葉面噴鈣對(duì)桃新品系黃水蜜葉片生理指標(biāo)的影響

杜保偉　方慶　胡月華　決超

摘要：為探尋能夠顯著提高葉片生理指標(biāo)的合理鈣肥濃度，以桃新品系黃水蜜為試材，對(duì)黃水蜜的葉片噴施不同濃度和次數(shù)的氯化鈣肥，并測(cè)定其葉綠素含量、干鮮質(zhì)量比和MDA含量。結(jié)果表明，噴施氯化鈣能顯著提高葉片的葉綠素含量，能夠顯著降低葉片的MDA含量，對(duì)葉片干鮮質(zhì)量比影響不顯著。

關(guān)鍵詞：桃；氯化鈣；葉片；生理指標(biāo)

中圖分類號(hào)：S662.106 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2015）07-0148-02

桃是世界上栽培最廣泛的溫帶果樹之一。近些年來(lái)，我國(guó)桃的栽培面積和產(chǎn)量都有大幅度提高，品種越來(lái)越多，栽培方式也越來(lái)越多樣化，但與國(guó)際生產(chǎn)水平相比，我國(guó)桃生產(chǎn)還有不少的問題，如果實(shí)單位面積產(chǎn)量低、果品質(zhì)量差、果品結(jié)構(gòu)不合理等[1]。因此，科學(xué)研究也在更多地關(guān)注如何才能更好地通過(guò)改善桃葉片生理指標(biāo)來(lái)提高其品質(zhì)。

現(xiàn)代果樹營(yíng)養(yǎng)研究分析結(jié)果表明，果樹所需要的營(yíng)養(yǎng)元素有氮、磷、鉀、鈣、鐵、鎂、硼、錳、鋅、銅等10多種。而鈣是構(gòu)成細(xì)胞壁的重要組成部分，在樹體內(nèi)與有機(jī)酸結(jié)合形成不溶性草酸鈣，它能夠穩(wěn)定細(xì)胞膜，防止細(xì)胞內(nèi)含物外滲，促使果實(shí)硬度增加，果皮韌性增強(qiáng)，增強(qiáng)抗病蟲力和果實(shí)耐貯性，減少裂果、日灼，提高產(chǎn)量，改善品質(zhì)[2]。

目前已有試驗(yàn)證明，在桃果實(shí)生長(zhǎng)的關(guān)鍵時(shí)期噴施氯化鈣能改善桃葉片的生理指標(biāo)[3]，但是氯化鈣在桃新品系黃水蜜上的應(yīng)用濃度和次數(shù)國(guó)內(nèi)尚無(wú)相關(guān)報(bào)道。因此，本試驗(yàn)選擇不同濃度的氯化鈣，對(duì)黃水蜜葉片進(jìn)行不同噴肥次數(shù)的試驗(yàn)，比較不同噴肥濃度、不同噴肥次數(shù)對(duì)黃水蜜葉片生理指標(biāo)的影響，尋找最適宜的濃度和次數(shù)，為今后的生產(chǎn)實(shí)踐提供理論及技術(shù)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2013年7月下旬到8月下旬在河南農(nóng)業(yè)大學(xué)三區(qū)桃資源圃里進(jìn)行，選擇長(zhǎng)勢(shì)健壯、結(jié)果正常、具有5年樹齡的黃水蜜植株作為試驗(yàn)材料。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)共分為4個(gè)水平：空白、噴清水、噴0.3%氯化鈣、噴0.5%氯化鈣。空白設(shè)置1個(gè)處理，清水設(shè)置3個(gè)處理，其他2個(gè)水平各設(shè)置4個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)置3次重復(fù)（表1）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 清水、氯化鈣的噴施 葉面施肥最好選在無(wú)風(fēng)天，以09：00以前和16：00以后為好[4]。配制好質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3%、0.5%的氯化鈣溶液，在09：00之前進(jìn)行噴施，同時(shí)噴施清水作對(duì)照。噴施時(shí)對(duì)所選的葉片背面進(jìn)行噴施，直到葉片沾濕剛要下滴為止，并保證噴施充分、均勻。

1.3.2 樣品的采集 9月11日07：00—08：00對(duì)黃水蜜試驗(yàn)材料進(jìn)行采集：選擇生長(zhǎng)健壯的一年生枝條頂端的第5張至第7張葉作為試驗(yàn)材料，每個(gè)處理下的每個(gè)重復(fù)均采20張葉片，葉片要求生長(zhǎng)良好、大小均勻一致、無(wú)病蟲危害。每個(gè)處理所采集的葉片分別用黑塑料袋裝好并貼上標(biāo)簽指明處理具體的濃度和次數(shù)并迅速帶回實(shí)驗(yàn)室，洗凈葉片，并用干凈的吸水棉輕輕擦干。

1.3.3 各項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)定方法

1.3.3.1 葉綠素含量的測(cè)定 葉片葉綠素含量的測(cè)定采用丙酮法[5]。

計(jì)算公式：葉綠素a的含量=12.7D663 nm-2.69D645 nm；葉綠素b的含量=22.9D645 nm-4.86D663 nm；葉綠素a+b的總含量=8.02D663 nm+20.20D645 nm。

