阿德福韋酯片聯(lián)合聚乙二醇干擾素對(duì)乙型肝炎患者血清Th1/Th2型細(xì)胞因子及IgM與IgG抗體影響研究

劉建濤，張旭

(遷安市傳染病醫(yī)院 肝內(nèi)科，河北 唐山 064400)

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阿德福韋酯片聯(lián)合聚乙二醇干擾素對(duì)乙型肝炎患者血清Th1/Th2型細(xì)胞因子及IgM與IgG抗體影響研究

劉建濤Δ，張旭

(遷安市傳染病醫(yī)院 肝內(nèi)科，河北 唐山 064400)

目的 探討阿德福韋酯片聯(lián)合聚乙二醇干擾素對(duì)乙型肝炎患者血清Th1/Th2型細(xì)胞因子及IgM與IgG抗體的影響。方法 收集遷安市傳染病醫(yī)院收治的慢性乙型肝炎患者52例，隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，每組各26例，對(duì)照組患者單純給予阿德福韋酯片治療，實(shí)驗(yàn)組在對(duì)照組基礎(chǔ)上給予聚乙二醇干擾素治療，治療結(jié)束后，對(duì)所有患者的血清IFN-γ、IL-4、IgM及IgG水平進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果 治療后，與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組患者的血清IFN-γ水平較高 (P<0.05)；實(shí)驗(yàn)組患者的血清IL-4水平明顯較低(P<0.05)；實(shí)驗(yàn)組患者的血清IgM、IgG水平較低(P<0.05)。結(jié)論 阿德福韋酯片聯(lián)合聚乙二醇干擾素能夠顯著降低乙型肝炎患者血清IL-4、IgM及IgG水平，提高血清IFN-γ水平，扭轉(zhuǎn)Th1/Th2失衡狀態(tài)。

阿德福韋酯片；聚乙二醇干擾素；乙型肝炎；Th1/Th2型細(xì)胞因子；IgM；IgG

乙型病毒性肝炎是由于乙肝病毒感染引起的肝臟炎癥性病變以及多器官損害。本病的傳播途徑包括母嬰傳播、血液及體液傳播、醫(yī)源性傳播、性傳播和日常生活的密切接觸傳播等[1]。乙型肝炎是一種世界性疾病，資料顯示，球約20億人曾感染過乙型肝炎病毒，其中3.5～4億人為慢性乙肝病毒感染者，每年因相關(guān)疾病死亡者達(dá)120萬，而我國(guó)感染過乙肝病毒的約有7～8億人， 其中10%的感染者發(fā)展為慢性乙型肝炎，每年因HBV導(dǎo)致的肝硬化和肝癌死亡患者約30萬例[2-3]。慢性乙型肝炎具有病程長(zhǎng)、病情復(fù)雜性高、傳染性強(qiáng)、易反復(fù)、惡變率高等特點(diǎn)[4]，因此，采取合理有效的治療控制病情發(fā)展尤為重要。對(duì)于乙型肝炎，目前尚無根治方法，臨床上主要采用對(duì)癥治療及藥物抗病毒治療，通過殺滅乙肝病毒、減輕肝臟炎癥、纖維化過程，來達(dá)到控制病情發(fā)展的目的。核苷酸類似物和干擾素屬于主要的抗病毒藥物，阿德福韋酯片屬于核苷酸類似物，有研究顯示，阿德福韋酯片在治療慢性乙肝方面具有顯著效果[5]。但是，核苷酸類似物容易產(chǎn)生耐藥性，還容易使得病毒變異，所以為達(dá)到更好的治療效果，需配合其他藥物使用，干擾素是一種很好的選擇。因此，本研究通過觀察治療前后患者血清輔助性T細(xì)胞1(helper T cell 1,Th1)/輔助性T細(xì)胞2(helper T cell 2，Th2)型細(xì)胞因子及免疫球蛋白M(immunoglobulin M，IgM)與免疫球蛋白G(immunoglobulin G，IgG)抗體的變化，探討阿德福韋酯片聯(lián)合聚乙二醇干擾素對(duì)乙型肝炎患者的影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集遷安市傳染病醫(yī)院肝內(nèi)科2014年3月～2015年3月的確診為慢性乙型肝炎的患者52例。其中男性34例；女性18例。平均病程(9.7±2.1)年。診斷標(biāo)準(zhǔn)：診斷依據(jù)根據(jù)《2015年世界衛(wèi)生組織慢性乙型肝炎病毒感染預(yù)防、關(guān)懷和治療指南》關(guān)于慢性乙型肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，實(shí)驗(yàn)室檢查HbsAg(+)、HbeAb(+)，HBV-DNA≥1.0×105拷貝/mL；本研究患者知情同意，獲本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并肝硬化失代償、自身免疫性肝炎等；②近3個(gè)月內(nèi)使用任何劑量或類型的糖皮質(zhì)激素、抗生素、免疫抑制劑等對(duì)免疫功能有影響的藥物；③合并惡性腫瘤；④合并嚴(yán)重的心腦血管疾病、肝、腎功能異常等；⑤妊娠及哺乳期婦女；⑥對(duì)研究中所涉及藥物過敏。

