2010～2013年上海地區(qū)實(shí)驗(yàn)大鼠小鼠病原體感染情況分析

馮麗萍, 陶凌云, 馮　潔, 謝建云, 林金杏, 王勝昌, 周　潔, 魏曉鋒, 高　誠(chéng), 邢正弘（上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心, 上?！?01203）

2010～2013年上海地區(qū)實(shí)驗(yàn)大鼠小鼠病原體感染情況分析

馮麗萍, 陶凌云, 馮潔, 謝建云, 林金杏, 王勝昌, 周潔, 魏曉鋒, 高誠(chéng), 邢正弘（上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心, 上海201203）

目的了解上海地區(qū)實(shí)驗(yàn)大鼠小鼠病原體感染情況。方法對(duì)委托和抽樣的上海地區(qū)清潔級(jí)和SPF級(jí)大鼠小鼠依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病毒、細(xì)菌和寄生蟲檢測(cè)。結(jié)果2010～2013年，上海地區(qū)實(shí)驗(yàn)大鼠小鼠主要檢出的病原菌有金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、支原體和泰澤病原體；主要檢出的病毒有小鼠肝炎病毒、仙臺(tái)病毒等； 主要檢出的寄生蟲有蠕蟲、鞭毛蟲、體外寄生蟲。盡管小鼠的金黃色葡萄球菌陽(yáng)性率呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，但是泰澤病原體和支原體的抗體陽(yáng)性率都呈現(xiàn)增加趨勢(shì)。大鼠泰澤病原體、仙臺(tái)病毒抗體陽(yáng)性率及大鼠蠕蟲陽(yáng)性率逐年增加。結(jié)論從病原體感染情況來(lái)看，上海地區(qū)實(shí)驗(yàn)大鼠小鼠質(zhì)量有待提高，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)管部門應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)上海地區(qū)實(shí)驗(yàn)大鼠小鼠的管理和質(zhì)量監(jiān)測(cè)。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物； 病原體檢測(cè)； 陽(yáng)性率

對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量監(jiān)測(cè)是非常必要的，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的特殊性決定了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抽查檢驗(yàn)的專業(yè)性、技術(shù)性和法定性［7］。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)和使用單位為了解本單位實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量，也會(huì)委托實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主管部門對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行特定指標(biāo)的檢驗(yàn)，這也是對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量控制的必要且有益的補(bǔ)充，具有十分重要的意義。

1　材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均來(lái)自上海地區(qū)具有《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證》或者《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證》且規(guī)模較大的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)和使用單位，包括委托檢驗(yàn)（其中包含少量來(lái)自江浙地區(qū)委托檢測(cè)樣品）和年檢抽查兩部分。

1.2主要試劑和儀器

依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)方法、檢測(cè)儀器和試劑均參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求配備。

1.3檢測(cè)方法

按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)開展相關(guān)檢測(cè)［8-14］。

超聲表現(xiàn)為:未探及左冠狀動(dòng)脈在主動(dòng)脈的開口,左冠狀動(dòng)脈開口于肺動(dòng)脈瓣上,多位于后側(cè)壁,右冠狀動(dòng)脈開口于主動(dòng)脈,內(nèi)徑增寬,平均為3mm,左室明顯增大,室間隔與左室后壁搏動(dòng)幅度明顯減低,心功減低,EF值最低為28%,最高為40%,平均為32%,腱索僵硬,增粗,回聲增強(qiáng),乳頭肌回聲增強(qiáng)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

各年度病原體陽(yáng)性率分析比較，采用卡方分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.12010-2013年小鼠病原體檢測(cè)結(jié)果

從表1可以看出，上海地區(qū)實(shí)驗(yàn)小鼠中主要檢出的病原菌有金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌。金黃色葡萄球菌陽(yáng)性率逐年下降，2011年和2012年均有顯著下降。2013年綠膿桿菌陽(yáng)性率有極顯著性上升（P＜0.01）； 小鼠支原體和泰澤病原體的抗體陽(yáng)性率均呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)。

