莜麥秸栽培雙孢菇適宜品種及最適菌種培養(yǎng)基篩選

李守勉　李明　田景花　王勝男　馮自洋

摘要：對(duì)莜麥秸栽培雙孢菇適宜品種進(jìn)行篩選，得出AS2796為最適品種，并對(duì)AS2796的最適母種、原種培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。結(jié)果表明，AS2796適宜母種培養(yǎng)基為100 g發(fā)酵棉籽皮，50 g牛糞，20 g葡萄糖，20 g瓊脂，3 g KH2PO4，15 g MgSO4，20 mg 維生素B1，5 g蛋白胨，1 000 mL水；AS2796適宜原種培養(yǎng)基為配方A1和配方C1，配方A1：84.15%麥粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4，配方C1：16.83%谷粒、67.32%高粱粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1%KH2PO4、0.05% MgSO4。其中配方A1的菌絲生長(zhǎng)速度最快，菌絲長(zhǎng)勢(shì)較好；配方C1的菌絲長(zhǎng)勢(shì)最好，生長(zhǎng)速度中等，生產(chǎn)中可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行選擇。

關(guān)鍵詞：莜麥秸稈；雙孢菇；品種；母種；原種；培養(yǎng)基；篩選

中圖分類(lèi)號(hào)： S646.104 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2015）07-0252-02

雙孢菇（Agaricus bisporus）味道鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富，是世界第一大宗食用菌。雙孢菇屬中低溫性草腐菌，發(fā)菌溫度22～25 ℃，出菇溫度14～18 ℃[1]，一般于秋冬至早春栽培，是我國(guó)的主栽食用菌種類(lèi)之一。壩上地區(qū)夏季溫度較低，適宜進(jìn)行雙孢菇的錯(cuò)季栽培。莜麥為壩上地區(qū)的主要糧食作物[2]，利用莜麥秸稈栽培雙孢菇，不僅可使壩上資源莜麥秸稈、牛糞變廢為寶，同時(shí)又可為食用菌生產(chǎn)提供充足的原料。由于莜麥秸稈新開(kāi)發(fā)雙孢菇栽培原料的配套技術(shù)還不完善，有關(guān)莜麥秸稈栽培雙孢菇適宜品種篩選的研究未見(jiàn)報(bào)道。因此，本試驗(yàn)開(kāi)展莜麥秸稈栽培雙孢菇適宜品種篩選的研究，以促進(jìn)壩上地區(qū)雙孢菇產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，彌補(bǔ)夏季雙孢菇市場(chǎng)的空缺，提高菇農(nóng)效益。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

雙孢菇品種W2000、W192、AS2796、5113，均由河北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院食用菌實(shí)驗(yàn)室保藏。

1.2 供試培養(yǎng)基

1.2.1 供試母種培養(yǎng)基

A：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨 5 g，水1 000 mL，pH值自然；B：麥粒200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨5 g，水1 000 mL，pH值自然；C：谷粒200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨 5 g，水1 000 mL，pH值自然；D：高粱粒20 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨5 g，水1 000 mL，pH值自然；E：玉米粉40 g，葡萄糖 20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨 5 g，水1 000 mL，pH值自然；F：棉籽皮100 g，發(fā)酵牛糞50 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨5 g，水1 000 mL，pH值自然。

1.2.2 供試原種培養(yǎng)基[3-4]

CK：99%麥粒、1%石膏，另加0.1%KH2PO4、0.05% MgSO4；A1：84.15%麥粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；A2：84.15%小麥粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；B1：84.15%高粱粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加01% KH2PO4、0.05% MgSO4；B2：84.15%高粱粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；C1：1683%谷粒、67.32%高粱粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；C2：16.83%谷粒、67.32%高粱粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；D1：58.91%玉米芯、25.25%谷粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；D2：58.91%玉米芯、2525%谷粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、005% MgSO4；E1：58.91%玉米芯、25.25%麥粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；E2：58.91%玉米芯、25.25%麥粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4。

1.2.3 莜麥秸栽培雙孢菇培養(yǎng)料配方[5]

莜麥秸栽培料的適宜配方（按照100 m2計(jì)算）：莜麥秸1 500 kg，干牛糞1 125 kg，尿素15 kg，過(guò)磷酸鈣50 kg，石膏25 kg，石灰25 kg。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 莜麥秸栽培雙孢菇最適品種篩選

菌種的制備、培養(yǎng)料的堆置發(fā)酵、上料播種以及出菇期的管理等均采用常規(guī)方法。選取W2000、W192、閩4號(hào)、5113等4個(gè)雙孢菇品種進(jìn)行品比試驗(yàn)，每個(gè)品種設(shè)3個(gè)重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列。每個(gè)小區(qū)10 m2，共12個(gè)小區(qū)，分別位于床架的2～4層（自下而上）。觀察記錄各處理發(fā)菌時(shí)間及菌絲長(zhǎng)勢(shì)，記錄前3潮菇的產(chǎn)量、轉(zhuǎn)潮時(shí)間及第1潮菇菇峰期，每個(gè)小區(qū)隨機(jī)選取30個(gè)子實(shí)體，并測(cè)量單菇質(zhì)量、菌蓋直徑、菌蓋厚度及菌柄長(zhǎng)度。

