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    美白保濕滋養(yǎng)凝膠的制備及初步效果考察

    2015-09-01 07:07:34孫淑萍張小平陳曉麗錢張超張毓婷
    關(guān)鍵詞:卡波姆黑色素美白

    孫淑萍,金 鋼,張小平,陳曉麗,錢張超,張毓婷

    (1.皖南醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院,安徽 蕪湖 241002;2.安徽師范大學(xué) 生命科學(xué)院,安徽 蕪湖 241000;3.修正藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司,吉林 通化 134002)

    當(dāng)今社會(huì),各種污染嚴(yán)重,生態(tài)環(huán)境的破壞對(duì)人的肌膚造成很大影響,主要包括肌膚變黃、老化、膚色變暗、沒有光澤等,甚至部分人還出現(xiàn)嚴(yán)重的色斑.雖然某些化學(xué)物質(zhì)對(duì)祛除色斑有一定療效,但長期使用會(huì)帶來很大的副作用,甚至中毒,同時(shí),這些化學(xué)物質(zhì)往往價(jià)格昂貴,難以達(dá)到既美化肌膚又維護(hù)健康的目的.現(xiàn)今,國內(nèi)外研發(fā)化妝品的最主要趨勢(shì)之一是天然植物類化妝品,這類化妝品添加劑少,毒性小,對(duì)皮膚一般無刺激性,因而博得大眾的喜愛,所以用天然植物提取物開發(fā)新的化妝品必將是很有前途的一條新思路.目前,蘆薈是天然植物化妝品常用的原料,其他天然植物化妝品的報(bào)道還比較少,因而本研究以白芨、檸檬、蘆薈、百合、黃瓜等提取物為原料整合了藥物制劑的新劑型凝膠劑與天然植物提取物開發(fā)了一種新的美白保濕滋養(yǎng)凝膠劑.

    1 儀器與材料

    1.1 儀器

    加工機(jī)(上海賽康電器有限公司);數(shù)顯恒溫水浴鍋(上海賽康電器有限公司);電子天平(上海精密儀器儀表有限公司);PHS-3C數(shù)字式酸度計(jì)(江蘇金壇市環(huán)宇科學(xué)儀器廠);冰箱(青島海爾股份有限公司)等.

    1.2 材料

    白芨(亳州市藥材市場(chǎng));蜂蜜(安徽省蚌埠市珠花蜂業(yè)有限公司);聚乙烯醇(PVA17-88)、羥丙甲基纖維素(HPMC)、HY-I卡波姆941、95%乙醇、甘油、淀粉、羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)、三乙醇胺、橄欖油(上海山浦化工有限公司);檸檬提取物、蘆薈榨取物、百合提取物、薏苡仁提取物(信諾久恒科貿(mào)有限公司)等.

    2 制備過程

    2.1 白芨提取物的制備

    稱取100g白芨,浸泡0.5h,加熱煎煮共提取3次,第1次加800mL水,提取1h,第2次加600mL水,提取1h,第3次加500mL水,提取0.5h,每次都用3層紗布濾過,然后合并濾液,加熱濃縮至500mL,再用雙層紗布濾過.

    2.2 黃瓜提取物的制備

    削除黃瓜外皮后切塊,再用榨汁機(jī)榨汁,選取4層紗布過濾,濾液置冰箱中保存?zhèn)溆?

    2.3 凝膠基質(zhì)種類的選擇

    凝膠基質(zhì)從卡波姆、羥丙甲基纖維素、聚乙烯醇、羧甲基纖維素鈉、淀粉等高分子材料中進(jìn)行優(yōu)選.分別稱取以上高分子材料1g,然后均加入80mL蒸餾水,攪拌,自然溶脹過夜,其中卡波姆中加適量三乙醇胺調(diào)節(jié)pH值[1],通過考察外觀、細(xì)膩性、涂展性、透明性等指標(biāo),進(jìn)行不同水溶性凝膠基質(zhì)比較.結(jié)果表明,卡波姆所制得的凝膠基質(zhì)的外觀、細(xì)膩性、涂展性、透明性等指標(biāo)均優(yōu)于其他類型基質(zhì).

