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    青霉素對(duì)金銀花光合生理特性的影響

    2015-07-31 12:06:57崔志偉王康才王乾等
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年3期
    關(guān)鍵詞:光合特性金銀花青霉素

    崔志偉 王康才 王乾等

    摘要:以金銀花品種巨花一號(hào)為材料,研究噴施青霉素對(duì)金銀花光合生理特性的影響。結(jié)果表明,隨著青霉素濃度升高,葉片中抗氧化酶活性逐漸升高,高濃度(800 mg/L)處理會(huì)抑制POD活性;低濃度(400 mg/L)處理可顯著提高實(shí)際光化學(xué)效率(ФPSⅡ)、電子傳遞速率(ETR)、光化學(xué)猝滅系數(shù)(qP),增幅分別為196.6%、29.1%、975% 。當(dāng)青霉素濃度為600 mg/L時(shí),葉綠素a 、葉綠素b含量分別比對(duì)照高8.6%、58.8%;凈光合速率(Pn)、胞間二氧化碳濃度(Ci)、蒸騰速率(Tr)分別升高52.9%、32.1%、27.9%。青霉素濃度為800 mg/L時(shí),氣孔導(dǎo)讀(Gs)提高162.9%,但對(duì)ФPSⅡ、ETR產(chǎn)生一定的抑制作用,并降低葉綠素的含量。說(shuō)明適宜濃度的青霉素可顯著改善金銀花的光合生理特性,對(duì)金銀花生產(chǎn)實(shí)踐起參考作用。

    關(guān)鍵詞:青霉素;金銀花;光合特性;葉綠素;氣體交換參數(shù);熒光參數(shù)

    中圖分類號(hào): S567.7+90.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

    文章編號(hào):1002-1302(2015)03-0224-03

    青霉素是一類臨床上廣泛應(yīng)用的廣譜抗菌素,常用于臨床醫(yī)學(xué)和作為動(dòng)物飼料添加劑等,植物上常用于病害防治和調(diào)控生長(zhǎng)等,對(duì)高等植物(如水稻、小麥等)種子萌發(fā)時(shí)α-淀粉酶的形成、葉綠素形成與降解、內(nèi)源物質(zhì)代謝等具有顯著影響[1]。湯菊香等報(bào)道,適宜濃度的KH2PO4和青霉素能明顯提高小麥老化種子發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)、幼苗根系活力、葉片葉綠素含量及幼苗長(zhǎng)度[2]。青霉素應(yīng)用在藥用植物上也有相關(guān)報(bào)道,如容紹英等研究發(fā)現(xiàn),800 mg/L青霉素水溶液能提高菘藍(lán)種子發(fā)芽率、幼苗株高和葉綠素含量[3];謝德明對(duì)川芎進(jìn)行外源噴施青霉素水溶液后發(fā)現(xiàn),植株的葉綠素含量提高18.28%,并降低了植物組織水勢(shì)[4]。因此,青霉素被認(rèn)為是一種新的、作用強(qiáng)的激素類植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。

    金銀花為忍冬科(Caprifoliaceae)忍冬屬(Lonicera)多年生半常綠藤本植物,具有較高的藥用價(jià)值,有“中藥青霉素”的美稱。金銀花為喜光類植物,當(dāng)陽(yáng)光充足、光合作用旺盛時(shí),植株可將更多的光合產(chǎn)物分配于營(yíng)養(yǎng)器官,使枝條粗壯、葉大、產(chǎn)量高。噴施青霉素可影響葉綠素含量,但對(duì)光合生理影響的相關(guān)研究報(bào)道則較少,因此,筆者通過(guò)外源噴施青霉素,初步研究其對(duì)金銀花的光合生理的影響,以期為后續(xù)相關(guān)研究和生產(chǎn)應(yīng)用提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    試驗(yàn)材料為金銀花品種巨花一號(hào),經(jīng)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材研究所王康才教授鑒定為忍冬科忍冬屬忍冬(Lonicera japonica Thunb)。青霉素(純度≥98%)為北京索萊寶科技有限公司生產(chǎn)。