1.3.2 莜麥秸栽培雙孢菇最適品種母種培養(yǎng)基配方篩選試驗(yàn)[6]

按“1.2.1”節(jié)中母種培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基，裝入培養(yǎng)皿，每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)注入30 mL培養(yǎng)基，121 ℃高壓滅菌 40 min。待培養(yǎng)基冷卻后，將活化后的供試菌株母種接種于直徑為9 cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行比較培養(yǎng)。每個(gè)處理接種5個(gè)培養(yǎng)皿，取直徑3 mm、厚0.4 mm的菌絲圓片接于培養(yǎng)皿中央，置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。當(dāng)有1個(gè)處理菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿時(shí)，結(jié)束培養(yǎng)，記錄菌絲生長(zhǎng)時(shí)間，測(cè)量菌落半徑，計(jì)算菌絲生長(zhǎng)速度，觀察菌絲形態(tài)及其長(zhǎng)勢(shì)，結(jié)果作方差分析，進(jìn)行顯著性測(cè)驗(yàn)。

菌絲生長(zhǎng)速度（mm/d）=菌落半徑（mm）/發(fā)菌時(shí)間（d）。

1.3.3 莜麥秸栽培雙孢菇最適品種原種培養(yǎng)基配方篩選試驗(yàn)[7]

按“1.2.2”節(jié)中原種培養(yǎng)基配方配制原種培養(yǎng)基，先將麥粒、谷粒、高粱粒浸泡48 h，玉米芯浸泡24 h，然后用沸水煮至無(wú)白心，加入牛糞或者草炭，并拌入石膏和藥品。裝入40 mm×200 mm的大試管內(nèi)，高度為試管的3/4，各處理裝料高度保持一致，放入高壓滅菌鍋內(nèi)滅菌（126～128 ℃，100 min）。每個(gè)處理設(shè)5個(gè)重復(fù)，接種后放入25 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，觀察記錄菌絲的生長(zhǎng)速度并觀察菌絲顏色及生長(zhǎng)勢(shì)。

菌絲生長(zhǎng)速度（mm/d）=培養(yǎng)料的高度（mm）/發(fā)菌時(shí)間（d）。

2 結(jié)果與分析

2.1 莜麥秸栽培雙孢菇最適品種篩選

2.1.1 不同品種菌絲生長(zhǎng)情況及產(chǎn)量比較

由表1可見(jiàn)，W192、AS2796的菌絲長(zhǎng)勢(shì)好于W2000、5113；AS2796、5113發(fā)菌至出菇所需時(shí)間最短，均為83 d，比W2000、W192分別短10 、11 d；從產(chǎn)量來(lái)看，W192、AS2796的平均單產(chǎn)顯著高于W2000、5113，其中W192產(chǎn)量最高，但W192與AS2796之間差異不顯著。

2.1.2 不同品種農(nóng)藝性狀比較

由表2可知，W192的單菇質(zhì)量顯著大于W2000、5113，AS2796的單菇質(zhì)量與其他3個(gè)品種差異均不顯著；W192的菌蓋直徑顯著大于W2000、5113，與AS2796差異不顯著；從菌蓋厚度來(lái)看，W192的菌蓋厚度顯著大于W2000，與AS2796、5113差異不顯著；從菌柄直徑來(lái)看，5113菌柄直徑顯著大于其他3個(gè)品種，AS2796的菌柄直徑最小，且顯著小于其他3個(gè)品種，W2000、W192的菌柄直徑大小居中，且二者之間無(wú)顯著差異；從菌柄長(zhǎng)度來(lái)看，W192的菌柄長(zhǎng)度顯著大于AS2796，與W2000、5113差異不明顯。AS2796子實(shí)體最硬，W192子實(shí)體較硬，W2000、5113子實(shí)體硬度一般。

總體來(lái)看，AS2796平均單產(chǎn)較高，生產(chǎn)周期最短，子實(shí)體最硬，子實(shí)體菌柄較短，菌蓋直徑較大，菌蓋厚度一般。因此，AS2796為莜麥秸栽培雙孢菇的最適品種。

2.2 莜麥秸栽培雙孢菇最適品種母種培養(yǎng)基配方篩選試驗(yàn)

由表3可知，雙孢菇AS2796在配方A和配方F上的菌絲長(zhǎng)速顯著快于其他配方，其中配方F最快，配方A菌絲長(zhǎng)速較快；其次是配方C菌絲長(zhǎng)速較快；配方B、配方D菌絲長(zhǎng)速顯著慢于其他配方，配方D最慢。配方C、配方F菌絲長(zhǎng)勢(shì)最好，表現(xiàn)為菌絲潔白濃密；配方A、配方E菌絲長(zhǎng)勢(shì)中等；配方B、配方D菌絲長(zhǎng)勢(shì)較差，表現(xiàn)為菌絲灰白稀疏?？傮w來(lái)看，雙孢菇AS2796菌絲在配方F的菌絲長(zhǎng)速最快且菌絲長(zhǎng)勢(shì)最好。因此，配方F為雙孢菇最適母種培養(yǎng)基。

