Rho激酶聯(lián)合生脈注射液對(duì)淺二度燒傷患者外周血TNF-α、IL-10、ICAM-1及CD11/CD18水平影響

向光俊，楊洪政，黃晶，彭毅志

(1.三峽大學(xué)仁和醫(yī)院 燒傷整形科，湖北 宜昌 443000;2.西南醫(yī)院 燒傷研究所，重慶 404100)

?

Rho激酶聯(lián)合生脈注射液對(duì)淺二度燒傷患者外周血TNF-α、IL-10、ICAM-1及CD11/CD18水平影響

向光俊1，楊洪政1，黃晶1，彭毅志2

(1.三峽大學(xué)仁和醫(yī)院 燒傷整形科，湖北 宜昌 443000;2.西南醫(yī)院 燒傷研究所，重慶 404100)

目的 探討Rho激酶聯(lián)合生脈注射液對(duì)淺二度燒傷患者外周血腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor alpha，TNF-α)、白細(xì)胞介素-10(interleukin-10，IL-10)、細(xì)胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)及粘附分子CD11/CD18水平的影響。方法 收集三峽大學(xué)仁和醫(yī)院收治的淺二度燒傷住院患者48例，根據(jù)用藥不同分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，每組各24例，2組患者均給予抗傷口感染、保暖、抗休克、止痛、促進(jìn)傷口愈合等對(duì)癥治療，對(duì)照組患者在此基礎(chǔ)上給予Rho激酶糖治療，實(shí)驗(yàn)組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上給予生脈注射液，連續(xù)治療2周。治療結(jié)束后，對(duì)患者血清TNF-α、IL-10、ICAM-1及CD11/CD18水平進(jìn)行比較。結(jié)果 與治療前相比，治療后2組患者的血清TNF-α、IL-10、ICAM-1、CD11/CD18水平均顯著降低(P<0.05)。治療后，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組患者的TNF-α、IL-10、ICAM-1、CD11/CD18水平較低(P<0.05)。結(jié)論 Rho激酶聯(lián)合生脈注射液能夠顯著降低淺二度燒傷患者的TNF-α、IL-10、ICAM-1以及CD11/CD18水平，對(duì)臨床有指導(dǎo)意義。