    1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    試驗(yàn)在南京農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材研究所日光溫室內(nèi)進(jìn)行,開(kāi)始前20 d停止對(duì)處理植株施用任何營(yíng)養(yǎng)元素,試驗(yàn)期間(2013年4月13日至5月1日)定期對(duì)植株澆水。青霉素分別用蒸餾水配制成濃度為200、400、600、800 mg/L的溶液,每個(gè)處理分4株,共處理3次。對(duì)照(CK)為噴施清水處理。噴施時(shí)間為16:00—17:00,以葉片正反兩面全部濕潤(rùn)且無(wú)液體滴下為宜。

    1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

    1.3.1 抗氧化酶體系活性

    超氧化物歧化酶(SOD)活性的測(cè)定采用核黃素-NBT光還原法,以抑制氯化硝基氮藍(lán)四唑(NBT) 光化還原50%為1個(gè)酶活單位。過(guò)氧化物酶(POD)活性的測(cè)定采用愈創(chuàng)木酚法,以 1 min D470 nm變化0.01為1個(gè)酶活單位。丙二醛(MDA)含量的測(cè)定采用硫代巴比妥酸(TBA)顯色法。

    1.3.2 葉綠素含量

    用島津UV-1601分光光度計(jì)按 Lichtenthaler 等的方法[5]測(cè)定并計(jì)算葉片單位鮮質(zhì)量的葉綠素a/葉綠素b含量。

    1.3.3 光合作用參數(shù)

    選取生長(zhǎng)勢(shì)較好、發(fā)育完全的葉片,用便攜式光合作用分析系統(tǒng)(Li-6400XT,美國(guó)Li-Cor公司)于晴天09:00—11:00測(cè)定植株光合作用。測(cè)定時(shí)使用開(kāi)放氣路,葉室溫度控制在(25±1) ℃,PPFD控制在 800 μmol/(m2·s),參比室CO2濃度為(380±10) μmol/L,相對(duì)濕度為60%~70%。測(cè)定的氣體交換參數(shù)有凈光合速率(Pn)、氣孔導(dǎo)度(Gs)、胞間CO2濃度(Ci)、蒸騰速率(Tr)。

    1.3.4 葉綠素?zé)晒鈪?shù)

    Imaging-PAM M-series調(diào)制葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)(德國(guó)Walz公司)測(cè)定葉綠素?zé)晒鈪?shù)。選取各處理生長(zhǎng)點(diǎn)下第3張完全展開(kāi)功能葉,20 min充分暗適應(yīng)后,取下葉片,在每個(gè)葉圓片上選定一個(gè)直徑為1 cm的測(cè)試目標(biāo)區(qū)域(AOI),測(cè)定時(shí)先用測(cè)量光[0.5 μmol/(m2·s)]測(cè)定初始熒光F0,飽和光脈沖2 700 μmol/(m2·s)(脈沖時(shí)間0.8 s)誘導(dǎo)FM,光化光強(qiáng)度為145 μmol/(m2·s)。在軟件的Kinetics窗口檢測(cè)各葉綠素?zé)晒鈪?shù)的動(dòng)力學(xué)變化曲線,相應(yīng)數(shù)據(jù)可直接從Report窗口導(dǎo)出。

    1.4 數(shù)據(jù)分析

    應(yīng)用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)圖表處理,采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行相關(guān)性分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 青霉素對(duì)金銀花抗氧化酶體系的影響

    SOD與POD是植物體內(nèi)的一種抗氧化保護(hù)酶,與膜脂過(guò)氧化有關(guān),還可以清除植物細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的少量超氧陰離子自由基( O-2[KG-*2]· )。從表1可看出,SOD活性在青霉素濃度為 800 mg/L 時(shí)最強(qiáng);POD活性在青霉素濃度為600 mg/L時(shí)最強(qiáng),濃度繼續(xù)升高時(shí),活性則減弱。MDA作為H2O2的解毒劑,主要存在于植物的微體中,其含量可以反映出對(duì)細(xì)胞膜受傷害的程度以及抗氧化酶體系對(duì)細(xì)胞膜的保護(hù)程度,由表1可知,總體而言,MDA含量隨著青霉素濃度升高而逐漸上升,表明高濃度的青霉素處理不利于金銀花的生長(zhǎng)。endprint