1.3.3.2 干鮮質(zhì)量比的測(cè)定 每個(gè)處理選均勻一致的6張葉，每次稱2張，作為1個(gè)重復(fù)，共3個(gè)重復(fù)，然后每個(gè)重復(fù)用打孔器打10個(gè)小圓片，并進(jìn)行稱質(zhì)量。稱質(zhì)量后，放入烘干箱中在105 ℃殺青15 min，然后80 ℃下烘干24 h至恒質(zhì)量，取出稱質(zhì)量（包括小圓片的質(zhì)量）。

1.3.3.3 MDA含量測(cè)定 MDA含量的測(cè)定采用硫代巴比妥酸法[6]，具體操作方法：（1）取桃植株上不同葉位的葉片 3～5張，洗凈擦干，剪成0.5 cm長(zhǎng)的小段，混勻。（2）稱取葉片切段0.3 g，放入冰浴的研缽中，加入少許石英砂和1 mL 0.05 mol/L 磷酸緩沖液，研磨成勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)移到試管中，再用3 mL 0.05 mol/L磷酸緩沖液分3次沖洗研缽，合并提取液。（3）在提取液中加入5 mL 0.5%硫代巴比妥酸溶液，搖勻。（4）將試管放入沸水浴中煮沸10 min，（自試管內(nèi)溶液中出現(xiàn)小氣泡開始計(jì)時(shí)）。到時(shí)間后，立即將試管取出并放入冷水浴中。（5）待試管內(nèi)溶液冷卻后，3 000 g離心15 min，取上清液并量其體積。以0.5%硫代巴比妥酸溶液為空白測(cè)532、600、450 nm處的吸光度。

2 結(jié)果與分析

2.1 噴施不同濃度、不同次數(shù)的氯化鈣對(duì)黃水蜜葉片葉綠素總含量的影響

由圖1可看出，與清水對(duì)照比較，氯化鈣處理葉綠素總含量總體上呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)。但就0.3%濃度而言，2次最高，3次其次，4次和1次較低；0.5%濃度下，3次最高，其次為2次，接著是1次，4次最低?？偟膩?lái)看，0.3%氯化鈣處理的效果最好，尤其是0.3%氯化鈣處理2次時(shí)的效果最佳。

2.2 噴施不同濃度、不同次數(shù)的氯化鈣對(duì)黃水蜜葉片干鮮質(zhì)量比的影響

由圖2可知，氯化鈣處理與清水對(duì)照差異不顯著。在03%濃度水平下，3次最高，然后為1次，接著為2次，最低為4次；在0.5%濃度水平下，3次最高，其次為1次，接著為4次，最低為2次?？偟膩?lái)看，0.5%氯化鈣處理的效果較好。

2.3 噴施不同濃度、不同次數(shù)的氯化鈣對(duì)黃水蜜葉片MDA含量的影響

從圖3來(lái)看，與清水對(duì)照比較，氯化鈣處理MDA含量明顯增加，但與空白對(duì)照相比，噴清水和氯化鈣后的葉片MDA含量都明顯下降。在0.3%濃度水平下，3次最高，然后為4次，接著為1次，最低為2次；在0.5%濃度水平下，處理3次最高，其次為4次，接著為2次，最低為1次?？偟膩?lái)看，03%氯化鈣處理的效果較好，尤其是0.3%氯化鈣處理2次的效果最佳。endprint

2.4 噴施不同濃度、不同次數(shù)的氯化鈣對(duì)黃水蜜葉片各個(gè)生理指標(biāo)的影響

從葉綠素含量來(lái)看，0.3%濃度1、4次，0.5%濃度4次處理與空白對(duì)照差異顯著；0.3%濃度2次處理與清水對(duì)照差異顯著（圖1）。從葉面積干鮮質(zhì)量比來(lái)看，各濃度處理與清水對(duì)照差異均不顯著（圖2）。從MDA含量來(lái)看，所有處理與空白對(duì)照均差異不顯著；0.5%4次處理與清水對(duì)照差異顯著，與其他處理間差異均不顯著（圖3）。

3 結(jié)論與討論

3.1 結(jié)論

3.1.1 噴施氯化鈣可以提高黃水蜜葉片的葉綠素含量 試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照相比，噴氯化鈣處理葉片葉綠素含量總體提高了。0.3%氯化鈣2次、3次處理的桃葉片葉綠素含量均超過(guò)了清水對(duì)照的平均值，尤其是0.3%2次處理葉綠素含量達(dá)到最高（3254 mg/g）。05%濃度下，隨著次數(shù)增加桃葉片葉綠素含量呈現(xiàn)逐步上升趨勢(shì)，但是在0.5%4次處理忽然降低成為所有處理的最低值（18.84 mg/g），這可能由試驗(yàn)過(guò)程中取材或操作不當(dāng)導(dǎo)致。與0.5%濃度相比，0.3%濃度的氯化鈣處理更經(jīng)濟(jì)、更適合選擇，尤其是0.3%2次效果最好。

