貴州省部分地區(qū)小反芻獸疫血清流行病學(xué)調(diào)查研究

王 軍， 王 琦， 楊 源， 王 想， 李 濤， 程振濤*， 張 華

(1.貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，貴州貴陽(yáng)550025； 2.貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽(yáng)550008)

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貴州省部分地區(qū)小反芻獸疫血清流行病學(xué)調(diào)查研究

王 軍1， 王 琦1， 楊 源1， 王 想1， 李 濤2， 程振濤1*， 張 華2

(1.貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，貴州貴陽(yáng)550025； 2.貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽(yáng)550008)

為了解貴州省羊群中小反芻獸疫病毒(PPRV)隱性感染情況及疫苗免疫效果，采集未免疫羊群血清樣本242份和免疫羊群血清276份進(jìn)行了羊PPRV血清抗體ELISA檢測(cè)。結(jié)果顯示，貴州省PPRV隱性感染抗體陽(yáng)性率為25.2%(61/242)，不同地區(qū)隱性感染率差異較大；在多數(shù)月份均出現(xiàn)隱性感染情況。對(duì)疫苗免疫羊群的調(diào)查顯示，PPRV疫苗整體免疫效果呈現(xiàn)較大差異，總體免疫效果不佳。研究結(jié)果表明，貴州省部分羊群存在不同程度PPRV感染威脅，且疫苗免疫效果不佳，應(yīng)加強(qiáng)綜合防控。

貴州??；羊；小反芻獸疫；血清流行病學(xué)；調(diào)查

小反芻獸疫(Peste des petits ruminants，PPR)又名羊瘟、口炎肺腸炎復(fù)合癥等，是由小反芻獸疫病毒(PPRV)引起的一種急性、烈性傳染病[1]。臨床上主要以高稽留熱，眼鼻分泌物增多，壞死性口炎，肺炎，腹瀉為主要特征[2]。該病自1942年首次在西非象牙海岸的科特迪瓦發(fā)現(xiàn)后，一直呈擴(kuò)散趨勢(shì)，目前全球有40多個(gè)國(guó)家已報(bào)告發(fā)生該疫情[3]。OIE將該病列為法定報(bào)告動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病[4，5]。2007年7月，我國(guó)西藏首次發(fā)生PPR[6]，引起了我國(guó)防疫部門(mén)的高度警惕。自2013年11月份起，我國(guó)多省陸續(xù)爆發(fā)小反芻獸疫疫情，包括安徽、重慶、新疆、四川等。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，共涉及易感動(dòng)物至少14 558只，其中發(fā)病動(dòng)物7 625只，死亡2 932只，撲殺、銷毀動(dòng)物15 703只[7]，給我國(guó)養(yǎng)羊業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。貴州省自2014年以來(lái)先后共有8個(gè)市(州)、 29個(gè)縣(市、區(qū))、 55個(gè)鄉(xiāng)(鎮(zhèn))相繼發(fā)生了小反芻獸疫疫情，撲殺羊數(shù)量不斷增加。為掌握貴州省羊群目前PPR隱性感染情況及疫苗免疫效果， 2014年我們采集貴州省內(nèi)不同地區(qū)羊血清樣本，檢測(cè)羊群小反芻獸疫抗體狀況，分析檢測(cè)結(jié)果，以期為貴州省羊群小反芻獸疫的防控提供預(yù)警預(yù)報(bào)信息。

1 材料與方法

1.1 血清樣本 非免疫羊群血清樣本來(lái)自貴州省6個(gè)地(州、市)共計(jì)242份。免疫羊群血清樣本來(lái)自畢節(jié)市、黔東南州、黔南州、銅仁市、六盤(pán)水市5個(gè)地(州、市)共計(jì)276份。

1.2 試劑 羊小反芻獸疫病毒ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：201505)，購(gòu)自上?；鄯f生物科技有限公司。

1.3 羊小反芻獸疫血清抗體檢測(cè) 取所采集的血清樣本，參照檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行小反芻獸疫血清抗體檢測(cè)。在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔D450 nm值。試驗(yàn)成立的條件為：陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00，陰性對(duì)照平均值≤0.10。試驗(yàn)成立的條件為：陰性對(duì)照孔平均值加上0.15為臨界值。樣品D450 nm值<臨界值者，判為小反芻獸疫抗體陰性；樣品D450 nm值≥臨界值者，判為小反芻獸疫抗體陽(yáng)性。

