培養(yǎng)液中NaCl濃度的增加,發(fā)狀念珠藻(Nostoc flagelliforme)Fv/Fm比值逐漸降低,歐陽葉新等[21]對魚腥藻(Anabaenasp.)的研究也得到了相似的結(jié)果。而陳蘭周等[22]的實驗表明,爪哇偽枝藻(Scytonema javanicum)對鹽脅迫則很敏感,在0.1mol/L NaCl時Fv/Fm比值已下降至0.4左右。本實驗結(jié)果表明,鹽生杜氏藻有很強的耐鹽性,適宜鹽度范圍為20~110,在此鹽度范圍之間,F(xiàn)v/Fm比值無明顯降低,當?shù)望}脅迫(鹽度<20)和高鹽脅迫(鹽度>110)條件下,F(xiàn)v/Fm比值才開始逐漸降低。鹽脅迫條件下,鹽生杜氏藻的PSII熒光指標Fv/Fo、rETR 與Fv/Fm具有相同 的 變 化 趨勢,可見鹽生杜氏藻自身光系統(tǒng)的轉(zhuǎn)換能力較強。ΦPSII的變化,反映的是藻細胞同化力(NADPH,ATP)的形成,即碳的固定與同化作用,本實驗研究結(jié)果表明,在鹽度20~110之間,不影響鹽生杜氏藻對CO2的固定和同化。qP(光化學淬滅)的變化表明,吸收的光能用于電子傳遞,當qP降低時表示進行光合作用的電子正在減少,以熱的形式耗散的光能會逐漸增加,這與NPQ(非光化學淬滅)的變化是吻合的。本實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),鹽脅迫對熒光指標(qP和NPQ)都造成了一定程度的抑制作用。

    有關(guān)微藻耐鹽機制的研究,主要集中在光合色素和蛋白含量等方面。Rafiqul[24]等研究發(fā)現(xiàn),藍藻(Spirulina fusiformis)葉綠素a含量隨著NaCl濃度的增加而降低。藍藻(S.fusiformis)在較低NaCl濃度條件下,類胡蘿卜素含量降低;而在較高NaCl濃度條件下,其類胡蘿卜素含量增加。耐鹽藍藻(Anabaena doliolum)的葉綠素含量則隨著NaCl濃度的增加而增加[7]。鹽脅迫下,藻藍蛋白(PC)含量的變化結(jié)果較為一致,集胞藻(Synechocystis sp.)PCC6803在鹽處理下,PC含量明顯降低[25];藍藻(S.fusiformis)的 PC含量隨鹽濃度的增加而降低[24]。本實驗結(jié)果表明,在鹽度為20~110條件下,鹽脅迫不僅不會對耐鹽的鹽生杜氏藻造成損傷,反而會促進其生長,48h后隨著鹽度的升高,細胞密度和葉綠素含量逐漸增加,鹽度為100時,二者均達到最大值。但超過一定鹽度范圍(>110)后,高鹽脅迫對鹽生杜氏藻的PSII會產(chǎn)生傷害,主要表現(xiàn)在加速了藻體中葉綠素含量的降低(見圖1),可能高鹽(>110)會影響類囊體膜的穩(wěn)定性,加速葉綠素的分解,從而降低PSII反應中心的光合速率。目前對于微藻耐鹽機制的研究還不是十分清楚,僅從某一方面研究其耐鹽性還遠遠不夠,這有待于進行深入研究。