    2.4 卡波姆用量的選擇

    通過對(duì)制得的凝膠的外觀形態(tài)、粘性及志愿者和實(shí)驗(yàn)操作者使用化妝品的感覺來優(yōu)選卡波姆的濃度,結(jié)果見表1.

    表1 卡波姆用量的選擇

    結(jié)果顯示,當(dāng)卡波姆濃度為0.31%時(shí),基質(zhì)細(xì)膩均勻,稠度適中,粘性較小,吸收較好.

    2.5 卡波姆溶脹條件的選擇

    ①稱取0.5g卡波姆,加6g甘油,攪拌,加80mL蒸餾水,再攪拌,然后自然溶脹過夜;②稱取0.5g卡波姆,加80mL蒸餾水,攪拌后自然溶脹過夜;③稱取0.5g卡波姆,加80mL蒸餾水,攪拌,于水浴上加熱溶脹;④稱取0.5g卡波姆,加6g甘油,攪拌使?jié)櫇瘢?0mL蒸餾水,攪拌,于水浴上加熱溶脹.以溶脹后有無塊狀物為指標(biāo)來優(yōu)選卡波姆溶脹條件,結(jié)果發(fā)現(xiàn),當(dāng)卡波姆溶脹時(shí),加入甘油的潤濕性最好,自然溶脹過夜與水浴上加熱溶脹效果皆可,但水浴上加熱溶脹節(jié)省時(shí)間.同時(shí)比較了在加甘油的條件下,攪拌與不攪拌兩種情況,最后發(fā)現(xiàn)以攪拌為好.

    2.6 pH調(diào)節(jié)劑種類的考察

    根據(jù)制得的凝膠的外觀形態(tài)和粘性選擇合適的pH調(diào)節(jié)劑,結(jié)果見表2.

    表2 pH調(diào)節(jié)劑種類對(duì)凝膠的影響

    由上表知,用三乙醇胺作為該凝膠基質(zhì)的pH調(diào)節(jié)劑比較理想.

    2.7 蒸餾水加入順序的選擇

    ①先加入80mL蒸餾水,然后再加入42mL蒸餾水;②122mL蒸餾水一塊加.結(jié)果發(fā)現(xiàn),當(dāng)122mL蒸餾水一起加入時(shí),調(diào)節(jié)基質(zhì)的稠度和粘度,需要的三乙醇胺的量比較大,而且稠度和粘度不易調(diào)節(jié),所以選擇先加80mL蒸餾水,后加42mL蒸餾水的加入方式.

    2.8 藥液加入順序的優(yōu)選

    ①稱取0.5g卡波姆,加入6g甘油,攪拌使?jié)櫇?,然后?0mL蒸餾水,攪拌后自然溶脹過夜,加入藥物和防腐劑等,補(bǔ)足處方中剩余量的蒸餾水;②將藥物加到處方量蒸餾水中,然后加入卡波姆,溶脹過夜.結(jié)果表明,若在制備好的藥液中加入卡波姆,然后靜置溶脹,所形成的凝膠不均勻,必須先將卡波姆溶脹,形成凝膠后再將藥液加入到凝膠基質(zhì)中.

    2.9 處方中其他添加物加入量的調(diào)節(jié)

    以志愿者和實(shí)驗(yàn)操作者使用化妝品的感覺、化妝品的外觀、穩(wěn)定性為指標(biāo),適當(dāng)調(diào)節(jié)處方中甘油、橄欖油、山梨醇、白芨提取物的用量,確保最后制成的美白保濕滋養(yǎng)凝膠透明晶瑩,粘稠度適宜,涂于皮膚感覺好、吸收快.

    2.10 通過實(shí)驗(yàn)優(yōu)選的最佳制備工藝如下:

    稱取0.5g卡波姆,加6g甘油,攪拌使?jié)櫇?,?0mL蒸餾水,攪拌后自然溶脹過夜或于50℃水浴上加熱溶脹.待完全溶脹后加蜂蜜2g、白芨提取物2g、黃瓜提取物2g、檸檬提取物1g、蘆薈榨取物2g、百合提取物2g、薏苡仁提取物2g、橄欖油4g、吐溫80 0.7g,同一個(gè)方向攪拌,直至橄欖油在水中均勻分散,加三乙醇胺0.0918g,再攪拌,依次加入70%山梨醇溶液2.5mL和42mL蒸餾水,同一方向攪拌混合均勻.將0.32g對(duì)羥基苯甲酸乙酯溶解于95%乙醇,加于基質(zhì)中,同一個(gè)方向長時(shí)間攪拌,直至形成晶瑩透明、細(xì)膩均勻的凝膠.

