多重耐藥銅綠假單胞菌產(chǎn)β－內(nèi)酰胺酶研究進(jìn)展

楊明友

（云南省蒙自市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 云南 蒙自 661100）

銅綠假單胞菌常常在人類(lèi)免疫力低下時(shí)對(duì)人體免疫系統(tǒng)進(jìn)行侵襲，是人體最易感染的病原菌之一。多重耐藥銅綠假單胞菌是近年來(lái)由于銅綠假單胞菌耐藥性的獲得而出現(xiàn)的具有高度耐藥性，多重耐藥性的危害性極大的病原菌。多重銅綠假單胞菌感染所導(dǎo)致的疾病由于感染機(jī)制多樣，感染菌株多種。所以在治療上有著很大的難度。被該種菌株感染后病人的治愈率極低而死亡率極高。所以對(duì)銅綠假單胞菌產(chǎn)生的β－內(nèi)酰胺酶的種類(lèi)及耐藥機(jī)制進(jìn)行研究是非常有必要的。多重耐藥銅綠假單胞菌產(chǎn)生的β－內(nèi)酰胺酶種類(lèi)繁多［1］。本文主要對(duì)多重耐藥銅綠假單胞菌所產(chǎn)超廣譜β－內(nèi)酰胺酶（ESBLs）、AmpC酶及金屬型β－內(nèi)酰胺酶的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 β－內(nèi)酰胺酶種類(lèi)

1.1 ESBLs：ESBLs是有著可以水解特點(diǎn)的超廣譜β－內(nèi)酰胺酶。易產(chǎn)此酶的菌株有大腸桿菌、鮑曼不動(dòng)桿菌等，在我國(guó)分解頭孢噻肟的CTXM 型是容易產(chǎn)ESBLs的主要菌株。有關(guān)菌株在產(chǎn)生ESBLs后可以將三代頭孢菌素類(lèi)藥物、青霉素類(lèi)藥物等β－內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素水解滅活。ESBLs的產(chǎn)生大多源自于其他類(lèi)型β－內(nèi)酰胺酶的基因突變，如TEM－1、SHB－1等。對(duì)抗生素類(lèi)藥物的水解能力與其突變發(fā)生的位置有關(guān)。ESBLs的種類(lèi)包括：①TEM 型：該類(lèi)型的β－內(nèi)酰胺酶是由于氨基酸種類(lèi)發(fā)生改變而形成的。具有酸性性質(zhì)，包括多種酶，如：TEM－42，TEM－21，TEM－10 等。多數(shù)都是由于基因突變導(dǎo)致個(gè)別氨基酸種類(lèi)發(fā)生替換而形成的。②SHV型：SHV2a是來(lái)源于SHV 的β－內(nèi)酰胺酶類(lèi)物質(zhì)。③PER－1 基因突變使該酶對(duì)藥物的催化作用明顯下降，耐藥性明顯下降。④VEB型：分為VEB－1和VEB－2型，產(chǎn)生與基因突變導(dǎo)致氨基酸序列改變有關(guān)。⑤OXA 型：包括OXA－19、OXA－28、OXA－32等。⑥GES型：包括GES－1和GES－2型。由于基因突變的作用使其對(duì)藥物的耐藥性很低。

1.2 AmpC酶：AmpC相對(duì)于第三代頭孢類(lèi)抗生素對(duì)第四代頭孢能夠起到更強(qiáng)的耐藥效果。在受到β－內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的刺激時(shí)能夠使β－內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生量大大升高，由于有著這樣的誘導(dǎo)作用，這種β－內(nèi)酰胺酶又稱(chēng)為誘導(dǎo)酶。

AmpC酶在表達(dá)后有三種表型，分別為低水平、中等水平和高誘導(dǎo)及高水平和基本β－內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生。AmpC的突變主要是ampD突變。

1.3 金屬型β－內(nèi)酰胺酶的分類(lèi)主要包括VIM 型和IMP型。

VIM 型包括：VIM－1、4、5、7、8、9型等，其中VIM－7對(duì)亞胺培南及青霉素類(lèi)抗生素具有水解作用，但對(duì)于氨曲南的水解作用較低，其氨基酸構(gòu)成與VIM－1有77%的相似度。

IMP型包括：IMP－1、7、10、16、9等，IMP－10由于基因突變的作用使其難以水解青霉素類(lèi)β－內(nèi)酰胺類(lèi)藥物的β－內(nèi)酰胺環(huán)。