    鹽生杜氏藻屬于水產(chǎn)動物的優(yōu)質(zhì)餌料之一,但可能由于微藻藻株、培養(yǎng)條件等因素的不同,目前對鹽生杜氏藻適鹽范圍的報道并不一致。吳春[26]報道鹽生杜氏藻(D.salina)的最適鹽度范圍為20~30。而呂愛玲等[27]對中國渤海灣灘涂的綠色杜氏藻進行鹽度馴化實驗,認為綠色杜氏藻可在9~320的鹽度范圍生長,能耐受接近飽和的鹽度條件。本文的研究結(jié)果表明,鹽生杜氏藻對鹽度的適應范圍很廣,在鹽度20~110時,F(xiàn)v/Fm值無顯著性差異,這表明鹽度20~110均適于鹽生杜氏藻的生長,與之前利用葉綠素熒光技術(shù)對塔胞藻[13]的研究結(jié)果相比,本研究篩選得到的這株鹽生杜氏藻(D.salina)具有更好的耐鹽性,在高鹽條件下更有利于對其進行培養(yǎng)。即使鹽度在5~20之間的低鹽脅迫條件下,F(xiàn)v/Fm、ΦPSII、Fv/Fo、rETR、細胞密度和葉綠素含量等一系列指標均在逐漸增加(見圖1),這也是該藻株對鹽度較強適應性的一種表現(xiàn)。本實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),鹽生杜氏藻在鹽度5~110之間均能生長,最適鹽度為100。本文的結(jié)果表明,鹽生杜氏藻PSII的熒光指標(Fv/Fm、ΦPSII、Fv/Fo和rETR)與細胞密度均呈極顯著的正相關(guān)性,而且細胞密度也與葉綠素含量呈極顯著的正相關(guān)性,因此,在一定范圍內(nèi),可通過該藻PSII熒光指標的變化反映其細胞密度及葉綠素含量對鹽脅迫的耐受性。與計數(shù)細胞密度的傳統(tǒng)方法相比,葉綠素熒光分析方法更加快速、靈敏和準確,并且不會對藻細胞造成損傷[28-29]。

    現(xiàn)已證明,PSII的熒光指標更能反映植物的內(nèi)在性特點,因此,葉綠素熒光技術(shù)已成為篩選高等植物(擬南芥、枸杞,特別是小麥等)耐鹽品種的一種理想手段[1,4,14]。本文的結(jié)果表明,篩選得到的鹽生杜氏藻其耐鹽性很好,該藻 PSII的熒光指標(Fv/Fm、ΦPSII、Fv/Fo和rETR)與細胞密度具有良好的正相關(guān)關(guān)系,可用于該藻鹽脅迫耐受性的評價依據(jù),但目前對這方面研究的微藻品種還較少,PSII的熒光指標作為篩選耐鹽微藻的參考指標是否可行,有待針對不同的微藻品種和品系進行全面的實驗研究,以確定該方法的適應范圍及可靠性。

    [1] 趙昕,吳雨霞,趙敏桂,等.NaCl脅迫對鹽芥和擬南芥光合作用的影響 [J].植物學通報,2007,24(2):154-160.

    [2] 周麗,孟祥紅,劉成圣.滲透脅迫對杜氏鹽藻胞內(nèi)甘油含量及相關(guān)酶活性影響 [J].植物學通報,2006,23(2):145-151.

    [3] Rosarlo V E,Bronwyn J B,Liliana G R,et al.Salt stress in Thellungiella halopila activates Na+transport mechanisms required for salinity tolerance[J].Plant Physiol,2005,139:1507-1517.

    [4] 惠紅霞,許興,李前榮.NaCl脅迫對枸杞葉片甜菜堿、葉綠素熒光及葉綠素含量的影響 [J].干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究,2004,22(3):109-114.

    [5] 馮力霞.環(huán)境脅迫對4株微藻葉綠素熒光特性的研究 [D].青島:中國海洋大學,2006:1-85.

    [6] 馮永軍,史寶勝,董桂敏,等.葉綠素熒光誘導動力學在植物抗逆性及水果保鮮中的應用 [J].河北農(nóng)業(yè)大學學報,2003,26:89-92.

    [7] Singh D P,Kshatriya K.NaCl-induced oxidative damage in the cyanobacterium Anabaena doliolum [J].Curr Microbiol,2002,44(6):411-417.

    [8] Allakhverdiev S I,Klimov V V,Hagemenn M.Cellular energization protects the photosynthetic machinery against salt-induced inactivation in Synechococcus [J].Biochim Biophys Acta,2005,1708:201-208.

    [9] Qia N W,Lu Q T,Lu C M.Photosynthesis,photosystem II efficiency and the xanthophyll cycle in the salt-adapted halophyte Atri-plex centralasiatica[J].New Phytol,2003,159:479-486.

