不同類型鄉(xiāng)村井水中總大腸菌群的研究

郭華　李海燕　胡偉

摘要[目的] 掌握宜賓市翠屏區(qū)農(nóng)村地區(qū)居民飲用水的水質(zhì)狀況。[方法] 用多管發(fā)酵法測定田間井水、草叢井水、果林井水、魚塘井水以及山泉井水等5類井水中的總大腸菌群含量。[結(jié)果] 5類井水中總大腸菌群含量均不能達(dá)到國家飲用水標(biāo)準(zhǔn)（≤3個(gè)/L）；每類井水中總大腸菌群的含量差距較大；井水中總大腸菌群的含量從大到小排序?yàn)椋禾镩g井水 > 魚塘井水 > 果林井水 > 草叢井水 > 山泉井水。[結(jié)論] 該研究可為翠屏區(qū)鄉(xiāng)村群眾的飲用水安全提供指導(dǎo)。

關(guān)鍵詞井水；飲用水安全；總大腸菌群

中圖分類號(hào)X172；S273.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2015）07-220-02

Study on Total Coliforms in Different Kinds of Rural Well Water

GUO Hua1， LI Hai-yan1， HU Wei2*

（1. Yibin Environmental Monitoring Center， Yibin， Sichuan 644000； 2. Cuiping Region Environmental Station of Yibin City， Yibin， Sichuan 644000）

Abstract[Objective] To obtain drinking water quality status in villeges of Cuiping District. [Method] Total coliforms in 5 kinds of rural well water， such as field wells， brushwood well， orchard well， fishpond well and mountain spring well are detected with the multiple-tube fermentation technique to master the quality situation of the residents drinking water in rural areas of Cuiping District. [Result] None of the total coliforms in five kinds of well water reach the notional drinking water standard of no more than 3 per L.Large content of total coliforms in different kinds of well water are revealed. The content of total coliforms in well water ordered from lowest to highest revealed to be： field well water > ponds well water > orchard well water > brushwood well water > spring well water. [Conclusion] The study can provide guidance for drinking water safety of villages in Cuiping District.

Key wordsWell water； Safety of drinking water； Total coliforms

近年來，國家對(duì)環(huán)保不斷加強(qiáng)重視，更加關(guān)注人民的居住、生活環(huán)境，特別對(duì)散居的鄉(xiāng)村地區(qū)的生活用水也給予了高度重視。總大腸菌群對(duì)人體健康是有害的，它是用來間接反映水體污染狀況的一個(gè)重要指標(biāo)?？偞竽c菌群是需氧及兼性厭氧的革蘭氏陰性的無芽孢桿菌，它能在37 ℃ 48 h內(nèi)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，包括埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、腸桿菌屬以及克雷伯菌屬等細(xì)菌。總大腸菌群廣泛分布于天然水體環(huán)境中，不論是地表水或地下水，甚至雨水或雪水，都可能含有總大腸菌群。未經(jīng)處理，直接飲用這樣的水會(huì)危害人們的身體健康。

當(dāng)水體受到人畜糞便、生活污水或某些工業(yè)廢水污染時(shí)，水中的總大腸菌群會(huì)大量增加。因此，水的細(xì)菌學(xué)檢測，特別是總大腸菌群的檢測，在環(huán)境質(zhì)量評(píng)價(jià)、環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)督等方面具有重大的意義，例如了解農(nóng)村居民飲用水的水質(zhì)狀況[1-2]。翠屏區(qū)位于四川盆地南緣，地勢(shì)呈南北兩翼高而中部低，總體由西向東傾斜，由于特殊的地貌地勢(shì)，境內(nèi)鄉(xiāng)村居民多為散居方式。由于集中供水成本高，境內(nèi)鄉(xiāng)村居民多取用井水作為生活用水，水中有害微生物超標(biāo)的現(xiàn)象較為普遍。鄉(xiāng)村居民常在田間、草叢中、果林中、魚塘附近以及山體低洼處等環(huán)境打井，也常忽略了井水的衛(wèi)生狀況。為了掌握該區(qū)農(nóng)村地區(qū)居民用水的水質(zhì)狀況，筆者定期測定這5類井水中的總大腸菌群含量，以期為該區(qū)鄉(xiāng)村群眾的飲用水安全提供指導(dǎo)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)儀器

冷藏柜（SC-308C型，河南新飛）、霉菌培養(yǎng)箱（MJ-250-II型，上海齊欣科學(xué)儀器有限公司）、高倍顯微鏡（DM500型，LEICA）。