3.1.2 噴施氯化鈣對(duì)黃水蜜葉片的干鮮質(zhì)量比沒有顯著影響 試驗(yàn)結(jié)果表明，與清水對(duì)照相比，葉面積的干鮮質(zhì)量比呈現(xiàn)上下波動(dòng)；與空白對(duì)照相比，所有處理的干鮮質(zhì)量比出現(xiàn)小幅下降。綜合來(lái)看，0.5%濃度處理的效果較好，但與0.3%濃度氯化鈣處理差異不顯著。

3.1.3 噴施氯化鈣可以降低黃水蜜葉片的MDA含量 試驗(yàn)結(jié)果表明，與空白對(duì)照相比，所有處理的MDA含量均降低，0.3%2次和0.5%1次時(shí)葉片的MDA含量下降幅度較大，03%2次時(shí)MDA含量下降的幅度最大，效果最好。

綜上所述，通過(guò)試驗(yàn)結(jié)果分析以及綜合經(jīng)濟(jì)、生產(chǎn)、人力等各因素考慮可以認(rèn)為，噴施0.3%氯化鈣2次時(shí)對(duì)桃葉片的生理指標(biāo)具有改善作用。

3.2 討論

葉片是植物進(jìn)行光合作用的主要器官，其生長(zhǎng)狀況直接影響著光合作用的效率和光合產(chǎn)物的積累，進(jìn)而影響產(chǎn)量。

葉綠素在植株光合作用中起吸收光能的作用，其含量的多少直接影響光合作用的強(qiáng)弱。胡遠(yuǎn)富等對(duì)大豆生長(zhǎng)發(fā)育進(jìn)行研究證明，施用氯化鈣可以提高大豆的葉綠素含量[7]。葛瑛等在對(duì)玉米的抗逆性研究中又一次證實(shí)了使用氯化鈣可以提高玉米幼苗的葉綠素含量[8]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，噴施氯化鈣可以提高黃水蜜葉片葉綠素含量，但差異不顯著，這與前人研究結(jié)果基本一致。在0.5%4次時(shí)葉綠素含量出現(xiàn)了下降，這可能是取材、操作不當(dāng)或溫度差異造成的誤差引起的。

MDA是膜脂過(guò)氧化的產(chǎn)物，其含量可以反映細(xì)胞質(zhì)過(guò)氧化的水平，進(jìn)而反映出葉片的衰老水平。鈣能防止細(xì)胞膜損傷和滲漏、穩(wěn)定膜結(jié)構(gòu)和維持膜的完整性，胞外Ca功能通過(guò)保護(hù)質(zhì)膜的穩(wěn)定性，使質(zhì)膜具有較好的離子選擇通透性，還可能對(duì)一些胞外酶或膜蛋白起調(diào)節(jié)作用。洪森榮等研究野葛塊根采后低溫貯藏發(fā)現(xiàn)，鈣處理可以降低MDA含量，提高超氧化物歧化酶（SOD）的活性，消除氧自由基，減輕膜脂過(guò)氧化[9]。吳彩娥等對(duì)棗果實(shí)采后膜脂過(guò)氧化作用的研究也表明，鈣處理能抑制棗果實(shí)過(guò)氧化物酶（POD） 和過(guò)氧化氫酶（CAT）活性的下降，降低丙二醛（MDA）積累量[10]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，0.3%氯化鈣處理可以降低黃水蜜葉片的MDA含量，這與前人研究結(jié)果是一致的。

參考文獻(xiàn)：

[1]張鳳敏，宮美英. 我國(guó)桃生產(chǎn)中存在的問題與對(duì)策[J]. 河北果樹，2006（6）：1-3.

[2]王仁才，閆瑞香，于慧瑛. 獼猴桃幼果期鈣處理對(duì)果實(shí)貯藏和品質(zhì)的影響[J]. 果樹科學(xué)，2000，17（1）：45-47.

[3]薛志成. 果樹也需補(bǔ)鈣[J]. 黑龍江林業(yè)，2003（2）：37.

[4]于長(zhǎng)年，菁 菁. 桃樹栽培技術(shù)問答[M]. 天津：天津科學(xué)技術(shù)出版社，1989：61.

[5]韓振海，陳昆松. 實(shí)驗(yàn)園藝學(xué)[M]. 北京：高等教育出版社，2006：349-351.

[6]高俊鳳. 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M]. 北京：高等教育出版社，2006：192-201.

[7]胡遠(yuǎn)富，王澤奇，施君信，等. 氯化鈣對(duì)大豆生長(zhǎng)發(fā)育及抗逆性的促進(jìn)效應(yīng)研究[J]. 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，19（3）：39-42.

[8]葛 瑛，高 鵬，夏激宇，等. 氯化鈣在提高玉米抗鹽性方面的作用[J]. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，35（3）：281-284.

[9]洪森榮，尹明華. 氯化鈣對(duì)野葛塊根采后低溫貯藏的影響[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35（10）：3049-3049，3140.

[10]吳彩娥，寇曉虹，閆師杰，等. CaCl2和6-BA處理對(duì)棗果實(shí)采后膜脂過(guò)氧化作用的影響[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2001，28（5）：457-459.endprint