    [10] Lu C,Qiu N,Lu Q,et al.Does salt stress lead to increased susceptibility of photosystem Ⅱ to photoinhibition and changes in photosynthetic pigment composition in halophyte Suaeda salsa grown outdoors?[J].Plant Sci,2002,163:1063-1068.

    [11] Netondo G W,Onyango J C,Beck E.Sorghum and salinity:Ⅱ.Gas exchange and chlorophyll fluorescence of Sorghum under salt stress[J].Crop Sci,2004,44(3):806-811.

    [12] Lu C M,Vonshak A.Effects of salinity stress on photosystem II function in cyanobacterial Spirulina platensis cells[J].Physiol Plant,2002,114:405-413.

    [13] 梁 英,馮力霞,田傳遠,等.鹽脅迫對塔胞藻生長及葉綠素熒光動力學的影響 [J].中國海洋大學學報:自然科學版,2006,36(5):726-732.

    [14] 黃有總,張國平.葉綠素熒光測定技術(shù)在麥類作物耐鹽性鑒定中的應用 [J].麥類作物學報,2004,24(3):114-116.

    [15] 耿德貴,韓燕,王義琴,等.杜氏鹽藻的耐鹽機制研究進展和基因工程研究的展望 [J].植物學通報,2002,19(3):290-295.

    [16] Guillard R R,Ryther J H.Studies of marine planktonic diatoms.I.Cyclotella nana (Hustedt)and Detonula confervacea (Cleve)Gran[J].Can J Microbiol,1962,8:229-239.

    [17] Annick M,Elisabeth P,Gerard T.Osmotic adjustment,gas exchanges and chlorophyll fluorescence of a bexaploid triticale and its parental species under salt stress [J].Plant Physiol,2004,1619(1):25-33.

    [18] Bhargava S,Paranjpe S.Genotypic variation in the photosynthetic competence of Sorghum bicolor seedlings subjected to polyethylene glycol-mediated drought stress[J].Plant Physiol,2004,161(1):125-129.

    [19] Lavaud J,Rousseau B,Gorkom H J van,et al.Influence of the diadinoxanthin pool size on photoprotection in the marine planktonic diatom Phaeodactylum tricornutum [J].Plant Physiol,2002,129(3):1398-1406.

    [20] 畢永紅,鄧中洋,胡征宇,等.發(fā)狀念珠藻對鹽脅迫的響應 [J].水生生物學報,2005,29(2):125-129.

    [21] 歐陽葉新,施定基,黃開耀,等.魚腥藻7120響應NaCl脅迫的光合特性 [J].水生生物學報,2003,27(1):74-77.

    [22] 陳蘭周,劉永定,李敦海.鹽脅迫對爪哇偽枝藻生理生化特性的影響 [J].中國沙漠,2003,23(3):285-288.

    [23] SeppalaJ.fluorescence properties of Baltic sea phytoplankton[D].Helsinki:University of Helsinki,2009:1-43.

    [24] Rafiqul I M,Hassan A,Sulebele G,et al.Salt stress culture of blue-green algae Spirulina fusiformis [J].Pakistan Biological Sci,2003,6(7):648-650.

    [25] Marin K,Kanesaki Y,Los D A,et al.Gene expression profiling reflects physiological processes in salt acclimation of Synechocystis sp.Strain PCC 6803[J].Plant Physiol,2004,136:3290-3300.

    [26] 吳春,段舜山.鹽生杜氏藻對鹽度改變的生理響應 [J].生態(tài)科學,2006,25(2):135-138.

    [27] 呂愛玲,張福,馬若欣,等.中國渤海灣灘涂極端嗜鹽綠色杜氏藻生物學特性研究(二)[J].海湖鹽與化工,2004,34(3):19-25.

    [28] 梁英,馮力霞,尹翠玲.葉綠素熒光技術(shù)在微藻環(huán)境脅迫研究中的應用現(xiàn)狀及前景 [J].海洋科學,2007,31(1):71-76.

    [29] 王帥,梁英,馮力霞,等.重金屬脅迫對杜氏鹽藻生長及葉綠素熒光動力學的影響 [J].海洋科學,2010,34(10):38-48.

