川牛膝、杜仲種子萌發(fā)特性研究

吳清華，裴瑾，劉薇，劉維，陳翠平

川牛膝、杜仲種子萌發(fā)特性研究

吳清華，裴瑾，劉薇，劉維，陳翠平

目的：研究川牛膝、杜仲種子的最佳發(fā)芽條件，為生產(chǎn)中川牛膝、杜仲種子的檢驗(yàn)及播種提供理論依據(jù)。方法：在不同溫度、不同試劑處理?xiàng)l件下，對(duì)川牛膝、杜仲種子進(jìn)行發(fā)芽率實(shí)驗(yàn)及生活力測(cè)定實(shí)驗(yàn)，記錄川牛膝、杜仲種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)及生活力。結(jié)果：川牛膝種子的最佳萌發(fā)條件為：溫度在25℃，7.5mg/L吲哚乙酸處理的發(fā)芽率最高；杜仲種子的最佳萌發(fā)條件為：溫度在20℃，400mg/L赤霉素處理的發(fā)芽率最高。結(jié)論：通過(guò)本實(shí)驗(yàn)研究川牛膝、杜仲種子不同溫度、試劑處理與發(fā)芽率、生活力之間的關(guān)系，探索川牛膝、杜仲種子的最佳萌發(fā)條件，為后續(xù)保存川牛膝、杜仲優(yōu)良種質(zhì)提供理論依據(jù)。

川牛膝；杜仲；種子；發(fā)芽率

川牛膝為莧科杯莧屬多年生草本植物川牛膝Cyathula offi cinalis Kuan的干燥根［1］?！按ㄅＯァ敝?，本草書籍中最早見(jiàn)于明初的《滇南本草》，該書謂“白牛膝強(qiáng)筋之功甚于川牛膝”，分布于四川樂(lè)山、雅安、涼山，重慶奉節(jié)、巫山、巫溪，湖北恩施，湖南邵陽(yáng)、龍山，云南玉溪、楚雄，貴州等地，為川產(chǎn)道地藥材。具有逐瘀通經(jīng)，通利關(guān)節(jié)，利尿通淋的功效，臨床用于治療經(jīng)閉癥瘕，跌打損傷，風(fēng)濕痹痛，尿血血淋等病癥［1］。杜仲（Eucommia ulmoidse Oliv.）為杜仲科杜仲屬植物，主產(chǎn)于四川廣元、青川、綿陽(yáng)，貴州遵義、正安，陜西鎮(zhèn)坪、安康等地。具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、安胎的功效，臨床用于肝腎不足，腰膝酸痛，下肢痿軟，陽(yáng)痿尿頻等病癥。

現(xiàn)今市場(chǎng)上流通的川牛膝、杜仲基本為人工種植，種植過(guò)程中采用種子繁殖，在生產(chǎn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)川牛膝、杜仲種子質(zhì)量差異很大，常出現(xiàn)發(fā)芽率低，幼苗弱等問(wèn)題［2］。本文研究了川牛膝、杜仲種子不同溫度、試劑處理對(duì)種子發(fā)芽率的影響，旨在探明川牛膝、杜仲種子的最適萌發(fā)條件，以期為后續(xù)保存優(yōu)良種質(zhì)提供理論依據(jù)，為川牛膝、杜仲藥材的生產(chǎn)提供優(yōu)良種子。

1　材料與方法

1.1材料

川牛膝種子、杜仲種子、培養(yǎng)皿、濾紙、恒溫培養(yǎng)箱、光照培養(yǎng)箱、赤霉素、吲哚乙酸等。

1.2方法

1.2.1川牛膝、杜仲種子萌發(fā)前處理 采用溫水浸種催芽法。先用40℃溫水將種子清洗干凈，再在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)控制溫度35～45℃浸種24h，期間換水1次。待種子充分吸脹后，除去干癟種子，剩余清洗干凈后備用。

1.2.2川牛膝、杜仲種子萌發(fā)特性的研究方法 用正交試驗(yàn)法選取最適宜川牛膝種子、杜仲種子的萌發(fā)條件，光照條件包括光照、黑暗和6h曝光/d三個(gè)水平，水分包括60%、80%、100%三個(gè)水平，溫度包括15℃、20℃、25℃三個(gè)水平。每個(gè)處理3次重復(fù)，每組50粒種子。發(fā)芽試驗(yàn)以培養(yǎng)皿為容器，皿底鋪3層濾紙作為發(fā)芽床，每天加水以保持濾紙濕潤(rùn)。

1.2.3不同試劑處理 將經(jīng)過(guò)前處理的川牛膝種子、杜仲種子分為10個(gè)組，每組3次重復(fù)，每次50粒種子。川牛膝種子進(jìn)行下列處理：①100mg/L、200mg/ L、400mg/L的赤霉素；②2.5mg/L、5mg/L、7.5mg/L的吲哚乙酸；③50mg/L、100mg/L、150mg/L的萘乙酸；以清水處理作為對(duì)照組［3～5］。

杜仲種子進(jìn)行下列處理：①NaOH處理：40%的NaOH分別處理5min、10min、15min，取出，清水洗凈后晾干；②H2SO4處理：98%H2SO4分別處理5min、10min、15min，取出，清水洗凈后晾干；③赤霉素處理：200mg/L、400mg/L、600mg/L赤霉素處理10min，取出，清水洗凈后晾干［6］。