    2.11 凝膠劑處方

    通過實(shí)驗(yàn)確定的美白保濕滋養(yǎng)凝膠含有以下重量份:卡波姆0.5g、三乙醇胺0.0918g、甘油6g、橄欖油4g、70%山梨醇溶液2.5mL、蜂蜜2g、白芨提取物2g、黃瓜提取物2g、檸檬提取物1g、蘆薈榨取物2g、百合提取物2g、薏苡仁提取物2g、對(duì)羥基苯甲酸乙酯0.32g、95%乙醇適量、蒸餾水122mL.

    3 性能表征

    3.1 性狀

    本品為淡黃色凝膠劑,具有粘稠度適宜、光潔透明、細(xì)膩均勻、涂展性良好等特點(diǎn).

    3.2 pH值檢查

    取本品1g,加40mL蒸餾水,稀釋后測(cè)得pH值為6.8.

    3.3 冷熱試驗(yàn)

    將凝膠劑封裝于透明化妝品瓶中,于4℃的冰箱中冷藏一個(gè)月,無分層現(xiàn)象.于55℃的恒溫箱內(nèi)放置24小時(shí),凝膠無分層、乳化、變味等現(xiàn)象[2-3].

    3.4 強(qiáng)光照射試驗(yàn)

    取供試品開口放在裝有日光燈的光櫥內(nèi),于照度為4500Lx的條件下放置10天,第5天和第10天取樣檢測(cè),發(fā)現(xiàn)凝膠的透明度、酸堿度、稠度均無變化.

    3.5 離心試驗(yàn)

    將凝膠封裝于試管中,3000轉(zhuǎn)/分鐘,離心20分鐘,無分層現(xiàn)象.

    3.6 留樣觀察

    將樣品裝入包裝盒內(nèi)加蓋密閉,于室溫下放置1個(gè)月,按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè),結(jié)果無明顯變化.

    3.7 刺激性試驗(yàn)

    取適量該凝膠涂于志愿者(6~60歲,85人)手背部,30分鐘后觀察無發(fā)紅、斑疹、瘙癢、起泡現(xiàn)象[4].

    3.8 自由基清除作用實(shí)驗(yàn)[5]

    分別稱取美白保濕滋養(yǎng)凝膠、市售美白凝膠各1g,加40mL蒸餾水稀釋備用.分別取稀釋液2mL及濃度為100 μmol/L二苯基苦基苯肼(DPPH)溶液2mL,先后加入同一具塞試管中搖勻,在室溫下靜置30分鐘,于517nm波長下測(cè)定樣品的吸光度.抑制率:K%=[1-(Ai-Aj)/Ac]×100%,Ai為DPPH溶液和稀釋液的吸光度,Aj為稀釋液和溶劑的吸光度,Ac為DPPH溶液和溶劑的吸光度.

    3.9 抗紫外線性能測(cè)定[5]

    分別稱取美白保濕滋養(yǎng)凝膠、市售美白凝膠各1g,加40mL蒸餾水,稀釋備用.在280~400nm波長范圍內(nèi),每隔10nm進(jìn)行一次掃描,確定各波長下凝膠稀釋液的透光率,從而計(jì)算出波長范圍內(nèi)的平均吸收率.