1.2試驗(yàn)藥品

乳糖蛋白胨：青島高科園海博生物技術(shù)有限公司；品紅亞硫酸鈉瓊脂培養(yǎng)基：北京三藥科技開發(fā)公司。

1.3培養(yǎng)基的制備

單倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)基：將乳糖蛋白胨用蒸餾水配制成23 mg/ml濃度的溶液，然后取10 ml于試管中（內(nèi)含倒管），最后于115 ℃高壓滅菌20 min，用于總大腸菌群的培養(yǎng)。

三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)基：稱取乳糖蛋白胨用蒸餾水配制成69 mg/ml濃度的溶液，然后取5 ml于試管中（內(nèi)含倒管），最后于115 ℃高壓滅菌20 min，用于總大腸菌群的培養(yǎng)。

品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基：稱取42 g品紅亞硫酸鈉于1 L蒸餾水中，加熱溶解后于115 ℃高壓滅菌20 min，最后倒入無菌培養(yǎng)皿中待其凝固。

1.4試驗(yàn)方法

1.4.1采樣。

分別從翠屏區(qū)具有代表性的代家村、方家溝、梨子坳、蒼水巖、塘彎等5個(gè)村社各選取4個(gè)采樣點(diǎn)（記為1#、2#、3#、4#）來代表田間井水、草叢井水、果園井水、山泉井水、魚塘井水，從井中采取水樣檢測總大腸菌群。

1.4.2總大腸菌群的測定。

將水樣稀釋10倍后取10 ml加入5個(gè)裝有5 ml三倍濃縮乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的試管中（內(nèi)有倒管），再取1 ml上述稀釋后的水樣加入5個(gè)裝有10 ml單倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的試劑管中（內(nèi)有倒管），最后將上述稀釋水樣再稀釋10倍，取1 ml加入5個(gè)裝有10 ml單倍

乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的試管中（內(nèi)有倒管），將各管充分混勻，置于37 ℃恒溫箱培養(yǎng)24 h。

待培養(yǎng)24 h后，發(fā)酵試管顏色變黃為產(chǎn)酸，小玻璃倒管內(nèi)有氣泡為產(chǎn)氣。將產(chǎn)酸產(chǎn)氣及只產(chǎn)酸發(fā)酵管，分別用接種環(huán)劃線接種于品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基，置37 ℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)18～24 h，挑選符合特征的菌群，取菌落的一小部分進(jìn)行涂片、革蘭氏染色、鏡檢。若涂片鏡檢的菌落為革蘭氏陰性無芽胞的桿菌，則挑選該菌落的另一部分接種于普通濃度乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中（內(nèi)有倒管），每管可接種分離自同一初發(fā)酵管的最典型菌落1～3個(gè)，然后置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h，有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者，即證實(shí)有大腸菌群菌存在。根據(jù)證實(shí)有大腸菌群存在的陽性管（瓶）數(shù)查表得到MPN值（公式（1）），報(bào)告每升水樣中的大腸菌群數(shù)[3]。

MPN值=MPN指數(shù)×10（ml）接種量最大的一管（ml）（1）

2結(jié)果與分析

2.1田間井水中總大腸菌群含量的測定

由于水田區(qū)域水量比較充足，田間空地成為挖井較好的選址。該類型井中的井水多由田水通過泥土滲透而來，由于泥土具有吸附、遲滯作用使得水中部分總大腸菌群被土壤過濾掉。同時(shí)農(nóng)村散養(yǎng)的雞、鴨、鵝等禽畜排泄的糞便會(huì)進(jìn)入田間，另外農(nóng)業(yè)生產(chǎn)時(shí)所施的農(nóng)家肥中也含有大量的總大腸菌群。因而測定田間井水中總大腸菌群的含量是十分必要的。田間井水中總大腸菌群含量的測定結(jié)果如圖1所示。

圖1田間井水中總大腸菌群的測定結(jié)果

由圖1可知，該地區(qū)田間井水中總大腸菌群的含量差異較大，從3 100～4 900個(gè)/L，雖然低于其他地區(qū)的16 000個(gè)/L[4]，但均嚴(yán)重超過國家飲用水標(biāo)準(zhǔn)的最大值3個(gè)/L[5]。通過對(duì)該地區(qū)生活用水現(xiàn)狀的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)該地區(qū)禽畜養(yǎng)殖有一定規(guī)模，另外農(nóng)家肥施用量較大，這些對(duì)田間井水中總大腸菌群含量的超標(biāo)均有較大貢獻(xiàn)。