    猜你喜歡
    鹽生微藻鹽度
    代食品運動中微藻的科研與生產(chǎn)
    中國鹽生植物分布與鹽堿地類型的關(guān)系
    絮凝法采收生物燃料微藻的研究進展
    鹽度和pH對細角螺耗氧率和排氨率的影響
    鹽度脅迫對入侵生物福壽螺的急性毒性效應
    適用于高鹽度和致密巖層驅(qū)油的表面活性劑
    微藻對低溫響應的Ca2+信號傳導途徑研究進展
    膠州灣夏季鹽度長期輸運機制分析
    鹽生海蘆筍內(nèi)生真菌Salicorn35的分離鑒定與抗氧化發(fā)酵條件優(yōu)化
    食品科學(2013年19期)2013-03-11 18:27:32
    一株不產(chǎn)生孢子的鹽生海蘆筍內(nèi)生真菌鑒定
    食品科學(2013年17期)2013-03-11 18:26:55
    午夜精品一区二区三区免费看| 色综合婷婷激情| 日日夜夜操网爽| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 欧美日本亚洲视频在线播放| 舔av片在线| 国产熟女午夜一区二区三区| 久久国产精品人妻蜜桃| 婷婷精品国产亚洲av| 日韩成人在线观看一区二区三区| 一个人免费在线观看电影 | 成年女人毛片免费观看观看9| 黄色毛片三级朝国网站| 悠悠久久av| 亚洲,欧美精品.| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 午夜激情福利司机影院| 亚洲成av人片在线播放无| 国产高清视频在线播放一区| 国产精品九九99| 香蕉国产在线看| 日韩欧美国产在线观看| 在线观看www视频免费| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲五月天丁香| 人妻久久中文字幕网| 国产精品亚洲美女久久久| aaaaa片日本免费| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产精品综合久久久久久久免费| 日韩欧美三级三区| 禁无遮挡网站| 免费观看精品视频网站| 亚洲 国产 在线| 麻豆国产97在线/欧美 | 一区二区三区激情视频| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲五月天丁香| 欧美国产日韩亚洲一区| 成年版毛片免费区| 丰满人妻一区二区三区视频av | 国产蜜桃级精品一区二区三区| 一个人免费在线观看电影 | 757午夜福利合集在线观看| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲国产精品成人综合色| 久久草成人影院| 欧美乱色亚洲激情| 日韩欧美精品v在线| 俄罗斯特黄特色一大片| 最新在线观看一区二区三区| 亚洲国产精品合色在线| 国产精品久久久人人做人人爽| a级毛片在线看网站| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 在线a可以看的网站| 久久亚洲精品不卡| 禁无遮挡网站| 亚洲中文日韩欧美视频| 欧美在线黄色| 在线观看午夜福利视频| 久久久精品大字幕| 此物有八面人人有两片| 亚洲性夜色夜夜综合| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 在线国产一区二区在线| 啦啦啦免费观看视频1| 精品免费久久久久久久清纯| 久久伊人香网站| 成年版毛片免费区| 天堂动漫精品| 老司机午夜十八禁免费视频| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲,欧美精品.| 亚洲成av人片免费观看| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 久久精品综合一区二区三区| 一进一出抽搐动态| 两个人看的免费小视频| 国产人伦9x9x在线观看| 亚洲精品一区av在线观看| 亚洲乱码一区二区免费版| 日韩欧美三级三区| 日本免费a在线| 亚洲精品久久国产高清桃花| 最近最新免费中文字幕在线| 91国产中文字幕| 可以在线观看的亚洲视频| 91大片在线观看| 亚洲成人免费电影在线观看| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 大型av网站在线播放| 真人一进一出gif抽搐免费| 啦啦啦韩国在线观看视频| 一区二区三区高清视频在线| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 曰老女人黄片| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 免费看十八禁软件| 中文字幕av在线有码专区| 欧美日本亚洲视频在线播放| 日本 欧美在线| 国产人伦9x9x在线观看| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 18禁美女被吸乳视频| 午夜福利成人在线免费观看| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 男女床上黄色一级片免费看| 热99re8久久精品国产| 男男h啪啪无遮挡| 国产三级在线视频| 久久精品成人免费网站| 麻豆一二三区av精品| 99国产极品粉嫩在线观看| 听说在线观看完整版免费高清| 又爽又黄无遮挡网站| 亚洲一区中文字幕在线| 中文字幕人妻丝袜一区二区| av片东京热男人的天堂| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产黄a三级三级三级人| 在线看三级毛片| 少妇熟女aⅴ在线视频| 草草在线视频免费看| 俺也久久电影网| 日韩大尺度精品在线看网址| 色在线成人网| 日韩大码丰满熟妇| 9191精品国产免费久久| 国产av一区二区精品久久| 日本一二三区视频观看| 人人妻人人看人人澡| 无遮挡黄片免费观看| cao死你这个sao货| 精品第一国产精品| 国产亚洲精品第一综合不卡| 免费人成视频x8x8入口观看| 麻豆一二三区av精品| 一级a爱片免费观看的视频| 久久亚洲真实| 国产精品野战在线观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 欧美日韩乱码在线| 淫妇啪啪啪对白视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 丁香六月欧美| 国产激情偷乱视频一区二区| 一本精品99久久精品77| 在线观看66精品国产| 少妇被粗大的猛进出69影院| 免费看十八禁软件| x7x7x7水蜜桃| 久久久久久久久中文| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 99久久99久久久精品蜜桃| 97碰自拍视频| 九九热线精品视视频播放| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 日韩欧美国产在线观看| 一边摸一边做爽爽视频免费| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 免费看十八禁软件| 正在播放国产对白刺激| 日韩精品中文字幕看吧| 无遮挡黄片免费观看| 免费在线观看完整版高清| or卡值多少钱| 丝袜人妻中文字幕| 禁无遮挡网站| 夜夜夜夜夜久久久久| 日本三级黄在线观看| 不卡av一区二区三区| 久久欧美精品欧美久久欧美| 精品久久久久久久末码| 欧美日本视频| 久久天堂一区二区三区四区| 国产日本99.