血清學(xué)反應(yīng)分析表明，近幾年小鼠肝炎病毒抗體陽(yáng)性率逐年上升，平均抗體陽(yáng)性率是6.24%。仙臺(tái)病毒抗體在小鼠中也常被檢出，2010～2012年抗體陽(yáng)性率有顯著性上升，而2013年該病毒的抗體陽(yáng)性率有顯著下降，表明該病毒近年來(lái)得到有效控制，需要繼續(xù)跟蹤。此外小鼠肺炎病毒抗體，小鼠細(xì)小病毒抗體偶有檢出（表2）。

小鼠中的寄生蟲檢測(cè)結(jié)果表明（表3），蠕蟲和鞭毛蟲的陽(yáng)性率比較高。蠕蟲的陽(yáng)性率呈現(xiàn)明顯的上升趨勢(shì)，2011年蠕蟲的陽(yáng)性率顯著增加。小鼠蠕蟲陽(yáng)性率從2011年上升超過(guò)5倍后，一直維持較高的水平。2010年至2013年4年間，鞭毛蟲平均陽(yáng)性率為7.12%，整體呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。

從2010年到2013年, 泰澤病原體是大鼠中檢出的最主要的病原菌, 平均抗體陽(yáng)性率高達(dá)16.57%，2011年有顯著性增加。大鼠的泰澤抗體陽(yáng)性率2011年上升超過(guò)2倍后，一直居高不下（表4）。和小鼠中病原體的檢測(cè)結(jié)果類似，金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌亦是大鼠中常見的檢出病原體，金黃色葡萄球菌陽(yáng)性率呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，而綠膿桿菌的陽(yáng)性率近年來(lái)略有下降。

近幾年大鼠中仙臺(tái)病毒抗體陽(yáng)性率逐年上升,平均陽(yáng)性率是4.41%, 卡方分析顯示，2010～2012年差異不顯著, 而2013年則有了顯著增長(zhǎng), 表明2013年仙臺(tái)病毒抗體陽(yáng)性率上升較大, 應(yīng)該引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)和使用單位的重視。大鼠細(xì)小病毒RV株抗體和大鼠細(xì)小病毒H-1株抗體也出現(xiàn)抗體陽(yáng)性（表5）。

大鼠中蠕蟲的陽(yáng)性率逐年增加，鞭毛蟲僅在2011年有檢出，而體外寄生蟲4年間均未檢出。

表 1　小鼠病原菌檢測(cè)結(jié)果　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　%

表 2　小鼠病毒檢測(cè)結(jié)果　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　%

表 3　小鼠寄生蟲檢測(cè)結(jié)果　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　%

表 4　大鼠病原菌檢測(cè)結(jié)果　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　%

表 5　大鼠病毒檢測(cè)結(jié)果　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　%

表 6　大鼠寄生蟲檢測(cè)結(jié)果　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　%

表 7　清潔級(jí)和SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)小鼠病原體感染情況　　　　　　　　　　　　　　　　　　　%

表 8　清潔級(jí)和SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)大鼠病原體感染情況　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　%

2.3比較不同等級(jí)實(shí)驗(yàn)大鼠小鼠病原體感染情況

以2012～2013年實(shí)驗(yàn)小鼠為例，僅有仙臺(tái)病毒抗體陽(yáng)性率是清潔級(jí)高于SPF級(jí)，而泰澤病原體、體外寄生蟲、全部蠕蟲的陽(yáng)性率均為SPF級(jí)高于清潔級(jí)。另外，2012年支原體抗體陽(yáng)性率，2013年小鼠肝炎病毒抗體陽(yáng)性率均為SPF級(jí)高于清潔級(jí)（見表7）。SPF級(jí)和清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)小鼠微生物及寄生蟲的質(zhì)量控制，均需要加強(qiáng)管理。