2 耐藥機(jī)制研究

隨著β－內(nèi)酰胺類(lèi)藥物的廣泛應(yīng)用，其耐藥菌株也不斷增多，其耐藥機(jī)制中產(chǎn)生具有水解特性的β－內(nèi)酰胺酶是最常見(jiàn)的耐藥機(jī)制。作用與β－內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的β－內(nèi)酰胺環(huán)，使環(huán)被水解而解開(kāi)，從而使細(xì)菌的抗菌活性消失。不同細(xì)菌產(chǎn)生的β－內(nèi)酰胺酶的特異性不同，從而水解不同的β－內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素。

ESBLs和AmpCβ－內(nèi)酰胺酶可以水解頭孢噻肟。其中AmpC酶可以對(duì)第三代頭孢菌素和頭霉素類(lèi)藥物產(chǎn)生耐藥性，但其活性可以被氯唑西林等β－內(nèi)酰胺酶拮抗藥抑制，ESBLs也可以對(duì)第三代頭孢菌素產(chǎn)生耐藥性，但其活性可以被克拉維酸等β－內(nèi)酰胺酶拮抗藥抑制，并已經(jīng)開(kāi)始成功的應(yīng)用于臨床，使其在臨床上的耐藥性降低。金屬β－內(nèi)酰胺酶對(duì)β－內(nèi)酰胺類(lèi)藥物的水解能力很強(qiáng)，能夠?qū)Υ蟛糠炙幬锏摩拢瓋?nèi)酰胺環(huán)產(chǎn)生水解作用，但只要將金屬酶的活性樞紐Zn2＋變成絡(luò)合物使其失活，能夠使藥物的作用更強(qiáng)［2］。

β－內(nèi)酰胺酶能夠與藥物與某些耐酶β－內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素結(jié)合，將藥物滯留于細(xì)胞膜外間隙，使藥物無(wú)法進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)，不能在其作用靶位發(fā)揮抗菌作用，此種非水解的耐藥機(jī)制稱(chēng)做“牽制機(jī)制”。

另外，藥物無(wú)法在其作用的部位達(dá)到有效的濃度也是多重銅綠耐藥假單胞菌的耐藥機(jī)制。孔道蛋白的缺陷開(kāi)始藥物進(jìn)入的通道受到阻礙［3］。有很多的β－內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素可以通過(guò)細(xì)胞外膜由蛋白質(zhì)形成的孔通道。不同的革蘭陰性菌擁有數(shù)量不等大小不同的外膜孔道。如銅綠假單胞菌外膜上的OprD是亞胺培南進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)的通道，而銅綠假單胞菌缺乏OprD，所以對(duì)于亞胺培南類(lèi)藥物多重耐藥銅綠假單胞菌具有較高的耐藥性。

以上為對(duì)多重耐藥銅綠假單胞菌產(chǎn)生β－內(nèi)酰胺酶耐藥機(jī)制及對(duì)多重耐藥銅綠假單胞菌耐藥機(jī)制的淺談。由于銅綠假單胞菌產(chǎn)生的β－內(nèi)酰胺酶的種類(lèi)多種多樣，多重耐藥銅綠假單胞菌更是如此。因此對(duì)于β－內(nèi)酰胺酶的耐藥性需要進(jìn)行綜合性的研究，綜合研究其特點(diǎn)及性質(zhì)，為臨床上治療多重耐藥銅綠假單胞菌引起的多種感染提供參考。在臨床上藥合理應(yīng)用抗生素類(lèi)藥物，盡可能減少基因突變情況的發(fā)生，防止更多新型β－內(nèi)酰胺酶的生成，為臨床上的治療降低難度。

［1］ Naas T，Poirel L，Xarim A，etal.Molecular characterization of In 50，a class 1int egron encoding the genes for the extended－spectrum Blact amaseVEB－1in Pseudomonas aeruginosa［J］.TEMS Microbiol Lett，1999，176（2）：411－419

［2］ Walsh TR，Bolm strom A，Qwarnstrom A，eta.l Evaluation of a new E test for d etecting metallo－beta－lactam ase in routine clinical testing［J］.J C lin M icrob io，l 2002，40（8）：2755－2759

［3］ HuangH，hancockRE.G enetic definition of the substrate select ivityofouter m embrane protein OprD of P seudomona s aeruginosa［J］.B acterio logy，1993，175（24）：7793－7800