免费观看| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 十八禁网站免费在线| 欧美3d第一页| 又紧又爽又黄一区二区| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| www.熟女人妻精品国产| 最好的美女福利视频网| 青草久久国产| 香蕉久久夜色| 亚洲av成人av| 精品久久久久久久久久久久久| ponron亚洲| 国产成人精品无人区| 日本一本二区三区精品| 午夜福利欧美成人| 国产av又大| 日韩国内少妇激情av| 欧美午夜高清在线| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 91字幕亚洲| 一级片免费观看大全| 成人精品一区二区免费| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 午夜精品久久久久久毛片777| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲av成人av| 级片在线观看| 国产又色又爽无遮挡免费看| 日本一区二区免费在线视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 欧美不卡视频在线免费观看 | 看黄色毛片网站| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产精品乱码一区二三区的特点| 三级国产精品欧美在线观看 | 999精品在线视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 最近视频中文字幕2019在线8| 首页视频小说图片口味搜索| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 黄色a级毛片大全视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 麻豆久久精品国产亚洲av| 日韩精品免费视频一区二区三区| 亚洲精品美女久久av网站| 久久午夜亚洲精品久久| xxx96com| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 他把我摸到了高潮在线观看| www.999成人在线观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 很黄的视频免费| 制服人妻中文乱码| 欧美日本视频| 亚洲真实伦在线观看| 国产精品精品国产色婷婷| aaaaa片日本免费| 亚洲av成人一区二区三| 亚洲全国av大片| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 搡老妇女老女人老熟妇| 在线观看日韩欧美| aaaaa片日本免费| 天堂av国产一区二区熟女人妻 | 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲片人在线观看| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲成人久久爱视频| 国产av麻豆久久久久久久| 国产精品久久久久久久电影 | 午夜激情福利司机影院| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| av福利片在线观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| 麻豆av在线久日| 91大片在线观看| 精品国产亚洲在线| 在线免费观看的www视频| 亚洲成av人片免费观看| 级片在线观看| 搞女人的毛片| 久久人人精品亚洲av| 亚洲九九香蕉| 亚洲免费av在线视频| 亚洲专区字幕在线| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 给我免费播放毛片高清在线观看| 欧美最黄视频在线播放免费| 搞女人的毛片| 国产亚洲精品一区二区www| 午夜免费观看网址| 成年免费大片在线观看| 久久这里只有精品19| 欧美日韩国产亚洲二区| 在线永久观看黄色视频| 久久香蕉激情| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 无遮挡黄片免费观看| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 国产爱豆传媒在线观看 | 黄色毛片三级朝国网站| 少妇粗大呻吟视频| 淫秽高清视频在线观看| 精品日产1卡2卡| 日本成人三级电影网站| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 91老司机精品| 91麻豆精品激情在线观看国产| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲精品在线观看二区| 热99re8久久精品国产| 国产一区二区三区视频了| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲一区二区三区不卡视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 九色国产91popny在线| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 亚洲 国产 在线| 两性夫妻黄色片| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 免费搜索国产男女视频| 欧美日韩精品网址| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 国产亚洲欧美在线一区二区| 精品国内亚洲2022精品成人| 五月玫瑰六月丁香| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产av一区二区精品久久| 性欧美人与动物交配| 熟女电影av网| 搡老岳熟女国产| 国产野战对白在线观看| av视频在线观看入口| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲成人久久性| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | www.