姜及其不同炮制品中姜酚的含量測定

楊宇萍，杜 晶，鄧仙梅，孟 江

（廣東藥學(xué)院中藥學(xué)院，廣東廣州510006）

姜及其不同炮制品中姜酚的含量測定

楊宇萍，杜 晶，鄧仙梅，孟 江

（廣東藥學(xué)院中藥學(xué)院，廣東廣州510006）

目的 比較姜及其不同炮制品中姜酚類成分的含量差異，以揭示不同炮制品的藥效變化原理。方法以辣椒堿為對照，姜酚類成分為指標(biāo)，采用紫外-可見分光光度法測定樣品中姜酚類成分的含量。結(jié)果 標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=0.01X-0.003 2（r2=0.999 4），表明辣椒堿濃度為9.99～119.88 μg/mL時(shí)與吸光度呈良好線性關(guān)系。精密度試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)及加樣回收率試驗(yàn)測試結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）值均小于3.0%。生姜及其炮制品中姜酚含量由高至低依次為：姜炭、炮姜、干姜、生姜。結(jié)論 姜不同炮制品的藥效變化很可能是因炮制前后姜酚類成分含量變化所引起的，并且，紫外-可見分光光度法準(zhǔn)確度高、穩(wěn)定性良好，可應(yīng)用于樣品中姜酚類成分的含量測定。

生姜； 姜科； 炮制品； 酚類； 分光光度法，紫外線

姜為姜科植物姜（Zingiber officinale Rosc.）的根莖，它作為一味“藥食同源”的中藥被廣泛應(yīng)用于世界各地。根據(jù)中醫(yī)藥理論，中藥材經(jīng)過適當(dāng)?shù)呐谥萍庸た梢云鸬綔p毒增效、改變藥性，以滿足不同臨床治療需要的作用[1-3]。姜的炮制品有干姜、炮姜及姜炭，其因滿足了不同疾病的需要而被廣泛應(yīng)用于中醫(yī)臨床。生姜具有散寒發(fā)汗、化痰止咳、和胃止嘔的作用；主治風(fēng)寒感冒、嘔吐等。干姜具有溫中散寒、回陽通脈、溫肺化飲的作用；主治脘腹冷痛、嘔吐泄瀉、肢冷脈微、痰飲喘咳。炮姜具有溫經(jīng)止血、溫中止痛的作用；主治陽虛失血、吐衄崩漏、脾胃虛寒、腹痛吐瀉。姜炭則有溫經(jīng)止血、溫脾止瀉的功效；主治虛寒性吐血、便血、崩漏、陽虛泄瀉[1，4-5]。現(xiàn)代研究表明，姜的主要有效成分為姜辣素類成分[6]，包括6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚、12-姜酚等[7]。且現(xiàn)代藥理學(xué)研究結(jié)果也證實(shí)了它們的藥效差異。例如，干姜具有很好的溫中散寒作用，炮姜具有較好的溫經(jīng)止痛、止瀉的功效，而姜炭則具有很好的溫經(jīng)止血作用[8-11]。經(jīng)炮制后，其藥效為何會(huì)發(fā)生如此變化呢，本文擬通過對姜酚類成分含量進(jìn)行測定比較，揭示姜在炮制前后藥效發(fā)生變化的奧秘，為其進(jìn)一步研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 AY120電子天平（SHAMAOZU CORPOPAITION JAPAN）、HH-6恒溫水浴鍋（江蘇金壇市宏華儀器廠）、GZX-9240 MBE數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）、UV-2450紫外分光光度計(jì)（日本島津公司）；SHB-Ⅳ雙B循環(huán)水式多用真空泵 （鄭州長城科工貿(mào)有限公司）。

1.1.2 藥材與試劑 姜樣品分別采集于廣東、四川，經(jīng)廣東藥學(xué)院中藥資源系劉基柱副教授鑒定為姜科植物姜的根莖。干姜、炮姜、姜炭均是根據(jù)《中華人民共和國藥典》（2010年版一部）附錄藥材炮制通則項(xiàng)下烘干法、砂燙法及炒炭法炮制所得。辣椒堿對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：A0198）；乙醇為分析純。