2.3 莜麥秸栽培雙孢菇最適品種原種培養(yǎng)基配方篩選試驗(yàn)

對(duì)不同原種培養(yǎng)基配方上雙孢菇AS2796的菌絲生長(zhǎng)情況的分析結(jié)果見(jiàn)表4。從菌絲長(zhǎng)勢(shì)來(lái)看，在主料中加入牛糞的培養(yǎng)基配方要優(yōu)于加入草炭的配方。配方C1的菌絲長(zhǎng)勢(shì)最好，菌絲濃密潔白、邊緣整齊，配方E2的菌絲長(zhǎng)勢(shì)最弱。從菌絲長(zhǎng)速來(lái)看，在主料中加入牛糞的培養(yǎng)基菌絲長(zhǎng)速顯著快于加草炭的培養(yǎng)基。其中，配方A1、配方 A2的菌絲長(zhǎng)速最快，且顯著快于其他配方，但A1的菌絲長(zhǎng)勢(shì)好于A2?？傮w來(lái)看，配方A1菌絲長(zhǎng)速最快，菌絲長(zhǎng)勢(shì)較好；配方C1菌絲長(zhǎng)勢(shì)最好，菌絲長(zhǎng)速中等，因此配方A1、配方C1均為較好的雙孢菇原種培養(yǎng)基，生產(chǎn)中可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行選擇。

3 結(jié)論與討論

通過(guò)莜麥秸栽培雙孢菇適宜品種篩選，4個(gè)雙孢菇品種W192、W2000、AS2796、5113中，W192表現(xiàn)為發(fā)菌快、平均單產(chǎn)高（前3潮菇平均單產(chǎn)為7.5 kg/m2）、子實(shí)體農(nóng)藝性狀表現(xiàn)好，但生育周期長(zhǎng)；AS2796平均單產(chǎn)較高，生產(chǎn)周期短，子實(shí)體最硬，子實(shí)體農(nóng)藝性狀表現(xiàn)好。AS2796、W192均為莜麥秸稈栽培雙孢菇適宜品種，但考慮壩上地區(qū)雙孢菇以錯(cuò)季栽培、鮮銷(xiāo)為主，子實(shí)體硬、不易開(kāi)傘的品種較受歡迎，且商品價(jià)格高，而且壩上地區(qū)受氣候條件影響，雙孢菇出菇上市期短，生產(chǎn)周期為篩選品種又一個(gè)重要條件?？傮w來(lái)看，AS2796為壩上地區(qū)利用莜麥秸稈栽培雙孢菇的最適品種。

通過(guò)對(duì)6種雙孢菇母種培養(yǎng)基的篩選，確定適宜母種培養(yǎng)基配方為發(fā)酵棉籽皮100 g，牛糞50 g，葡萄糖20 g，瓊脂 20 g，KH2PO4 3 g，MgSO4 1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨5 g，水1 000 mL。菌絲在該培養(yǎng)基配方上表現(xiàn)為菌絲長(zhǎng)速最快，為2.90 mm/d，且菌絲長(zhǎng)勢(shì)最好，表現(xiàn)為氣生菌絲多且顏色潔白，菌落邊緣整齊。

通過(guò)對(duì)11個(gè)原種培養(yǎng)基的篩選，確定了A1、C1 2個(gè)適宜的雙孢菇原種培養(yǎng)基配方，A1：84.15%麥粒、14.85%牛糞，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；C1：16.83%谷粒、6732%高粱粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4。其中，配方A1的菌絲生長(zhǎng)速度最快，為5.37 mm/d，菌絲長(zhǎng)勢(shì)較好；配方C1的菌絲長(zhǎng)勢(shì)最好，生長(zhǎng)速度中等，為4.10 mm/d。

參考文獻(xiàn)：

[1]楊立誠(chéng). 塑料大棚錯(cuò)季雙孢菇高產(chǎn)栽培技術(shù)[J]. 食用菌，2007，29 （4）：42-43.

[2]曲祥春，何中國(guó)，郝文媛，等. 我國(guó)燕麥生產(chǎn)現(xiàn)狀與發(fā)展對(duì)策[J]. 雜糧作物，2008，26（3）：233-235.

[3]曲娟娟，黃 芳，周 隆，等. 雙孢蘑菇母種培養(yǎng)基篩選研究[J]. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，36（5）：576-578.

[4]孔德勇，許修宏，劉永鑫，等. 雙孢菇母種培養(yǎng)基的優(yōu)化[J]. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，39（8）：70-73.

[5]曲娟娟，許修宏，張小海，等. 雙孢蘑菇原種培養(yǎng)基篩選研究[J]. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，38（2）：187-189.

[6]徐彥軍，楊 靜，楊 方. 雙胞蘑菇稻草培養(yǎng)料配方優(yōu)化及露地栽培試驗(yàn)[J]. 食用菌，2010（6）：30-32

[7]鄭林用，劉本洪. 食用菌培養(yǎng)料碳氮比（C/N）的計(jì)算方法[J]. 四川農(nóng)業(yè)科技，1997（3）：37.