比較2012～2013年實(shí)驗(yàn)大鼠不同等級(jí)的病原體陽(yáng)性率，全部蠕蟲陽(yáng)性率是清潔級(jí)高于SPF級(jí)，而泰澤病原體抗體陽(yáng)性率則是SPF級(jí)高于清潔級(jí)。另外, 2012年支原體抗體陽(yáng)性率是SPF級(jí)高于清潔級(jí), 2013年支原體、仙臺(tái)病毒抗體陽(yáng)性率是清潔級(jí)高于SPF級(jí)（表8）。由此可見，實(shí)驗(yàn)大鼠的清潔級(jí)和SPF級(jí)均未能很好地控制微生物及寄生蟲感染。

綜合實(shí)驗(yàn)大鼠小鼠的結(jié)果可知，并非實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等級(jí)越高質(zhì)量控制就越好。隨著生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等級(jí)要求越來(lái)越高，但在提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等級(jí)過(guò)程中，更應(yīng)關(guān)注實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量。

3　討論

3.1管理模式需要依據(jù)大數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)作更科學(xué)有效的選擇

針對(duì)2013年實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)單位和使用單位的送檢大鼠小鼠的批次感染情況進(jìn)行分析比較。2013年實(shí)驗(yàn)小鼠檢測(cè)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)單位共統(tǒng)計(jì)28批次，其中陽(yáng)性批次為13批，批次陽(yáng)性率為46.43%； 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用單位為116批次，陽(yáng)性批次為62批，陽(yáng)性率為53.45%。2013年實(shí)驗(yàn)大鼠檢測(cè)結(jié)果為，生產(chǎn)單位4批次，其中陽(yáng)性批次為1批次，陽(yáng)性率為25%； 使用單位為40批次，其中陽(yáng)性批次為29批次，陽(yáng)性率為72.5%。生產(chǎn)單位陽(yáng)性感染批次的比例小于使用單位陽(yáng)性感染批次，原因可能是使用單位性質(zhì)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用方式多樣等引起。此外，在檢測(cè)批次總數(shù)來(lái)看，使用單位動(dòng)物批次數(shù)目遠(yuǎn)大于生產(chǎn)單位，這提示使用單位更重視動(dòng)物的質(zhì)量監(jiān)測(cè)。由于市場(chǎng)因素，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)單位送檢主觀意愿低，可能也是導(dǎo)致上述差異的重要原因。

規(guī)范和推動(dòng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)健康發(fā)展，離不開嚴(yán)格有效的行業(yè)監(jiān)管。但是監(jiān)管如果過(guò)于體制化、模式固定，也就很難將監(jiān)測(cè)做到公正、及時(shí)、有效［15,16］。如何避免實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量波動(dòng)問(wèn)題的此消彼長(zhǎng)使其得到有效的控制，是監(jiān)管部門需要解決的一個(gè)重點(diǎn)和難點(diǎn)，監(jiān)管部門需要在檢測(cè)及結(jié)果處理方式上，依據(jù)對(duì)大量檢測(cè)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)，從中挖掘有價(jià)值的信息，以實(shí)現(xiàn)更科學(xué)合理的管理安排。

3.2需要改進(jìn)監(jiān)測(cè)及結(jié)果反饋方式

相關(guān)部門可以對(duì)不合格的動(dòng)物及生產(chǎn)廠家建立跟蹤檔案，做好反饋和質(zhì)量跟蹤。同時(shí)，也要加大信息資源平臺(tái)的建設(shè)，加強(qiáng)信息發(fā)布，使法制監(jiān)管更加公開和透明。由于迄今為止的監(jiān)測(cè)結(jié)果都是在完成統(tǒng)計(jì)后，進(jìn)行分析得出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)狀況，而不是實(shí)時(shí)的反應(yīng)監(jiān)測(cè)結(jié)果，因此作者呼吁進(jìn)一步整合資源，研究對(duì)監(jiān)測(cè)結(jié)果的實(shí)時(shí)統(tǒng)計(jì)和處理的可能性，達(dá)到以最快最準(zhǔn)確的方式去反映實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量監(jiān)測(cè)。