1.2 方法

1.2.1 溶液的制備

1.2.1.1 對照品溶液的制備 精密量取辣椒堿對照品10 mg，置于50 mL容量瓶中，加乙醇定容至50 mL得標(biāo)準(zhǔn)品母液，再吸取適量標(biāo)準(zhǔn)品母液加乙醇稀釋，制備成濃度為0.199 8 mg/mL的辣椒堿對照品溶液。

1.2.1.2 供試品溶液的制備 按照前期試驗(yàn)優(yōu)選的干姜中姜辣素（姜酚）的最佳提取工藝[12]，稱取干姜2 g，精密稱定，加入10倍量的80%乙醇回流提取3次，每次60 min，提取液濾過，減壓濃縮至干，提取物再加乙醇溶解并定容至100 mL中，即得供試品溶液，備用。

1.2.2 測定波長的選擇 將辣椒堿對照品溶液、供試品溶液和空白溶液在200～500 nm進(jìn)行全波長掃描，結(jié)果辣椒堿和供試品溶液在280 nm處均有最大吸收，空白溶液在此波長下無吸收，故確定280 nm為測定波長。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取辣椒堿標(biāo)準(zhǔn)液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL于10 mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度，測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以對照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（X），吸光度為縱坐標(biāo)（Y）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程。

1.2.4 方法學(xué)考察

1.2.4.1 精密度試驗(yàn) 精密量取2 mL對照品溶液，加乙醇定容至10 mL，作為供試品溶液。以乙醇作空白，測定吸光度，連續(xù)測定6次，計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。

1.2.4.2 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密稱取生姜、干姜、炮姜及姜炭藥材粉末2.0 g，按1.2.1.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液。以乙醇作空白，測定吸光度，分別于0、10、20、30、40、50、60 min測定吸光度，計(jì)算RSD。

1.2.4.3 重復(fù)性試驗(yàn) 精密稱取生姜、干姜、炮姜及姜炭藥材粉末2.0 g，按1.2.1.2項(xiàng)下方法，平行制備6份供試品溶液，按1.2.3項(xiàng)下方法測定吸光度，計(jì)算RSD。

1.2.4.4 加樣回收率試驗(yàn) 稱取已知姜酚含量的干姜藥材粉末6份，每份約1 g，精密稱定，分別精密加入辣椒堿50 mg，按1.2.1.2項(xiàng)下方法制備各供試品溶液，按1.2.3項(xiàng)下方法測定吸光度，計(jì)算RSD。

1.2.5 含量測定 按已優(yōu)選的最佳工藝條件對不同批次的生姜、干姜、炮姜及姜炭樣品進(jìn)行提取，制備供試品溶液，并按1.2.1.2項(xiàng)下方法測定吸光度，計(jì)算含量。

2 結(jié) 果

2.1 線性試驗(yàn) 回歸方程為 Y=0.01X-0.003 2，r2= 0.999 4，結(jié)果表明，辣椒堿在9.99～119.88 μg/mL時(shí)與吸光度呈良好線性關(guān)系。

2.2 精密度試驗(yàn) RSD=0.13%，表明儀器精密度良好。

2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 生姜、干姜、炮姜及姜炭的RSD值分別為1.54%、0.74%、1.23%、1.68%，均小于2.00%，表明供試液穩(wěn)定性良好。

2.4 重復(fù)性試驗(yàn) 生姜、干姜、炮姜及姜炭的RSD值分別為1.65%、1.80%、1.95%、2.06%，表明該方法的重復(fù)性良好。

2.5 加樣回收率試驗(yàn) RSD=2.20%，表明該方法的準(zhǔn)確度良好。見表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.6 含量測定 不同產(chǎn)地樣品中姜酚的含量不同，在產(chǎn)于廣東揭陽的樣品中姜酚含量最高；不同炮制品中姜酚的含量由高至低依次為：姜炭、炮姜、干姜、生姜。見表2。