Rho激酶；生脈注射液；淺二度燒傷；腫瘤壞死因子α；白細(xì)胞介素-10；細(xì)胞間粘附分子-1；CD11/CD18

淺度燒傷一般指淺二度以下的燒傷。淺二度燒傷損傷表皮及真皮淺層，其再生能力強(qiáng)，如處理恰當(dāng)，均可達(dá)一期愈合；如處理不當(dāng)，可導(dǎo)致創(chuàng)面加深，由淺二度變?yōu)樯疃壬踔寥萚1]。由于燒傷對(duì)患者的機(jī)體會(huì)造成沖擊，患者的免疫功能會(huì)受到影響[2]。免疫系統(tǒng)是機(jī)體防御反應(yīng)中最先啟動(dòng)的屏障，免疫細(xì)胞釋放大量的促炎因子，同時(shí)釋放抗炎因子。當(dāng)燒傷發(fā)生時(shí)，機(jī)體的免疫功能發(fā)生紊亂，造成免疫功能受損，因此臨床上在治療燒傷的同時(shí)還會(huì)應(yīng)用抗生素預(yù)防感染。Rho激酶(Rho associated kinase，ROCK)是小GTP結(jié)合蛋白R(shí)hoA重要效應(yīng)分子，是參與細(xì)胞有絲分裂粘附、細(xì)胞骨架調(diào)整、肌肉細(xì)胞收縮、腫瘤細(xì)胞浸潤等一系列細(xì)胞生命現(xiàn)象的重要酶[3]。Rho激酶的表達(dá)能夠促進(jìn)炎癥反應(yīng)、血栓形成以及纖維化。細(xì)胞水平，Rho激酶介導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞收縮，促進(jìn)增殖和遷移，促進(jìn)炎細(xì)胞移動(dòng)[4]。生脈注射液是復(fù)方中藥制劑，其主要成分為人參、五味子、麥冬。其各成分相互作用，發(fā)揮調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的代謝、改善血液循環(huán)與合成等功效[5]。本研究通過觀察Rho激酶聯(lián)合生脈注射液對(duì)淺二度燒傷患者外周血TNF-α、IL-10、ICAM-1及CD11/CD18水平影響，探討Rho激酶聯(lián)合生脈注射液對(duì)對(duì)淺二度燒傷的臨床效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集三峽大學(xué)仁和醫(yī)院2014年6月～2015年3月收治的淺二度燒傷患者48例，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。其中實(shí)驗(yàn)組24例，組內(nèi)男性12例，女性12例，平均年齡(42.97±6.58)歲；對(duì)照組24例，男性11例，女性13例，平均年齡(42.53±6.61)歲。2組患者一般資料相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本院倫理協(xié)會(huì)批準(zhǔn)本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行，并全程跟蹤隨訪。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) 所有患者年齡在18～60歲之間，性別不限；傷前患者身體健康，無糖尿病、心血管疾病以及免疫相關(guān)疾病；患者無復(fù)合傷；致傷源為火焰或熱水；燒傷總面積在3%～10%；傷后24h內(nèi)入院。所有患者同意進(jìn)行實(shí)驗(yàn)措施，并簽署知情同意書。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) 排除年齡小于18歲或大于60歲的患者；排除伴有心腦血管病以及肝腎功能不全的患者；排除對(duì)生脈注射液過敏的患者；排除妊娠期及哺乳期的婦女；排除合并感染以及精神病患者；排除不愿接受實(shí)驗(yàn)措施的患者。

1.4 方法

1.4.1 治療方法：按照《燒傷防治指南》[6]，2組患者均給予抗傷口感染、保暖、抗休克、止痛、促進(jìn)傷口愈合等對(duì)癥治療。對(duì)照組患者在此基礎(chǔ)上給予Rho激酶糖治療。實(shí)驗(yàn)組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上給予生脈注射液40 mL，加入250 mL，5%葡萄糖注射液中靜脈滴注，1次/天。治療連續(xù)2周。治療期間注意患者的狀態(tài)，以及傷口愈合情況。

1.4.2 患者外周血TNF-α、IL-10水平檢測(cè)：治療前后清晨空腹取所有患者靜脈血5 mL，離心后分離血清，在-20 ℃條件下保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),嚴(yán)格按照試劑盒說明書的步驟，對(duì)患者外周血清TNF-α、IL-10水平進(jìn)行檢測(cè)。SpectraMax i3x多功能酶標(biāo)儀購于美谷分子儀器(上海)有限公司，腫瘤壞死因子(TNF-α)試劑盒、IL-10試劑盒購于上海經(jīng)科化學(xué)科技有限公司。

1.4.3 患者外周血ICAM-1水平檢測(cè)：治療前后清晨空腹取所有患者靜脈血5 mL，離心后分離血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),嚴(yán)格按照試劑盒說明書的步驟，對(duì)患者外周血清ICAM-1(4)[試劑盒購于(武漢博歐特生物科技有限公司)]水平進(jìn)行檢測(cè)。

1.4.4 患者外周血CD11/CD18水平檢測(cè)：所有患者治療前后取清晨空腹靜脈血5 mL，采用全自動(dòng)熒光免疫分析儀(江蘇基蛋生物科技股份有限公司)檢測(cè)患者外周血CD11、CD18水平，并計(jì)算其比值。

2 結(jié)果

2.1 患者一般情況比較 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組患者在男女比例，平均年齡，平均燒傷面積以及燒傷部位等方面的資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義見表1。