    3.10 抑制小鼠黑色素細(xì)胞中酪氨酸酶活力實(shí)驗(yàn)[5]

    分別稱取美白保濕滋養(yǎng)凝膠、市售美白凝膠各1g,加40mL蒸餾水稀釋備用.將B16黑色素細(xì)胞接種于96孔板中,每孔100μL,置培養(yǎng)箱培育24小時(shí)后,添加凝膠稀釋液,3天后棄去上清液,用PBS沖洗兩遍,然后每孔加90μL含體積分?jǐn)?shù)為1%的TritonX-100的PBS,在冰浴中超聲破碎,每孔再加10μL 10mmol/L左旋多巴,在37℃下孵育60分鐘,于475nm處比色,空白孔處調(diào)零,測(cè)各孔吸光度值.抑制率K%= (1-藥物組平均吸光度值÷對(duì)照組平均吸光度值)×100%.

    3.11 抑制小鼠黑色素細(xì)胞黑色素合成實(shí)驗(yàn)[5]

    分別稱取美白保濕滋養(yǎng)凝膠、市售美白凝膠各1g,加40mL蒸餾水稀釋備用.將來自小鼠的B16黑色素細(xì)胞以1×105個(gè)/mL的密度接種于培養(yǎng)皿中,在37℃、含5%CO2的條件下培養(yǎng)2天.棄去上清液,添加凝膠稀釋液,3天后棄上清液,用PBS洗滌,每孔加入0.5mL胰酶,消化細(xì)胞3分鐘,再在每孔加入2mL維持液終止消化.吹打混勻后,取出0.5mL做細(xì)胞計(jì)數(shù).其余細(xì)胞懸液在2500轉(zhuǎn)/分鐘條件下離心5分鐘,棄去上清液,于沉淀中加入NaOH溶液,加熱使黑色素溶解,在490nm波長下,利用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)吸光度.黑色素合成抑制率K%=[1-(藥物孔吸光度值÷藥物孔細(xì)胞密度)÷(對(duì)照孔吸光度值÷對(duì)照孔細(xì)胞密度)]×100%.3.8-3.11實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3:

    表3 美白保濕滋養(yǎng)凝膠劑和市售美白凝膠劑的抑制率對(duì)比結(jié)果

    注:P>0.05 表示差異性不顯著;0.01

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,本凝膠有清除自由基、對(duì)抗紫外線、抑制酪氨酸酶的活力,同時(shí)可以抑制黑色素的合成,說明該凝膠有美白作用,通過和市售美白凝膠相比,美白效果有顯著性差異.

    4 效果考察

    4.1 初步效果考察

    為了進(jìn)一步證實(shí)該凝膠的美白效果,本研究也進(jìn)行了實(shí)際試用實(shí)驗(yàn).選取100名皮膚顏色較深的25-45歲女性,分成兩組.每天早晚清洗后在胳膊上涂抹適量的凝膠劑.樣品組涂抹該凝膠劑,對(duì)照組涂抹市售美白凝膠劑,連續(xù)涂抹兩個(gè)月.用肉眼觀察胳膊上的改善來評(píng)價(jià)美白效果.用卡方檢驗(yàn)知,χ2=26.839,P<0.05, 說明兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.結(jié)果見表4:

    表4 初步效果考察結(jié)果

    4.2 綜合效果考察

    以下利用試用感覺來評(píng)價(jià)該凝膠劑的功效.采用民意調(diào)查評(píng)分法,選取180名25~45歲年齡段的女性作為試用對(duì)象,隨機(jī)分成兩組,分別涂抹美白保濕滋養(yǎng)凝膠劑和市售美白凝膠劑.各項(xiàng)使用效果總分為5分:5分為最高分,表示很好,非常滿意;4分為較好;3分為可以接受;3分以下為不好不能接受.以下為各項(xiàng)平均得分,各性能的比較采用T檢驗(yàn).結(jié)果見表5:

    從表5可知,美白保濕滋養(yǎng)凝膠劑和市售美白凝膠劑相比,除了吸收性的特點(diǎn),保濕性、滋養(yǎng)性、美白性均有顯著提高.

    5 結(jié)論

    綜上所述,新的美白保濕滋養(yǎng)凝膠劑制備工藝簡(jiǎn)單,穩(wěn)定性好,有很好的美白性、保濕性、滋養(yǎng)性,就使用效果而言,優(yōu)于市售美白凝膠劑,值得進(jìn)一步推廣應(yīng)用.

    表5 綜合效果考察結(jié)果

    P>0.05 表示差異性不顯著;0.01

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