熟女人妻精品国产| 国产一级毛片七仙女欲春2| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 成人国语在线视频| 国产精品亚洲一级av第二区| 国产精品爽爽va在线观看网站| 久久久国产成人精品二区| 国产乱人伦免费视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产高清videossex| 日韩欧美精品v在线| 老司机午夜十八禁免费视频| 日韩免费av在线播放| 国产欧美日韩一区二区精品| 色哟哟哟哟哟哟| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| av免费在线观看网站| cao死你这个sao货| 婷婷精品国产亚洲av| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产精品精品国产色婷婷| 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲无线在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲精品色激情综合| 久久香蕉精品热| 欧美性猛交黑人性爽| 在线观看免费午夜福利视频| 欧美乱色亚洲激情| 欧美成人午夜精品| 国产成人系列免费观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 嫁个100分男人电影在线观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 黄色视频不卡| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产精品亚洲美女久久久| 香蕉av资源在线| 一本一本综合久久| 国产av麻豆久久久久久久| 美女午夜性视频免费| 十八禁人妻一区二区| 国产探花在线观看一区二区| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| av有码第一页| 国产成人欧美在线观看| 久热爱精品视频在线9| 亚洲熟妇熟女久久| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 成人国产一区最新在线观看| a级毛片在线看网站| 韩国av一区二区三区四区| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲一区高清亚洲精品| 不卡一级毛片| 欧美成人性av电影在线观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 黄色女人牲交| 亚洲美女视频黄频| 母亲3免费完整高清在线观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 亚洲欧美精品综合久久99| 神马国产精品三级电影在线观看 | 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 久久国产乱子伦精品免费另类| 精品欧美国产一区二区三| 手机成人av网站| 九九热线精品视视频播放| 国产激情欧美一区二区| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲在线自拍视频| 88av欧美| 国产人伦9x9x在线观看| 国产精品久久久久久精品电影| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 嫩草影视91久久| 中亚洲国语对白在线视频| 色老头精品视频在线观看| 国产成人aa在线观看| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 怎么达到女性高潮| 精品国产美女av久久久久小说| 精品久久蜜臀av无| 精品电影一区二区在线| 香蕉国产在线看| 一级毛片精品| 99在线人妻在线中文字幕| 欧美另类亚洲清纯唯美| 无遮挡黄片免费观看| av片东京热男人的天堂| 色哟哟哟哟哟哟| 男插女下体视频免费在线播放| av免费在线观看网站| 亚洲黑人精品在线| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 免费看美女性在线毛片视频| 天堂影院成人在线观看| 老汉色∧v一级毛片| 岛国在线免费视频观看| 9191精品国产免费久久| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲成a人片在线一区二区| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲成人久久爱视频| 国产爱豆传媒在线观看 | 婷婷亚洲欧美| 听说在线观看完整版免费高清| 国产亚洲精品av在线| АⅤ资源中文在线天堂| 日本一本二区三区精品| 一区福利在线观看| 国产视频内射| 亚洲真实伦在线观看| 无人区码免费观看不卡| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 国产乱人伦免费视频| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲午夜理论影院| 91麻豆精品激情在线观看国产| 成人亚洲精品av一区二区| 日韩欧美精品v在线| 国产精品亚洲av一区麻豆| 日本五十路高清| 黄色片一级片一级黄色片| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产高清视频在线播放一区| 成人手机av| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 狠狠狠狠99中文字幕| x7x7x7水蜜桃| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 欧美黑人欧美精品刺激| 久久草成人影院| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲五月天丁香| 国产免费男女视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| www.