表1 2組患者一般情況比較Tab.1 Comparison of the baseline between two groups

2.2 治療前后患者外周血TNF-α、IL-10水平比較 與治療前相比，治療后2組患者的TNF-α、IL-10水平均顯著降低(P<0.05)。與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組治療后TNF-α、IL-10水平顯著降低(P<0.05)，見表2。

表2 患者治療前后血清TNF-α、IL-10水平比較Tab.2 Comparison of TNF-α and IL-10 between two ±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group before treatment；#P<0.05，與對(duì)照組治療后比較，compared with control group after treatment

2.3 治療前后患者外周血ICAM-1水平比較 與治療前相比，治療后2組患者的血清ICAM-1水平均顯著降低(P<0.05)。與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組治療后血清ICAM-1水平降低顯著(P<0.05)，見表3。

表3 治療前后患者ICAM-1水平比較Tab.3 Comparison of the level of ICAM-1 between two ±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group before treatment；#P<0.05，與對(duì)照組治療后比較，compared with control group after treatment

2.4 治療前后患者外周血CD11/CD18水平比較 與治療前相比，治療后2組患者的CD11/CD18水平顯著降低(P<0.05)。與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組治療后CD11/CD18水平顯著降低(P<0.05)，見表4。

表4 患者治療前后血清CD11/CD18水平比較Tab.4 Comparison of CD11/CD18 between two ±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group before treatment；#P<0.05，與對(duì)照組治療后比較，compared with control group after treatment

3 討論

隨著人們生活水平的提高，在日常生活中，燒傷有著較高的發(fā)病率，燒燙傷對(duì)人體機(jī)體的危害越來越不容忽視。燒燙傷可以引起機(jī)體組織的損傷、水腫、充血以及感染，治療不當(dāng)還會(huì)誘發(fā)多器官的感染，發(fā)生血液循環(huán)障礙，肌肉壞死等并發(fā)癥，嚴(yán)重危害了人們的身體健康和生活質(zhì)量。因此，對(duì)于燒燙傷的治療一直以來就是醫(yī)學(xué)界關(guān)注的焦點(diǎn)。

本研究表明：治療后，2組患者的TNF-α、IL-10水平均顯著下降(P<0.05)，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組患者的TNF-α、IL-10水平下降較為顯著(P<0.05)。TNF-α、IL-10是機(jī)體炎性反應(yīng)中重要的炎性反應(yīng)介質(zhì)，TNF-α能夠活化中性粒細(xì)胞，釋放彈性蛋白酶，破壞機(jī)體器官的結(jié)構(gòu)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞[7]。IL-10是由由輔助性T淋巴細(xì)胞等產(chǎn)生的細(xì)胞因子，在燒傷后能夠發(fā)揮免疫抑制作用[8]，但會(huì)抑制機(jī)體的免疫功能，造成清除病原微生物的功能明顯下降。燒傷患者2項(xiàng)指標(biāo)經(jīng)治療后顯著下降表明體內(nèi)的炎癥反應(yīng)得到抑制，促進(jìn)免疫反應(yīng)，保護(hù)自身細(xì)胞。