1.2 方法

1.2.1 治療及分組方法：所有患者隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，各26例患者，對(duì)照組男性17例，女性9例，年齡16～69歲，平均年齡(37.8±8.4)歲，病程4～15年，平均病程(9.4±2.0)年；實(shí)驗(yàn)組男性17例，女性9例，年齡17～70歲，平均年齡(38.1±8.5)歲，病程4～16年，平均病程(9.9±1.6)年。2組患者的性別組成、年齡分布等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)照組患者給予阿德福韋酯片(江蘇天士力帝益藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20080365)10 mg，1次/天口服；實(shí)驗(yàn)組患者在對(duì)照組治療的基礎(chǔ)上給予聚乙二醇干擾素α-2a注射液(商品名：派羅欣，瑞士 Roche Pharma (Schweiz) Ltd.，S20120047)1.0 mg/kg皮下注射，1次/周。2組患者均治療24周。

1.2.2 血清指標(biāo)采集：治療前后，所有研究對(duì)象均采集空腹12小時(shí)后靜脈血5 mL，然后通過離心機(jī)分離血清，采用普朗DNM-9606酶標(biāo)分析儀，檢測(cè)波長(zhǎng)：450 nm，通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定血清中干擾素-γ(interferon-γ，IFN-γ)、白細(xì)胞介素-4(interleukin-4，IL-4)水平，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作(試劑盒均購(gòu)于上海廣銳生物科技有限公司)；采用全自動(dòng)生化分析儀(OLYMPUSAU5400)，通過免疫比濁法檢測(cè)血清中免疫球蛋白M(IgM)及免疫球蛋白G(IgG)水平。

2 結(jié)果

2.1 治療前后2組患者血清IFN-γ、IL-4水平水平比較 治療后2組患者的血清IFN-γ水平與治療前比較均明顯升高，與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組患者的血清IFN-γ水平明顯升高(P<0.05)。治療后實(shí)驗(yàn)組患者的血清IL-4水平與治療前比較明顯降低，與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組患者的血清IL-4水平明顯較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者IFN-γ、IL-4水平比較Tab.

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對(duì)照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.2 治療前后2組患者血清IgM、IgG水平比較 治療后實(shí)驗(yàn)組患者的血清IgM、IgG水平與治療前比較明顯降低，與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組患者的血清IgM、IgG水平明顯降低(P<0.05)。見表2。

表2 2組患者IgM、IgG水平比較Tab.2 Comparison of level of IgM, IgG in serum between two ±s，g/L)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對(duì)照組治療后比較，compared with control group post-treatment

3 討論

近年來，隨著我國(guó)對(duì)于乙肝疫苗接種的不斷普及，雖然乙型肝炎的發(fā)病率在一定程度上得到控制，但仍處于較高水平，給患者帶來很大的痛苦。慢性乙肝表現(xiàn)為全身乏力、食欲不振、惡心等消化道表現(xiàn)，嚴(yán)重者出現(xiàn)黃疸、肝區(qū)疼痛、肝脾腫大，最終引發(fā)肝源性糖尿病、脂肪肝、肝炎后高膽紅素血癥、肝硬化等并發(fā)癥的出現(xiàn)，危及生命?？共《臼桥R床上治療慢性乙肝最主要的治療方式，目前國(guó)際公認(rèn)有效的抗乙肝病毒藥物主要包括干擾素類和核苷(酸)類似物2大類[7]。阿德福韋酯屬單磷酸腺苷磷酸核苷酸類似物，是阿德福韋的前藥[8]，能夠與脫氧腺苷三磷酸競(jìng)爭(zhēng)性的整合到病毒DNA上，引起DNA鏈延長(zhǎng)終止，從而發(fā)揮抗病毒作用。聚乙二醇干擾素是重組人干擾素α-2b與單甲氧基聚乙二醇的結(jié)合物，能夠與細(xì)胞表面特異性細(xì)胞膜受體結(jié)合，誘導(dǎo)相關(guān)酶的表達(dá)，抑制細(xì)胞內(nèi)的病毒復(fù)制、病毒感染細(xì)胞的增殖，同時(shí)促進(jìn)巨噬細(xì)胞對(duì)于病毒的吞噬作用，發(fā)揮抗病毒和防止病毒傳播的功能。但是，阿德福韋酯單獨(dú)使用容易產(chǎn)生耐藥性且易復(fù)發(fā)，干擾素單獨(dú)使用的副作用較大。有研究顯示，聚乙二醇干擾素α-2a與阿德福韋酯聯(lián)合治療慢性乙型肝炎的臨床療效顯著[9]。所以，在本實(shí)驗(yàn)中，通過對(duì)患者治療前后血清IFN-γ、IL-4、IgM及IgG水平的研究分析，來探索阿德福韋酯片聯(lián)合聚乙二醇干擾素治療乙型肝炎患者的效果和作用機(jī)理。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組患者的血清IFN-γ水平與對(duì)照組比較明顯升高(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)組患者的血清IL-4水與對(duì)照組比較平明顯較低(P<0.05)，證實(shí)了阿德福韋酯片聯(lián)合聚乙二醇干擾素能夠促進(jìn)Th1相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)，抑制Th2相關(guān)細(xì)胞因的表達(dá)，扭轉(zhuǎn)Th1/ Th2失衡狀態(tài)，增強(qiáng)機(jī)體抗病毒的能力。輔助性T細(xì)胞是機(jī)體機(jī)體的特異性免疫和非特異性免疫的重要部分，分為Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞2種類型。Th1和Th2產(chǎn)生不同的具有相互作用的細(xì)胞因子，正常情況下，Th1/Th2的動(dòng)態(tài)平衡維持機(jī)體正常的免疫功能，而受到抗原刺激時(shí)，會(huì)出現(xiàn)Th1/Th2飄移現(xiàn)象，即Th1和Th2細(xì)胞中某一亞群功能升高，另一亞群功能降低[10]。IFN-γ由Th1分泌，能夠增強(qiáng)NK細(xì)胞對(duì)于病毒的殺傷作用，促進(jìn)細(xì)胞免疫；而IL-4主要由Th2分泌，能夠促進(jìn)B淋巴細(xì)胞釋放免疫球蛋白，增強(qiáng)體液免疫。曾有報(bào)道認(rèn)為，Th1型細(xì)胞因子水平升高，Th2型細(xì)胞因子水平下降，機(jī)體的免疫反應(yīng)以細(xì)胞免疫為主，利于乙肝病毒的清除[11]。