2.2草叢井水中總大腸菌群含量的測定

由于草叢根系比較發(fā)達(dá)，有松土作用，孔隙較多的土壤吸水作用較好，因此在草叢中挖井也是一種較好的選擇。由于衛(wèi)生意識(shí)不強(qiáng)，多數(shù)村民沒有在井口加蓋，使得落葉雜草較易掉入井里。水中的落葉雜草等生物質(zhì)腐爛后經(jīng)過一系列的生物化學(xué)作用，在適當(dāng)?shù)臏囟认?，?huì)滋生大量的總大腸菌群。草叢井水中總大腸菌群含量的測定結(jié)果如圖2所示。

圖2草叢井水中總大腸菌群的測定結(jié)果

與圖1田間井水中總大腸菌群含量的測定結(jié)果相比，可以看出草叢井水中總大腸菌群含量相對(duì)較低，總體在1 300～1 700 個(gè)/L之間，這是由于這類井水受農(nóng)業(yè)生產(chǎn)活動(dòng)影響較小，草叢對(duì)井水也具有一定的遮蔽作用。由圖2還可以看出，草叢井水中總大腸菌群含量比較均勻。

2.3果林水井中總大腸菌群的測定

果林間土壤含水量也較為豐沛，但同時(shí)受農(nóng)業(yè)生產(chǎn)活動(dòng)影響的機(jī)率也較高，例如定期給果木的施肥以及水果的腐爛，都會(huì)滋生大量的總大腸菌群。這類井水即便通過土壤的過濾，井水中的總大腸菌群含量也時(shí)常超標(biāo)。果林水井中總大腸菌群含量的測定結(jié)果如圖3所示。

圖3果林井水中總大腸菌群的測定結(jié)果

由圖3可知，果林井水中總大腸菌群含量差異不大，維持在2 100～2 600 個(gè)/L之間。由于果林中的土壤較為緊實(shí)，果木間的間距相對(duì)均勻，土壤對(duì)總大腸菌群的過濾作用不大。

2.4魚塘水井中總大腸菌群的測定

在魚塘附近選址挖井，水井離魚塘有一段距離，然而魚類養(yǎng)殖過程中會(huì)產(chǎn)生大量的廢棄物，如魚類排泄物、未被利用的青草飼料經(jīng)過一段時(shí)間后都可能帶有大量的總大腸菌群。魚塘井水中總大腸菌群的測定結(jié)果如圖4所示。

圖4魚塘水井中總大腸菌群的測定結(jié)果

由圖4可知，魚塘水井中總大腸菌群的含量在4 200～4 600個(gè)/L之間，略低于田間井水中的含量，這是由于這兩類水井所處的環(huán)境相似。

2.5山泉井水中總大腸菌群的測定

山泉井水是鄉(xiāng)村居民

生活用水最佳的選擇，這類山泉水主要從山體低洼處浸出。

山泉井水中總大腸菌群含量的測定結(jié)果如圖5所示。

圖5山泉井水中總大腸菌群的測定結(jié)果

由圖5可知，山泉井水中的總大腸菌群的含量是這5類井水中總大腸菌群含量中最低的，但仍高于500 個(gè)/L，這是因?yàn)檫@類水井大多未加蓋，雨水直接或經(jīng)土壤過濾進(jìn)入水井的過程中帶入了大量的總大腸菌群。

3結(jié)論

通過對(duì)田間井水、草叢井水、果林井水、魚塘井水以及山泉井水等5類井水中總大腸菌群進(jìn)行測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這5類井水中總大腸菌群均不能達(dá)到國家飲用水總大腸菌群標(biāo)

準(zhǔn)（≤3個(gè)/L）；每類井水中總大腸菌群的含量差距較大；這5類井水中總大腸菌群的含量按從大到小的順序排序?yàn)椋禾镩g井水>魚塘井水>果林井水>草叢井水>山泉井水。

4 建議

鄉(xiāng)村居民對(duì)生活用水的重視程度不高，因此根據(jù)現(xiàn)實(shí)條件對(duì)鄉(xiāng)村居民生活用水提出一些參考性建議：在有條件的鄉(xiāng)村采用集中供水，在沒有條件集中供水的鄉(xiāng)村，選擇遠(yuǎn)離農(nóng)業(yè)生產(chǎn)活動(dòng)的地方打井的環(huán)境，同時(shí)將井盡量挖深；取水后用干凈的水缸加蓋儲(chǔ)存，并在澄清后經(jīng)煮沸再飲用。

參考文獻(xiàn)

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