燒傷造成了機(jī)體免疫功能紊亂，主要表現(xiàn)為過度的炎癥反應(yīng)和低下的免疫應(yīng)答[9]，如果失于治療，細(xì)胞免疫功能會(huì)逐步發(fā)生缺陷。中性粒細(xì)胞在傷后受到激發(fā)，有利于機(jī)體的防御反應(yīng)，但同時(shí)又可加重繼發(fā)的組織損傷。ICAM-1能夠介導(dǎo)中性粒細(xì)胞的滲出與粘附作用[10]，屬于免疫球蛋白超家族的成員，能夠廣泛地表達(dá)在各種細(xì)胞的表面，與其配體FLA-l結(jié)合而發(fā)揮生理效用。本研究表明：與治療前相比，治療后2組患者的血清ICAM-1水平均顯著下降(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)組患者的血清ICAM-1水平下降較為明顯，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。ICAM-1參與機(jī)體的多項(xiàng)細(xì)胞粘附，是機(jī)體重要生理和病理過程所必不可少的物質(zhì)。ICAM-1還參與許多炎癥疾病，引起炎癥反應(yīng)。有研究表明[11]，ICAM-1表達(dá)與平滑肌細(xì)胞表型的轉(zhuǎn)變有關(guān)。燒傷發(fā)生后，血管外膜出現(xiàn)大量陽性細(xì)胞，與ICAM介導(dǎo)抗原粘附，引起T細(xì)胞的增殖反應(yīng)，并使中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞向炎癥區(qū)移動(dòng)所以ICAM-1與血管通透性和白細(xì)胞浸潤密切相關(guān)[12]。以往的研究證實(shí)，經(jīng)燒傷刺激后，血清中的ICAM-1水平顯著上升，這與本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果一致。經(jīng)治療后ICAM-1水平顯著下降，提示經(jīng)治療后，炎癥反應(yīng)趨于減弱，抑制了機(jī)體的損傷。表明ICAM-1在燒傷炎癥反應(yīng)和組織損傷中，起了關(guān)鍵的作用。

CD11/ CD18為β2-整合素家族成員，主要分布在單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等細(xì)胞中[14]。本研究表明：治療后，2組患者的CD11/CD18水平均顯著下降，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組患者的CD11/CD18水平下降較為明顯(P<0.05)。表明燒傷確實(shí)對(duì)CD11/CD18的表達(dá)有影響。有研究提示[15]，在細(xì)胞非激活狀態(tài)下，機(jī)體CD11/CD18僅有少量表達(dá)，當(dāng)細(xì)胞受到TNF-α等細(xì)胞因子的作用時(shí)，CD11/CD18表達(dá)迅速增多，細(xì)胞黏附性增強(qiáng)，大量中性粒細(xì)胞遷移趨向炎癥反應(yīng)部位，通過釋放膠原酶、組織蛋白酶等造成組織細(xì)胞損傷，血管內(nèi)皮細(xì)胞受損。本研究的實(shí)驗(yàn)措施能夠顯著降低CD11/ CD18 水平，使炎癥反應(yīng)的傷害降到最低。

本研究通過探討Rho激酶聯(lián)合生脈注射液對(duì)淺二度燒傷患者外周血TNF-α、IL-10、ICAM-1及CD11/CD18水平的影響。證實(shí)了Rho激酶聯(lián)合生脈注射液能夠顯著降低淺二度燒傷患者血清TNF-α、IL-10、ICAM-1及CD11/CD18水平，且效果良好，毒副作用小。在下一步研究中，本課題組將對(duì)本實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論進(jìn)行更加深入的探討，為本實(shí)驗(yàn)所得出的結(jié)論做出進(jìn)一步論證。

[1] 莫少田.淺二度燒傷創(chuàng)面三種處理方法的效果比較[J].哈爾濱醫(yī)藥，2009，29(5)：62.

[2] 羅成群，周建大，賀全勇，等.中藥合劑對(duì)特重度燒傷患者免疫功能的影響[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2002，22(8)：594-596.

[3] 盧春茂.Rho激酶對(duì)離體大鼠缺血再灌注損傷心臟功能的影響[D].中國醫(yī)科大學(xué)，2009.

[4] 宮麗麗，方蓮花，杜冠華.心血管疾病治療的新靶點(diǎn)——Rho激酶[J].中國藥學(xué)雜志，2008，43(1)：1-4.

[5] 張曉明.生脈注射液的藥理作用機(jī)制及臨床應(yīng)用[J].中國傷殘醫(yī)學(xué)，2014，19(8)：2813-2816.

[6] 周玲.燒傷防治指南[M]//人民衛(wèi)生出版社，2000.

[7] 陳凱.嚴(yán)重?zé)齻摱景Y患者血清TNF-α、IL-6、IL-10、PLA2的變化及器官功能損害狀況分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2014(8)：937-940.

