藥物復合磷酸氫鉀注射液對家兔血管刺激性試驗的研究

張曉鈿

（海南省藥物安全性評價研究中心 海南 ?？?71199）

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑

供試品：復合磷酸氫鉀注射液，規(guī)格：2mL（含磷酸氫二鉀0.639g，磷酸二氫鉀0.4354g），批號：111201，由海南合瑞制藥股份有限公司提供。

平行對照品，復合磷酸氫鉀注射液，規(guī)格：2mL（含磷酸氫二鉀0.639g，磷酸二氫鉀0.4354g），批號：110610，由蘇州天馬醫(yī)藥集團天吉生物制藥有限公司提供。

陰性對照品0.9%（g/mL）氯化鈉注射液，規(guī)格：500mL：4.5g，批號:10100531，由海南國瑞堂制藥有限公司提供；蒸餾水，由本中心實驗室自制雙蒸水。

1.2 實驗動物

新西蘭家兔6 只，雄性，體重：2.094～2.378kg，由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供，實驗動物質(zhì)量合格證號：№0103055。

1.3 方法和劑量

1.3.1 方法

取檢疫合格家兔6 只，將6 只家兔按體重排序隨機分為2組，分別為供試品組（1～3 號）和平行對照品組（4～6 號）。采用同體左右側(cè)自身對比，1～3 號家兔左側(cè)外耳緣靜脈給予供試品溶液，4～6 號家兔左側(cè)外耳緣靜脈給予平行對照品溶液，1～6 號家兔右側(cè)外耳緣靜脈給予等體積陰性對照品。每天給藥1 次，連續(xù)給藥3d，靜脈滴注速度：約30 滴/min，總藥量在25min 內(nèi)注射完畢。每次給藥前后及末次給藥后24、48、72、96h 對動物及注射部位進行肉眼觀察，觀察動物全身及注射部位是否有充血、紅腫、潰瘍、瘀斑、硬結等局部刺激反應，觀察期結束后用空氣栓塞法處死1、2 號和4、5 號動物，剪取含有血管的耳緣組織，固定后作組織病理學檢查。留存3 號和6 號動物繼續(xù)觀察14d 后處死，剪取含有血管的耳緣組織，固定后作組織病理學檢查，以了解刺激性反應的可逆程度。家兔血管過敏性評價標準為：0 級，給藥部位無明顯反應；1 級，給藥部位靜脈血管輕度瘀血、紅腫；2 級，給藥部位靜脈血管中度瘀血、紅腫；3 級，給藥部位靜脈血管重度瘀血，周圍組織嚴重紅腫[1]。

1.3.2 劑量

供試品溶液和平行對照品溶液給藥劑量為40.29mg/kg，陰性對照品為0.9%（g/mL）氯化鈉注射液，給藥體積均為15.0 mL/kg。血管刺激性試驗采用臨床用藥相同濃度[2]。

2 結果

2.1 一般癥狀觀察家兔靜脈滴注給藥后，試品組1-3 號和平行對照品組4-6號家兔一般癥狀觀察均無異常表現(xiàn)。

2.2 注射部位肉眼觀察

末次給藥后和恢復期，供試品組除1 號左右耳和3 號右耳在末次給藥后24h 出現(xiàn)充血刺激反應外，其余家兔給藥部位均未見明顯局部刺激反應發(fā)生；平行對照品組除5 號右耳在末次給藥后24h 出現(xiàn)充血刺激反應外，其余家兔給藥部位均未見明顯局部刺激反應發(fā)生。

2.3 病理檢查

末次給藥后96h 和恢復期病理鏡下觀察：

供試品組2 號家兔左右側(cè)取材血管均未見明顯局部血管刺激反應；1 號家兔右側(cè)取材血管可見局灶性血管內(nèi)皮下纖維結締組織增生，伴有少量炎細胞浸潤及出血；3 號（恢復期）家兔右側(cè)取材血管可見小血管一側(cè)血栓機化。故考慮上述病變系操作引起的損傷，評價標準為0。

平行對照品組4 號、6 號（恢復期）家兔左右側(cè)取材血管均未見明顯擴張、充血、內(nèi)皮細胞變性壞死、周圍組織水腫及炎細胞浸潤等局部血管刺激反應；5 號家兔右側(cè)取材血管可見部分血管壁平滑肌消失，伴有少量炎細胞浸潤，因右側(cè)外耳緣靜脈給予等體積的0.9%（g/mL）氯化鈉注射液，故考慮上述病變系操作引起的損傷。

3 結論

試驗結果表明，供試品組1 號、2 號、3 號（恢復期）家兔，平行對照品組4 號、5 號、6 號（恢復期）家兔，第2、3 段取材血管鏡下觀察均未見明顯擴張、充血、潰瘍、出血、變性、壞死、周圍組織水腫及炎細胞浸潤等局部血管刺激反應發(fā)生。

綜上所述，供試品復合磷酸氫鉀注射液在給藥劑量為40.29mg/kg，給藥體積為15mL/kg 試驗條件下，每天給藥1 次，連續(xù)給藥3d，對家兔耳緣靜脈未見明顯局部血管刺激反應，提示該供試品復合磷酸氫鉀注射液無血管刺激反應。

[1]國家食品藥品監(jiān)督管理局.藥物研究技術指導原則:化學藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術指導原則[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2005:116-131.

[2]陳奇.中藥藥理研究方法學(第2 版)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2006.