熟女人妻精品国产| 亚洲欧美日韩无卡精品| 很黄的视频免费| 久久婷婷成人综合色麻豆| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲专区字幕在线| 18禁国产床啪视频网站| 91麻豆av在线| 成人av一区二区三区在线看| 久久久精品欧美日韩精品| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产成人系列免费观看| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 日本精品一区二区三区蜜桃| 女警被强在线播放| 久久国产精品影院| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产精品野战在线观看| 哪里可以看免费的av片| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲国产看品久久| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲自拍偷在线| 又爽又黄无遮挡网站| 男人舔女人的私密视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产1区2区3区精品| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 最新在线观看一区二区三区| 精品福利观看| 91成年电影在线观看| 午夜成年电影在线免费观看| 久久精品人妻少妇| 久久久久久久久中文| 久久久国产欧美日韩av| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲精品在线美女| 日本a在线网址| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 成在线人永久免费视频| 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲精品色激情综合| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国内揄拍国产精品人妻在线| e午夜精品久久久久久久| 成人国产一区最新在线观看| 成人av在线播放网站| 久久国产精品影院| 久久精品91无色码中文字幕| 在线观看免费视频日本深夜| 精品久久久久久久末码| 高潮久久久久久久久久久不卡| 在线观看一区二区三区| 国产v大片淫在线免费观看| 婷婷精品国产亚洲av在线| 午夜免费激情av| 国产精品98久久久久久宅男小说| 人成视频在线观看免费观看| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 一级片免费观看大全| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲熟女毛片儿| 香蕉国产在线看| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 十八禁人妻一区二区| 国产午夜福利久久久久久| av福利片在线| 国产一区在线观看成人免费| 亚洲 欧美一区二区三区| av在线天堂中文字幕| 午夜两性在线视频| 首页视频小说图片口味搜索| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 欧美精品啪啪一区二区三区| 久久久国产成人免费| 国产不卡一卡二| 级片在线观看| 久久中文字幕人妻熟女| 国产99白浆流出| 欧美一级毛片孕妇| 99在线人妻在线中文字幕| 激情在线观看视频在线高清| 女警被强在线播放| 国产精品久久久久久精品电影| 亚洲av片天天在线观看| a在线观看视频网站| 午夜免费成人在线视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 狠狠狠狠99中文字幕| 日韩欧美 国产精品| www.精华液| or卡值多少钱| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 国产v大片淫在线免费观看| 日韩三级视频一区二区三区| 老司机在亚洲福利影院| 国产欧美日韩一区二区精品| 一区福利在线观看| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 国产精品影院久久| 久久热在线av| 久久精品国产亚洲av高清一级| 老司机在亚洲福利影院| 午夜免费激情av| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 日韩欧美国产一区二区入口| 在线看三级毛片| 亚洲国产精品sss在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 在线永久观看黄色视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 天天添夜夜摸| 欧美性长视频在线观看| 最近最新免费中文字幕在线| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲五月婷婷丁香| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 欧美日韩一级在线毛片| 婷婷精品国产亚洲av在线| 精品日产1卡2卡| 久久中文看片网| 精品久久久久久久久久免费视频| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲精华国产精华精| 日本黄大片高清| 国产亚洲欧美98| 哪里可以看免费的av片| 一级黄色大片毛片| www国产在线视频色| 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产单亲对白刺激| 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 久久香蕉激情| 美女大奶头视频| 亚洲av成人精品一区久久| 国产成人精品久久二区二区91| 999久久久国产精品视频| 老司机午夜福利在线观看视频| 宅男免费午夜| 中文资源天堂在线| 久久午夜亚洲精品久久| 两个人免费观看高清视频| 无限看片的www在线观看| 国产成人aa在线观看| 亚洲av美国av|