[8] 郭丹鳳.嚴(yán)重?zé)齻笫竺庖咂鞴僦蠭CAM-1、IL-18、IL-10的變化及其意義[D].山東大學(xué)，2006.

[9] 彭代智.燒傷免疫的研究進(jìn)展[C]//中華醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷外科學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編2009.

[10] 吳弘，沈茜，郎希龍，等.細(xì)胞粘附分子在中性粒細(xì)胞介導(dǎo)的缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞損傷中的作用[J].高原醫(yī)學(xué)雜志，2001，17(3)：227-230.

[11] 魏敏，張燕，劉杰,等.嚴(yán)重?zé)齻笤缙诖笫竽I臟細(xì)胞粘附分子1和白介素6的表達(dá)[J].中國燒傷創(chuàng)瘍雜志，2006，18(1)：22-25.

[12] 陳旭林，夏照帆，韋多，等.燒傷血清激活p38絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路和核因子kB誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞血管細(xì)胞黏附分子1的表達(dá)[J].中華燒傷雜志，2005，21(6)：426-429.

[13] 方勇，陳玉林.嚴(yán)重?zé)齻颊咄庵苎掣椒肿拥淖兓捌湟饬x[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2003，83(17)：1539-1540.

[14] 李志清.CD11/CD18在中性粒細(xì)胞對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞粘附及損傷中作用[J].重慶醫(yī)學(xué)，1997，26(2)：85-88.

[15] 李志清，周一平.燒傷病人痂下水腫液對(duì)中性粒細(xì)胞膜表面CD11/CD18表達(dá)的影響[J].第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，20(3)：222-223.

(編校：王儼儼)

Effect of Rho kinase combined with Sheng Mai injection on TNF-α, IL-10, ICAM-1 and CD11/CD18 in patients with Ⅱ° superficial burn

XIANG Guan-jun1, YANG Hong-zheng1, HUANG Jing1,PENG Yi-zhi2

(1.Department of Burn and Plastic Surgery, Renhe Hospital of Three Gorges University, Yichang 443000, China; 2. Institute of Burns, Southwest Hospital, Chongqing 404100,China)

ObjectiveTo investigate effect of Rho kinase combined with Sheng Mai injection on tumor necrosis factor alpha (TNF-α), interleukin-10 (IL-10), intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and adhesion molecule CD11/CD18 in patients with Ⅱ° superficial burn.Methods48 cases patients with Ⅱ° superficial burn were collected and divided into experimental group and control group, according to different therapy, 24 cases in each group.The two groups were given symptomatic treatment such as anti-infectious, keep warm, anti-shock, pain-relieve and wound-healing treatment, the control group were given Rho kinase on the basis of symptomatic treatment, and experimental group were given Sheng Mai injection on the basis of control group, for a course of two weeks.The serum TNF-α, IL-10, ICAM-1 and CD11/CD18 levels were compared after treatment.ResultsAfter treatment, the serum TNF-α, IL-10, ICAM-1 and CD11/CD18 levels after treatment were lower than those before treatment in two groups (P<0.05).Compared with control group, the levels of TNF-α, IL-10, ICAM-1 and CD11/CD18 were lower than those of experimental group (P<0.05).ConclusionRho kinase combined with Sheng Mai injection could significantly reduce the levels of TNF-α, IL-10, ICAM-1 and CD11/CD18 in patients with Ⅱ°superficial burn.

Rho kinase; Sheng Mai injection; Ⅱ°superficial burn; tumor necrosis factor alpha; interleukin-10; intercellular adhesion molecule-1; CD11/CD18

軍隊(duì)“十二五”重點(diǎn)項(xiàng)目(BWS11J039)

向光俊，男，本科，副主任醫(yī)師，研究方向：燒傷整形及醫(yī)學(xué)美容外科，E-mail：junyixgj@sina.com。

R62

A

1005-1678(2015)07-0057-03