2 結(jié)果

2.1 未免疫羊群PPRV抗體檢測(cè)結(jié)果 應(yīng)用小反芻獸疫病毒血清抗體ELISA檢測(cè)試劑盒對(duì)采集自貴州省6個(gè)市(州)未免疫小反芻獸疫疫苗的羊群血清樣本242份進(jìn)行PPRV隱性感染抗體水平檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 未免疫羊群PPRV 抗體檢測(cè)結(jié)果

由表1數(shù)據(jù)顯示， 6個(gè)地區(qū)的未免疫羊群PPRV抗體陽(yáng)性率分別為22.5%、 23.1%、 24.0%、 13.3%、 55.0%、 40.0%，抗體陽(yáng)性率平均達(dá)到25.2%(61/242)，變異系數(shù)(CV)達(dá)到51.0%。結(jié)果可見(jiàn)，貴州省6個(gè)地區(qū)羊群均存在小反芻獸疫隱性感染，但不同地區(qū)抗體陽(yáng)性率差異較大。

2.2 不同月份未免疫羊群PPRV隱性感染水平 將采集的上述血清樣本小反芻獸疫病毒血清抗體ELISA檢測(cè)結(jié)果按照3、 4、 5、 7、 8、 9月份采集時(shí)間進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 不同月份羊群小反芻獸疫隱性感染PPRV抗體水平檢測(cè)

由表2數(shù)據(jù)可見(jiàn)，隨機(jī)采集的羊群血清樣本中，除3月份采集樣本外，其他月份均存在一定程度的PPRV隱性感染。且3—5月份呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，以后趨于平穩(wěn)，這與臨床發(fā)病情況呈正相關(guān)。

2.3 PPRV疫苗免疫羊群的抗體水平 應(yīng)用小反芻獸疫病毒血清抗體ELISA檢測(cè)試劑盒采集貴州省5個(gè)地(州、市)免疫小反芻獸疫疫苗的羊群血清樣本共276份進(jìn)行PPRV血清抗體水平檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 免疫羊群PPRV 抗體檢測(cè)結(jié)果

由表3結(jié)果可見(jiàn)， 5個(gè)地區(qū)羊群小反芻獸疫疫苗免疫抗體陽(yáng)性率分別為81.3%、 34.3%、 50.0%、 23.3%、 62.5%，平均抗體陽(yáng)性率為 59.8%(165/276)，各地區(qū)免疫抗體陽(yáng)性率差異較大，但總體偏低，需要合理調(diào)整免疫程序，提高免疫水平。

3 討論

3.1 2014年以來(lái)，小反芻獸疫在我國(guó)范圍內(nèi)廣泛傳播，對(duì)山羊養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展帶來(lái)巨大危害，也給養(yǎng)殖戶造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。該病目前在貴州省仍呈現(xiàn)零星散發(fā)，這給小反芻獸疫綜合防控帶來(lái)巨大壓力，因此有必要了解我省羊群的PPR隱性帶毒和疫苗免疫效果情況，可為本病的防控提供預(yù)警預(yù)報(bào)信息，為我省PPR的防控提供指導(dǎo)。本研究采集貴州省6個(gè)地區(qū)的未免疫羊群血清樣本242份進(jìn)行了PPR隱性感染情況檢測(cè)，結(jié)果顯示隱性感染抗體陽(yáng)性率平均為25.2%(61/242)，表明我省多數(shù)地區(qū)普遍存在一定程度的PPR隱性感染情況。對(duì)所采集的血清時(shí)間進(jìn)行數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，PPR隱性感染季節(jié)性不明顯，這與張傳亮等[8]報(bào)道中所提到的小反芻獸疫全年均可發(fā)生相符；不同月份的隱性感染率存在差異， 3—5月份隱性感染抗體陽(yáng)性率呈上升趨勢(shì)，因此小反芻獸疫的防控是一個(gè)全年性的任務(wù)，必須重視。