1.2.4采用TTC法測(cè)定種子的生活力 重復(fù)3次，每次各50粒種子。

2　結(jié)果與分析

2.1不同處理方法川牛膝種子的萌發(fā)情況的影響

2.1.1三因素對(duì)川牛膝種子、杜仲種子萌發(fā)情況的影響程度均為水分＞溫度＞光照，得到的最適宜川牛膝種子的萌發(fā)條件為：水分80%，溫度25℃，光照培養(yǎng)；杜仲種子的最適萌發(fā)條件為：水分80%，溫度20℃，光照培養(yǎng)。

2.1.2不同處理方法對(duì)川牛膝種子發(fā)芽率的影響

表1　不同處理對(duì)川牛膝種子萌發(fā)率的影響

注：**表示與對(duì)照組差異顯著

與空白組對(duì)比，各種IAA處理均對(duì)川牛膝種子的發(fā)芽率達(dá)到極顯著差異（P＜0.01），其中以7.5mg/L IAA處理的發(fā)芽率最高，可作為川牛膝種子萌發(fā)的生長(zhǎng)素使用。不同濃度的赤霉素、不同濃度的萘乙酸對(duì)川牛膝種子的發(fā)芽勢(shì)無(wú)顯著性差異（P＞0.01）。

2.1.3不同處理方法對(duì)杜仲種子發(fā)芽率的影響

表2　不同處理對(duì)杜仲種子萌發(fā)率的影響

與空白組對(duì)比，中、高濃度GA3處理均對(duì)杜仲種子的發(fā)芽率達(dá)到極顯著差異（P＜0.01），其中以400mg/L GA3處理10min杜仲種子的發(fā)芽率最高，可作為杜仲種子萌發(fā)的生長(zhǎng)素使用。40%NaOH、98%H2SO4不同時(shí)間處理對(duì)杜仲種子的發(fā)芽勢(shì)無(wú)顯著性差異（P＞0.01）。

3　討論

3.1篩選出了川牛膝種子萌發(fā)的最適條件

對(duì)川牛膝種子萌發(fā)溫度、水分及光照條件的正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，得到的最適宜川牛膝種子的萌發(fā)條件為：水分80%，溫度25℃，光照培養(yǎng)。研究結(jié)果表明，各種不同試劑不同濃度處理的川牛膝種子萌發(fā)實(shí)驗(yàn)中，以7.5 mg/L IAA處理得到的發(fā)芽率最高，可顯著性提高川牛膝種子的發(fā)芽率，可為后續(xù)引種栽培川牛膝生長(zhǎng)素的使用提供理論依據(jù)。

3.2篩選出了杜仲種子萌發(fā)的最適條件

對(duì)杜仲種子萌發(fā)溫度、水分及光照條件的正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，得到的最適宜杜仲種子的萌發(fā)條件為：水分80%，溫度20℃，光照培養(yǎng)。研究結(jié)果表明，各種不同試劑不同時(shí)間處理的杜仲種子萌發(fā)實(shí)驗(yàn)中，以400 mg/L GA3處理得到的發(fā)芽率最高，可顯著性提高杜仲種子的發(fā)芽率，可為后續(xù)引種栽培杜仲生長(zhǎng)素的使用提供理論依據(jù)。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2010年版一部［S］.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:35.

［2］范巧佳，方志然，孫磊，等.川牛膝種子發(fā)芽特性的研究［J］.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，31（3）:254.

［3］柯文山，鐘章成，席紅安，等.四川大頭茶地理種群種子大小變異及對(duì)萌發(fā)、幼苗特征的影響［J］.生態(tài)學(xué)報(bào)，2000（4）:697.

［4］林俊英.不同處理方法對(duì)秦艽種子發(fā)芽率的影響［J］.甘肅中醫(yī)學(xué)報(bào)，2005，22（2）:19.

［5］吳學(xué)明，劉玉萍.青海省紅直獐牙菜種子萌發(fā)特性的研究［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006（4）:120.

［6］余啟高，姚茂桂.杜仲種子發(fā)芽條件的研究［J］.農(nóng)技服務(wù)，2010，27（11）:1455.

（責(zé)任編輯：胡慧玲）

Studies on Chuanniuxi and Duzhong seeds germination characteristics

WU Qing-hua, PEI Jin, LIU Wei, LIU Wei, CHEN Cui-Ping
(School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137,Sichuan)

Objective: To study the optimum conditions of Chuanniuxi and Duzhong seeds germination to provide a theoretical basis for the inspection and sowing seed. Method: At different temperatures and different reagent conditions，Chuanniuxi and Duzhong seeds germination rate and viability determination experiments were carried out. Chuanniuxi and Duzhong seeds germination potential and viability were recorded. Result: The best seed germination conditions for Chuanniuxi seed were as following: temperature at 25 ℃，7.5mg/L indole acetic acid treated. The best germination conditions for Duzhong seed was as following: temperature at 20 ℃，400mg/L gibberellin treated. Conclusion: The optimum conditions of Chuanniuxi and Duzhong seeds germination were investigated by studying the relationship of different temperatures，reagent processing and germination rate，viability of Chuanniuxi，Duzhong seed. The results can provide a theoretical basis for subsequent storage of Chuanniuxi and Duzhong high quality germplasm.

Chuanniuxi； Duzhong； seed； germination rate

R 282.2

A

1674-926X（2015）06-002-03

成都中醫(yī)藥大學(xué)?；穑▃rms201338），中藥資源四川省青年科技創(chuàng)新研究團(tuán)隊(duì)（2015TD0028）

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 四川省中藥資源系統(tǒng)研究與開(kāi)發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川 成都 611137

吳清華（1986-），女，講師，從事中藥品種、品質(zhì)與質(zhì)量評(píng)價(jià)研究

2015-04-25