鹽酸多西環(huán)素注射液對(duì)家兔肌肉刺激性試驗(yàn)

李建林，呂華林，陸瑩梅，譚武貴

（湖南泰谷生物科技有限公司，湖南長(zhǎng)沙410205）

多西環(huán)素（Doxycycline），又名脫氧土霉素、強(qiáng)力霉素，是一種半合成的四環(huán)素類廣譜抗生素。于20世紀(jì)60年代由美國輝瑞公司研制成功，并于1967年獲得美國食品和藥品管理局（FDA）批準(zhǔn)，開始被廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)臨床。具有口服生物利用度高、組織滲透力強(qiáng)和體內(nèi)分布廣泛等特點(diǎn)，臨床上常用于防治畜禽的支原體、大腸桿菌、沙門氏菌和巴氏桿菌等感染效果顯著。因藥物的吸收與療效跟注射液在注射部位刺激性大小有關(guān)，為此文章通過健康家兔的肌肉刺激性試驗(yàn)，觀察鹽酸多西環(huán)素注射液肌肉注射的刺激性反應(yīng)，為其配方優(yōu)化和用藥安全提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)藥品：鹽酸多西環(huán)素注射液（湖南泰谷生物科技有限公司自制，規(guī)格10mL:1g，批號(hào)14030901），氯化鈉注射液（湖南某制藥有限公司，規(guī)格100mL:0.9g，批號(hào)14060302）。

1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物：新西蘭健康家兔16只，購自湖南省藥物安全評(píng)價(jià)研究中心，體重2.5～3.0kg。隨機(jī)分成2組，每組8只雌雄各半并編號(hào)，編號(hào)1～8號(hào)家兔為第1組，編號(hào)9～16號(hào)家兔為第2組。按標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行飼喂。

1.2 方法

根據(jù)《化學(xué)藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求，模擬臨床給藥方案及最可能暴露毒性的給藥方法進(jìn)行試驗(yàn)。將試驗(yàn)用新西蘭健康家兔16只，固定，除毛，消毒，第1組在每只家兔左側(cè)股四頭肌按5mg/kg體重注入鹽酸多西環(huán)素注射液，右側(cè)股四頭肌按0.05mL/kg體重注入生理鹽水對(duì)照藥物。每天1次，連用3d；第2組在每只家兔左側(cè)股四頭肌按10mg/kg體重注入鹽酸多西環(huán)素注射液，右側(cè)股四頭肌按0.1mL/kg體重注入生理鹽水對(duì)照藥物，每天1次，連用3d。每天觀察動(dòng)物精神狀況、行為特征及給藥部位有無紅腫、充血等現(xiàn)象。第1、2組試驗(yàn)家兔每組于末次注射給藥后48h隨機(jī)選取4只處死，剩余家兔于末次注射給藥后14d處死，分別解剖取出股四頭肌，肉眼觀察注射部位肌肉組織的變化，在進(jìn)針處順肌纖維縱向切開，浸入10%中性福爾馬林液中固定，常規(guī)組織切片，鏡檢觀察肌纖維病理變化。

1.3 結(jié)果評(píng)價(jià)

計(jì)算觀察時(shí)間點(diǎn)各組受試家兔肌肉反應(yīng)積分的平均分值（計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)參見表1），按表2進(jìn)行肌肉刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià)。

表1 肌肉刺激性反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

表2 肌肉刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié)果

試驗(yàn)期間，家兔精神狀況良好，未見明顯異常。末次給藥（鹽酸多西環(huán)素注射液）后48h觸摸給藥部位無硬塊，眼觀無腫脹，顯微鏡檢可見肌肉組織輕度充血或有出血點(diǎn)，反應(yīng)分值結(jié)果見表3；末次給藥（多西環(huán)素注射液）后14d，顯微鏡檢可見肌纖維組織基本恢復(fù)正常，反應(yīng)分值結(jié)果見表4。氯化鈉注射液對(duì)照組未見明顯刺激反應(yīng)和病理變化，反應(yīng)分值均為0。

表3 家兔末次給藥后48h肌肉刺激性反應(yīng)情況

表4 家兔末次給藥后14d肌肉刺激性反應(yīng)的恢復(fù)情況

3 結(jié)論與討論

3.1 鹽酸多西環(huán)素注射液刺激性較小

根據(jù)刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)綜合計(jì)算，家兔末次肌肉注射鹽酸多西環(huán)素注射液后48h和14d平均積分值分別為1和0（在0.5～2.99范圍內(nèi)，屬輕度刺激），表明鹽酸多西環(huán)素注射液可引起輕微的肌肉刺激反應(yīng)，并于末次給藥14d后肌肉刺激會(huì)基本消失；另鹽酸多西環(huán)素注射液按5mg/kg和10mg/kg體重劑量給藥的局部刺激反應(yīng)的直徑由0.2cm擴(kuò)大到0.5cm，表明肌注刺激強(qiáng)度會(huì)隨著鹽酸多西環(huán)素注射液劑量增加相應(yīng)的加大，但均在輕度刺激范圍內(nèi)。因此，鹽酸多西環(huán)素注射液刺激性較小，可供肌肉注射，臨床肌注用藥是安全的。

3.2 鹽酸多西環(huán)素注射液試驗(yàn)評(píng)價(jià)參考標(biāo)準(zhǔn)

多西環(huán)素屬四環(huán)素類廣譜抗生素，對(duì)控制呼吸道及腸道感染有很好的療效，在早期臨床上應(yīng)用的制劑主要有可溶性粉劑和片劑，而注射劑因需加入大量的有機(jī)溶媒，局部注射時(shí)會(huì)有較大的刺激性。為確保注射用制劑臨床用藥的安全、有效，故本文結(jié)合了皮膚刺激性試驗(yàn)刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和部分參考文獻(xiàn)中評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，給出了肌肉刺激性試驗(yàn)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)和刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。最后，希望本試驗(yàn)?zāi)転楂F醫(yī)臨床安全用藥提供參考。

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