    2.2 青霉素對(duì)金銀花葉綠素含量的影響

    葉綠素是植物進(jìn)行光合作用的主要色素,其含量反映了植物同化物質(zhì)的能力。如表2所示,與對(duì)照相比,外源噴施青霉素對(duì)葉綠素含量產(chǎn)生一定的影響。隨著青霉素濃度升高,葉綠素a含量、葉綠素b含量及葉綠素總量均有所增加,以濃度為600 mg/L時(shí)效果顯著,分別比對(duì)照增加了86%、588%、22.1%;當(dāng)濃度為800 mg/L時(shí),葉綠素含量則顯著降低,以葉綠素總量下降幅度最大,比對(duì)照降低323%。與對(duì)照相比,200、400 mg/L青霉素可降低葉綠素 a/葉綠素 b的值,高濃度(600、800 mg/L)青霉素可提高葉綠素 a/葉綠素 b的值,最大增幅達(dá)15.4%。

    3 結(jié)論與討論

    光合作用是植物體內(nèi)重要的代謝過(guò)程,其過(guò)程受各種內(nèi)外環(huán)境因素的影響,如光照、水分、CO2濃度等。由試驗(yàn)結(jié)果可知,噴施青霉素后胞間CO2濃度(Ci)與凈光合速率(Pn)的變化趨勢(shì)一致,均隨著濃度升高而上升,說(shuō)明增大CO2濃度可以大大提高金銀花的光合生產(chǎn)力。不同處理下的蒸騰速率(Tr)雖表現(xiàn)出與胞間CO2濃度(Ci)及凈光合速率(Pn)同樣的趨勢(shì),但其過(guò)高或過(guò)低意味著植物對(duì)水分的利用不充分,植物的光合作用。

    光合色素在植物光合作用的原初光反應(yīng)過(guò)程中起著關(guān)鍵作用[9],其含量高有利于增加光合產(chǎn)物的積累及葉片對(duì)花蕾營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的供應(yīng)能力,從而促進(jìn)花蕾的發(fā)育。青霉素可促進(jìn)葉片中核酸和蛋白質(zhì)的合成,并且降低葉片中葉綠素酶的活性來(lái)延緩葉綠素的降解,從而提高葉片中葉綠體色素的含量[1]。由試驗(yàn)結(jié)果可知,在環(huán)境相同的條件下,外源噴施適宜濃度的青霉素可以增加葉綠素 a和葉綠素 b的含量,600~800 mg/L青霉素水溶液還可提高葉綠素a/葉綠素b值,葉綠素 b含量的提高可以增加用于吸收光能的集光色素蛋白的相對(duì)含量,從而保證葉片吸收更多的光能用于光合作用 [10],而葉綠素a/葉綠素b值的提高有助于植物適應(yīng)周圍環(huán)境光強(qiáng),又可提高對(duì)逆境的適應(yīng)性[11]。

    同時(shí),本試驗(yàn)通過(guò)不同濃度處理下金銀花的葉綠素?zé)晒馓匦缘臏y(cè)定發(fā)現(xiàn),適宜濃度的青霉素噴施后葉片均比對(duì)照有更高的Fv/Fm、ФPSⅡ、qP、ETR值。Fv/Fm值增加說(shuō)明其PSⅡ的實(shí)際光能捕獲效率較高,能夠把所捕獲的光能更多地用于光化學(xué)反應(yīng)[12]。處理后的ETR、qP值也有所升高,說(shuō)明其 PSⅡ 反應(yīng)中心原初電子受體QA庫(kù)較大,使PSⅡ反應(yīng)中心開(kāi)放的比列增大,它能夠通過(guò)光合電子傳遞途徑將較多的光能用于二氧化碳的同化,阻止了過(guò)量的激發(fā)能在PSⅡ反應(yīng)中心積累,這有助于為光合碳同化提供更多的能量(ATP)和還原力(NADPH),形成更多的光合產(chǎn)物[13],從而分配于植株各器官,促進(jìn)植株的生長(zhǎng)。

    目前,關(guān)于青霉素對(duì)植物作用機(jī)理的相關(guān)文獻(xiàn)未見(jiàn)報(bào)道,筆者只是初步探討對(duì)金銀花的影響,但在不同物種及不同環(huán)境條件下的作用是否類似,仍需進(jìn)一步的探討。同時(shí),由于青霉素可以抑制內(nèi)生菌的繁殖,外源噴施青霉素是否會(huì)影響金銀花相關(guān)成分指標(biāo)以及青霉素在金銀花中的殘留是否影響藥效,仍需進(jìn)一步研究。

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