青葉綠蘿組培快繁體系的研究

馬艷麗 馮豹

摘 要 以青葉綠蘿頂芽、莖段為材料，通過優(yōu)化影響不定芽形成的因素。試驗(yàn)表明，MS+BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L培養(yǎng)基對不定芽的誘導(dǎo)最好，形成的愈傷較少；在1/2MS+ 0.5%活性炭+IBA0.1 mg/L生根培養(yǎng)基上生根最快，根數(shù)最多?；诖?，為實(shí)現(xiàn)綠蘿組培苗工廠化生產(chǎn)提供技術(shù)支撐。

關(guān)鍵詞 綠蘿；頂芽；莖段；組培快繁

中圖分類號：S682.36 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B 文章編號：1673-890X（2015）21--02

綠蘿（Epipremnumaureum），屬于天南星科大型常綠藤本植物，生長于熱帶地區(qū)，常攀援生長在雨林的巖石和樹干上，其纏繞性強(qiáng)，氣根發(fā)達(dá)，可以水培種植。近幾年，隨著大氣污染嚴(yán)重，青葉綠蘿成為凈化空氣的首選花卉。同時，價格也被大眾所接受，深受市場歡迎。綠蘿多采用扦插繁殖；但是扦插繁殖常受母本及扦插環(huán)境限制，阿拉爾地處塔克拉瑪干沙漠南緣，氣候干燥，更不適合扦插繁殖。因此，采用植物組織培養(yǎng)方法可以解決這一難題，以青葉綠蘿頂芽、莖段為外植體，建立青葉綠蘿植物組培養(yǎng)繁體系，提高不定芽增殖量，縮短繁殖時間，提高經(jīng)濟(jì)效益。

1 材料與方法

1.1 外植體的建立

溫室內(nèi)剪取10～15 cm長青葉綠蘿莖段，去葉片并切成帶一個葉片的莖段。用紗布蘸自來水擦洗表面，再在自來水下沖洗20 min，然后在超凈臺內(nèi)用75%酒精消毒8 s。將酒精倒掉，用無菌水沖洗4遍。無菌水倒掉后加入1%的次氯酸鈉溶液，使材料被淹沒，放在超聲振蕩器中分別處理8、12、16 min。最后用無菌水沖洗4遍，切成0.5～1.0 cm的莖段，接種到初代培養(yǎng)基上。培養(yǎng)間溫度設(shè)置在25 ℃，每天光照16 h。

1.2 不定芽的誘導(dǎo)

將由第一步誘導(dǎo)出的頂芽或腋芽轉(zhuǎn)至添加了不同激素濃度的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基中激素種類及濃度分別是：BA1.0 mg/L+NAA0.05、BA1.0 mg/L+NAA0.1、BA1.0 mg/L+NAA0.5。所配的培養(yǎng)基均以MS為基礎(chǔ)，添加蔗糖30 g/L，瓊脂7 g/L，pH5.8，121℃高壓滅菌20 min。轉(zhuǎn)接后分別置于黑暗（報紙遮光）和正常光照兩種不同的光照條件下培養(yǎng)30 d。

1.3 生根培養(yǎng)

當(dāng)綠蘿試管苗高度達(dá)到2～4 cm時，轉(zhuǎn)至生根培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)生根。生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.5%活性炭的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，分別添加0.0、0.1、0.5 mg/LIBA。培養(yǎng)條件為先暗培養(yǎng)10 d，后轉(zhuǎn)至正常光照條件，當(dāng)根數(shù)量達(dá)到2根以上、長達(dá)3～4 cm時移至溫室煉苗。

1.4 馴化、移栽

溫室馴化7 d，用鑷子取出苗子，將根上培養(yǎng)基洗干凈，800倍多菌靈溶液浸泡5 min，種在基質(zhì)上，基質(zhì)成分及比例為草炭：珍珠巖：蛭石比例2∶1∶1，溫度為溫室一般溫度即可，第1周每天上下午各噴水2次，目的事故保證足夠的水分和濕度。同時，避免直射光照射。

2 結(jié)果分析

2.1 外植體消毒

消毒12 min效果最好，95%無感染；8 min，細(xì)菌和真菌感染率較高；16 min對腋芽傷害較大，成活率較低。

2.2 不同濃度激素對青葉綠蘿不定芽誘導(dǎo)的結(jié)果

從表1中可以看出，在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加1.0 mg/LBA和0.03mg/L的NAA所形成的不定芽效果較好，數(shù)量適中、需要的時間短，并且形成的愈傷較少。添加0.01 mg/L的NAA，雖形成不定芽的數(shù)量多，但愈傷較多，不定芽較小，不利于試管苗的生根。NAA過高，則更不利于不定芽的形成，形成時間也有多延長。

2.3 光照對青葉綠蘿不定芽形成的影響

實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，將培養(yǎng)間的燈管關(guān)閉，組培苗進(jìn)行7～10 d的暗培養(yǎng)，之后進(jìn)行正常光照條件培養(yǎng)，同最初在正常光照條件下培養(yǎng)的組培苗所形成的不定芽沒有較大的差異。因此，為了降低成本，可將新繼代增殖的組培苗先暗培養(yǎng)7 d。 （下轉(zhuǎn)第頁）

（上接第頁）

2.4 生根培養(yǎng)基篩選

通過試驗(yàn)得知，如表2所示，組培苗在1/2MS+IBA0.1 mg/L+0.5%活性炭生根培養(yǎng)基中5 d已有根形成，且根多而壯，效果最好。IBA濃度為0.5 mg/L時形成平均根數(shù)也較多，但是生根率及形成根時間較低、較長。

2.5 移栽成活率

經(jīng)馴化后種植在篩選出適合的基質(zhì)，草炭∶珍珠巖∶蛭石=2∶1∶1上，青葉綠蘿成活率達(dá)到97%以上。

3 結(jié)語

在不定芽誘導(dǎo)這個時期，若短時間內(nèi)獲得大量且質(zhì)量較好的不定芽，可選組合為BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L。當(dāng)NAA濃度降低至0.05 mg/L時，不定芽的數(shù)量少且不定芽較小。NAA濃度增加至0.5 mg/L時，形成不定芽的時間較長，而且可能會影響不定芽的遺傳穩(wěn)定性，對保持母本的優(yōu)良性狀產(chǎn)生影響。

通過本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，新繼代的綠蘿試管苗在無光照的暗培養(yǎng)狀態(tài)培養(yǎng)7 d，與正常光照條件下試管苗增殖情況差異并不明顯。南疆地區(qū)成本較大，本著降低成本的目的，可將培養(yǎng)間的燈管關(guān)閉，試管苗先暗培養(yǎng)7 d，然后再轉(zhuǎn)入正常光照，同樣可以達(dá)到相同的增殖效果。

雖經(jīng)過一段時間的馴化，試管苗在移栽后生長仍需要保持較高的濕度，因此濕度一般控制在70%～80%，溫度25℃左右。管理必須到位，每天上下午各噴2次水，這樣成活率可達(dá)97%。

（責(zé)任編輯：趙中正）