IgM和IgG是免疫球蛋白的2種類型，屬于免疫活性分子的一類，當(dāng)機(jī)體受到細(xì)菌、病毒等抗原刺激時(shí)，免疫球蛋白的合成水平明顯增加。IgM是初次體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體，而IgG是血清主要的抗體成分，能夠抗菌、抗病毒，在機(jī)體免疫中起保護(hù)作用。有研究表明，慢性乙型肝炎患者的血清免疫球蛋白水平與患者的病情發(fā)展程度具有一定的正相關(guān)[12]。本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組患者的血清IgM、IgG水平與對(duì)照組比較明顯降低(P<0.05)，表明阿德福韋酯片聯(lián)合聚乙二醇干擾素能夠降低血清IgM、IgG水平，減輕肝細(xì)胞損傷，改善患者預(yù)后。

本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ、IL-4、IgM及IgG水平的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，證實(shí)了阿德福韋酯片聯(lián)合聚乙二醇干擾素能夠顯著降低乙型肝炎患者血清IL-4、IgM及IgG水平，提高血清IFN-γ水平，扭轉(zhuǎn)Th1/Th2失衡狀態(tài)，改善預(yù)后，對(duì)臨床有指導(dǎo)意義，下一步研究將進(jìn)行分子機(jī)制方面研究，為本實(shí)驗(yàn)所反映的現(xiàn)象做出進(jìn)一步論證和分析。

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(編校：譚玲)

Effect of adefovir dipivoxil combined with pegylated interferon on serum Th1/Th2 type cytokines and IgM and IgG antibodies in patients with hepatitis B

LIU Jian-taoΔ, ZHANG Xu

(Department of Internal Medicine Liver, Qian’an Infectious Disease Hospital, Tangshan 064400, China)

ObjectiveTo analyse effect of adefovir dipivoxil combined with pegylated interferon on serum Th1/Th2 type cytokines and IgM and IgG antibodies in patients with hepatitis B.Methods52 patients who were diagnosed with chronic hepatitis B in Qian’an Infectious Disease Hospital were collected. All patients were randomly divided into experimental group and control group,26 cases in each group. Patients in control group received treatment with adefovir dipivoxil, patients in experimental group were given pegylated interferon treatment on the basis of control group treatment, after treatment, the serum levels of IFN-γ,IL-4,IgM and IgG were detected in all patients.ResultsAfter treatment, compared with control group, the serum level of IFN-γ was higher in experimental group(P<0.05); the serum level of IL-4 was lower in experimental group(P<0.05); the serum level of IgM and IgG were lower in experimental group(P<0.05).ConclusionAdefovir dipivoxil combined with pegylated interferon can significantly reduce the serum levels of IL-4,IgM and IgG, and improve the serum level of IFN-γ in patients with hepatitis B, reverse Th1/Th2 imbalance.

adefovir dipivoxil; pegylated interferon; hepatitis B; Th1/Th2 type cytokines; IgM; IgG

河北省2014年度醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題計(jì)劃(ZD20140127)

劉建濤，通信作者，男，本科，主治醫(yī)師，研究方向：慢性乙型肝炎的抗病毒治療、重癥肝炎的搶救治療，E-mail：hebeiliujtao@163.com。

R512.6

A

1005-1678(2015)12-0073-03