3.2 目前，小反芻獸疫防控采取病例撲殺和疫苗免疫相結(jié)合的防控措施，疫苗免疫健康羊群防止該病發(fā)生的有效手段。由于該病在我省首次發(fā)生，疫苗免疫情況、免疫程序均不健全，迫切需要調(diào)查各地小反芻獸疫疫苗免疫效果。本研究對(duì)采集5個(gè)地區(qū)已免疫PPR疫苗的276份羊血清樣本進(jìn)行抗體檢測(cè)結(jié)果顯示， 5個(gè)地區(qū)羊群小反芻獸疫平均抗體陽(yáng)性率為59.8%(165/276)，而且不同地區(qū)免疫效果存在較大差異，疫苗免疫總體效果不甚理想。檢測(cè)結(jié)果提示，有必要對(duì)疫苗質(zhì)量、免疫量、免疫程序、免疫效果等進(jìn)行系統(tǒng)調(diào)查，做到疫苗免疫效果的確切性。調(diào)查結(jié)果可有效保障、提高小反芻獸疫疫苗免疫效果，保障山羊養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展。

[1] Balamurugan V,Singh R P,Saravanan P,et al.Development of an Indirect ELISA for the Detection of Antibodies against Peste-des-petiits-ruminants Virus in Small Ruminants[J].Vet Res Commun,2007,31(3):355～364.

[2] Kerur N, Jhala M K,Joshi. Genetic characterization of Indian peste des petits ruminants virus (PPRV) by sequencing and phylogenetic analysis of fusion protein and nucleoprotein genesegments[J].Res Vet Sci,2007,85(1):176～183.

[3] 劉永宏,曹勝波,趙麗,等.中國(guó)小反芻獸疫疫情分析[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2014,23(9): 19～26.

[4] Albina E, Kwiatek O,Minet C,et al.Peste des petits ruminants, the next eradicated animal disease[J]. Vet Microbiol,2013, 165(1～2):38～44.

[5] 信愛(ài)國(guó),楊仁標(biāo),向文彬.小反芻獸疫研究進(jìn)展[J].中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2003,25(2):152～154.

[6] 包靜月,李林,王志亮,等.一步法實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測(cè)小反芻獸疫病毒方法的建立[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫,2007,24(8): 21～23.

[7] 周偉偉,陳未,陳飛.小反芻獸疫研究進(jìn)展與疫情動(dòng)態(tài)[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2015,(2): 82～83.

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[9] 劉永宏,趙麗,曹勝波,等.小反芻獸疫在中國(guó)的流行趨勢(shì)及應(yīng)對(duì)措施[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2015,36(1):110～113.

The Seroepidemiological Survey of Peste des Petits Ruminants in Some Regions of Guizhou Province

Wang Jun1, Wang Qi1, Yang Yuan1, Wang Xiang1, Li Tao2, Cheng Zhentao1*, Zhang Hua2

(1.College of Animal Science, Guizhou University, Guiyang Guizhou 550025, China;2.Animal Disease Prevention and Control Center in Guizhou Province, Guiyang Guizhou 550008, China)

In order to get the message of PPRV inapparent infection and the effectiveness of vaccine immunization of the sheep in Guizhou province, 242 serum samples from the unimmunized sheep and 276 serum samples from the immunized sheep were detected by ELISA test. The results showed the PPRV inapparent infectioin rate of the sheep was 25.2%(61/242); There were big discrepancy in serum samples collected from different sheep cities; The PPRV inapparent infection occured in most of months. The detection results of serum antibody from immunized sheep showed that immune effects had big difference, the overall effectiveness was unsatisfactory. This study showed that PPRV infection existed in part of sheep in Guizhou province, and the PPRV vaccine was less effective, the prevention and control should be intensified.

Guizhou Province; Sheep; PPRV; Serum Epidemiology; Investigation

2015-08-17

貴州省高等學(xué)校大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目“小反芻獸疫病毒貴州流行株H基因序列分析”；貴州省科技合作計(jì)劃項(xiàng)目“黔科合LH字[2015]7674號(hào)”

王軍(1993—)，男，在讀本科，主要從事動(dòng)物醫(yī)學(xué)研究。

*通訊作者： E-mail：chengzhentao@sohu.com；1326235636@qq.com

S852.65

A

1007-1474(2015)06-0005-03