表2 不同產(chǎn)地的不同炮制品姜酚含量測定結(jié)果（mg/g）

3 討 論

中藥材必須經(jīng)過炮制加工成飲片后才能入藥，這是中醫(yī)臨床用藥的一個(gè)特點(diǎn)，也是中醫(yī)藥學(xué)的一大特色。中藥材經(jīng)過一定的炮制技術(shù)加工處理后可獲得減毒增效、改變藥性等效果而滿足不同疾病臨床治療的需要。干姜、炮姜、姜炭是由生姜經(jīng)不同炮制工藝加工后所得的3種中藥飲片，雖來源相同，但經(jīng)炮制加工后其原有的強(qiáng)辛散性藥性逐漸減弱，而收斂性則逐漸增強(qiáng)，故在臨床上彰顯出不同藥效。本試驗(yàn)測試結(jié)果表明，姜的不同炮制品中姜酚類成分含量差異顯著，其含量高低依次為姜炭、炮姜、干姜、生姜，這是因不同炮制方法所致。因此，其藥效變化很可能是因炮制前后姜酚類成分含量變化所引起。然而，在炮制前后其成分具體發(fā)生了什么變化及其變化機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

此外，不同產(chǎn)地的姜樣品中姜酚類成分含量也有明顯差異。本研究結(jié)果表明，廣東產(chǎn)姜中姜酚含量高于四川。這可能是由于不同地理位置、土壤、氣候條件等因素影響所致。

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Content determination of gingerols in ginger and its different processed products

Yang Yuping，Du Jing，Deng Xianmei，Meng Jiang
（School of Chinese Medicine，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou，Guangdong 510006，China）

Objective To compare the differences of gingerols content in ginger and its processed products in order to reveal the change principle of pharmacological efficacy in different processed products.Methods With capsaicin as control and the gingerols constituents as index，the content of gingerols in ginger and its processed products samples was determined by adopting the ultra-violet（UV）visible spectrophotometry.Results The standard curve equation was Y=0.01X-0.003 2（r2=0.999 4），which showed that capsaicin in the rang of 9.99-119.88 μg/mL had a good linear relation with absorbance.RSD values of precisions experiment，stability experiment，repeatability experiment and recovery experiment were less than 3.0%.The gingerol contents in fresh ginger and its processed products from high to low were in turn ginger carbon，processed ginger，dried ginger and fresh ginger.Conclusion The pharmacological efficacy change of different ginger processed products is probably due to the content change of gingerols constituents before and after processing，moreover the UV visible spectrophotometry has high accuracy and good stability，which could be applied to determine the content of gingerols in ginger samples.

Zingiber officinale； Zingiberaceae； Processed drugs； Phenols； Spectrophotometry，ultraviolet

10.3969/j.issn.1009-5519.2015.22.001

A

1009-5519（2015）22-3369-02

2015-08-02）

關(guān)于醫(yī)學(xué)論文中的志謝

本刊編輯部

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81102809）。

楊宇萍（1989-），女，廣東茂名人，在讀碩士研究生，主要從事中藥炮制及飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化的研究；E-mail：15902031877@163.com。

孟江（E-mail：jiangmeng666@126.com）。

在文后志謝是表示感謝并記錄在案的意思。對給予實(shí)質(zhì)性幫助而又不能列為作者的單位或個(gè)人應(yīng)在文后給予志謝。但必須征得被志謝人的書面同意。志謝應(yīng)避免以下傾向：（1）確實(shí)得到某些單位或個(gè)人的幫助，甚至用了他人的方法、思路、資料，但為了搶先發(fā)表，而不公開志謝和說明；（2）出于某種考慮，將應(yīng)被志謝人放在作者的位置上，混淆了作者和被志謝者的權(quán)利和義務(wù)；（3）以名人、知名專家包裝自己的論文，抬高論文的身份，將未曾參與工作的，也未閱讀過該論文的知名專家寫在志謝中。被志謝者包括：（1）對研究提供資助的單位和個(gè)人、合作單位；（2）協(xié)助完成研究工作和提供便利條件的組織和個(gè)人；（3）協(xié)助診斷和提出重要建議的人；（4）給予轉(zhuǎn)載和引用權(quán)的資料、圖片、文獻(xiàn)、研究思想和設(shè)想的所有者；（5）作出貢獻(xiàn)又不能成為作者的人，如提供技術(shù)幫助和給予財(cái)力、物力支持的人，此時(shí)應(yīng)闡明其支援的性質(zhì)；（6）其他需志謝者。