3.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)單位需要強(qiáng)化管理意識(shí)和水平

在委托檢測(cè)中，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用單位和生產(chǎn)單位的動(dòng)物總體感染情況進(jìn)行比較，結(jié)果表明生產(chǎn)單位和使用單位的陽(yáng)性率都較高，說(shuō)明無(wú)論是生產(chǎn)單位還是使用單位對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量控制都有待引起足夠的重視。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)依然是確保質(zhì)量的可靠手段，對(duì)保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行業(yè)和生命科學(xué)及生物醫(yī)藥衛(wèi)生事業(yè)的健康發(fā)展至關(guān)重要。但因?yàn)閷?shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量受多方面因素的影響，不可能僅僅依靠法定監(jiān)管監(jiān)測(cè)提高實(shí)現(xiàn)動(dòng)物質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量監(jiān)測(cè)也必須進(jìn)行改善和加強(qiáng)［17］，以適應(yīng)不斷變化的新情況。各單位均需提高自己對(duì)質(zhì)量監(jiān)測(cè)必要性的認(rèn)識(shí)，為提升上海地區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量貢獻(xiàn)力量。

（致謝： 本文涉及大量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)數(shù)據(jù)，感謝接收樣品、檔案工作、采樣和對(duì)外服務(wù)的所有同事。）

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Analysis on Pathogen Infection of Mice and Rats in Shanghai from 2010 to 2013

FENG Li-ping, TAO Ling-yun, FENG Jie, XIE Jian-yun, LIN Jin-xing, WANG Sheng-chang, ZHOU Jie, WEI Xiao-feng, GAO Cheng, XING Zheng-hong
（Shanghai Laboratory Animal Research Center， Shanghai 201203， China）

ObjectiveTo investigate the pathogen infection status of laboratory mice and rats in Shanghai. MethodsThe quality monitoring for viruses, bacteria and parasites in SPF or clean rats and mice was conducted according to national standards, in which the method, equipment and reagents were referring to the requirements of national standards. ResultsFrom 2010 to 2013 in Shanghai, the mainly identified pathogens infecting the mice and rats included the Staphylococcus aureus， Pseudomonas aeruginosa, Mycoplasma and Tyzzer's organism. And the mainly identified viruses infecting the mice and rats were mouse hepatitis virus and Sendai virus etc. Meanwhile, the mainly identified parasites were all Helminths, Flagellates and Ectoparasites. During this period, the detection rate of Staphylococcus aureus presented the downtrend in mice, but the detection rate of Tyzzer's organism and Mycoplasma showed uptrend. In addition, the detection rate of Tyzzer's organism, Sendai virus and all Helminths in rats increased year by year during this period. ConclusionIn Shanghai region the quality of laboratory mice and rats needs to be improved. And the regulatory authorities in laboratory animal should strengthen the administration and quality monitoring of the rats and mice in the Shanghai.

Laboratory animal； Pathogen detection； Infection rate

Q95-33

A

1674-5817（2015）05-0398-05

10.3969/j.issn.1674-5817.2015.05.011

2015-04-13

面向?qū)嶒?yàn)動(dòng)物研究領(lǐng)域的大數(shù)據(jù)共享服務(wù)子平臺(tái)應(yīng)用及示范（13DZ1512104）； 上海市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源共享服務(wù)平臺(tái)（13DZ2291200）； 國(guó)家科技支撐計(jì)劃子課題：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量保證條件關(guān)鍵技術(shù)研究（2011BA115B03）

馮麗萍（1985-）, 女, 碩士。E-mail： flp2013@foxmail.com

邢正弘（1957-）, 男, 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理。E-mail： zhxing57@163.com