替比夫定輔助治療對(duì)乙型肝炎肝硬化患者血清IL-18、IL-12、IL-37及TNF-α水平的影響

劉建濤，張旭

(遷安市傳染病醫(yī)院 肝內(nèi)科，河北 唐山 064400)

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替比夫定輔助治療對(duì)乙型肝炎肝硬化患者血清IL-18、IL-12、IL-37及TNF-α水平的影響

劉建濤Δ，張旭

(遷安市傳染病醫(yī)院 肝內(nèi)科，河北 唐山 064400)

目的 探究替比夫定輔助治療對(duì)乙型肝炎肝硬化患者血清白介素-18(interleukin-18，IL-18)、IL-12、IL-37及腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)水平影響。方法 收集2013年10月～2015年6月遷安市傳染病醫(yī)院肝內(nèi)科乙型肝炎肝硬化患者66例，根據(jù)治療方法不同分為對(duì)照組和治療組，其中治療組34例，對(duì)照組32例，2組均采用臨床乙型肝炎肝硬化常規(guī)治療方案，治療組在此基礎(chǔ)上加用替比夫定輔助治療，治療結(jié)束后對(duì)比分析血清IL-18、IL-12、IL-37、TNF-α水平以及不良反應(yīng)。結(jié)果 治療后2組血清IL-18、IL-12、IL-37及TNF-α水平下降(P<0.05)。治療后與對(duì)照組相比，治療組患者血清上述指標(biāo)水平較低(P<0.05)。結(jié)論 替比夫定輔助治療乙型肝炎肝硬化具有抑制病毒復(fù)制，改善肝功能以及免疫反應(yīng)。

替比夫定；乙型肝炎肝硬化；白介素-18；白介素-12；白介素-37；腫瘤壞死因子α

世界范圍內(nèi)超過(guò)3.5億人為慢性乙肝病毒(hepatitis B virus，HBV)攜帶者，其中約25%最終發(fā)生肝硬化[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，每年死于慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)包括它的并發(fā)病者約100萬(wàn)[2]。HBV相關(guān)指標(biāo)持續(xù)陽(yáng)性，轉(zhuǎn)氨酶水平反復(fù)波動(dòng)，嗜酒等因素使乙型肝炎肝硬化的發(fā)生率逐年升高，并且增加了肝癌的發(fā)生率。肝硬化患者通過(guò)使用抗病毒藥物抑制病毒的復(fù)制以及機(jī)體免疫清除反應(yīng)，緩解病情，降低原發(fā)性肝癌的發(fā)生率，核苷類抗病毒藥物是治療的首選藥物[3]。替比夫定是新型的核苷類似物抗病毒藥物，具有強(qiáng)效抑制HBV- DNA的作用，調(diào)節(jié)免疫功能[4]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究和分析替比夫定輔助治療對(duì)乙型肝炎肝硬化患者血清白介素-18(interleukin-18，IL-18)、IL-12、IL-37及腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)水平影響，探究替比夫定輔助治療的療效。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013年10月～2015年6月遷安市傳染病醫(yī)院肝內(nèi)科乙型肝炎肝硬化患者66例， 男性43例，女性23例，年齡40～59歲，平均年齡(45.74±5.27)歲，采用隨機(jī)數(shù)字分配法分為治療組與對(duì)照組，其中治療組34例，男性22例，女性12例，年齡43～59歲，平均年齡(46.45±5.02)歲，病程3～14個(gè)月，平均(7.85±2.06)月；對(duì)照組32例，男性21例，女性11例，年齡40～56歲，平均年齡(43.85±5.35)歲，病程3～15個(gè)月，平均(7.68±2.21)月，2組患者年齡、性別、病程等一般資料相仿，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合以下條件：①診斷符合2009年制定的《AASLD慢性乙型肝炎指南》[5]中乙型肝炎肝硬化的診斷標(biāo)準(zhǔn)，具備以下臨床特點(diǎn)：代償期顯示為輕微乏力、腹脹、肝脾腫大以及輕度黃疸；失代償期出現(xiàn)全身乏力、消瘦、尿少、下肢浮腫。胃腸功能紊亂、貧血以及低蛋白血癥等；②血常規(guī)顯示血紅蛋白、血小板以及白細(xì)胞水平降低；肝功能檢測(cè)顯示血清白蛋白降低，免疫球蛋白升高；病原學(xué)檢查HBV-M陽(yáng)性；③X線顯示食管-胃底靜脈出現(xiàn)蚯蚓樣靜脈曲張；CT檢查肝臟各葉比例失常，肝門增寬變大，腹腔積液?；颊呔鶠樽栽竻⑴c本實(shí)驗(yàn)，并簽署知情協(xié)議書(shū)。本研究獲得遷安市傳染病醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠期或哺乳期婦女，近期接受化療藥物、免疫抑制劑或肝毒性藥物，藥物過(guò)敏史，合并其他肝臟疾??；②嚴(yán)重心、腎等多臟器功能障礙或衰竭；③糖尿病、惡性腫瘤、癲癇等神經(jīng)系統(tǒng)疾病，肝外阻塞性黃疸；④年齡小于18歲或大于65歲。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：患者進(jìn)行常規(guī)保肝、對(duì)癥治療以及治療并發(fā)癥，采用注射用還原型谷胱甘肽(意大利 Biomedica Foscama Industria Chimico Farmaceutica S.p.A.，注冊(cè)證號(hào)：H20100204)1.8 g溶于250 mL 0.9%氯化鈉溶液中，靜脈滴注；肝水解肽注射液(吉林敖東洮南藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H22025669)20 mg，溶于100 mL 0.9%氯化鈉溶液中，靜脈滴注；維生素K1注射液(國(guó)藥集團(tuán)容生制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20043401)10 mg，溶于100 mL 0.9%氯化鈉溶液中，靜脈滴注。治療組患者在此基礎(chǔ)上給予替比夫定片(北京諾華制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20070028)600 mg口服，1次/天，中重度腎臟功能不全者或進(jìn)行血液透析患者減少用量。7 d為1個(gè)周期，治療2個(gè)周期。

1.2.2 血清IL-18、IL-12和IL-37水平檢測(cè)：患者于治療前后，采空腹靜脈血5 mL，置于3500 r/min離心20 min，-20 ℃冰柜內(nèi)冷凍保存，檢驗(yàn)前取出置于室溫內(nèi)30 min解凍，采用長(zhǎng)春博特生物技術(shù)有限公司的試劑盒，以ELISA法在CLARIOstar多功能酶標(biāo)儀(香港伯齊科技有限公司)上進(jìn)行 IL-18、IL-12和IL-37檢測(cè)。

1.2.3 血清TNF-α水平檢測(cè)：患者于治療前后，空腹抽血，分離血清，采取雙單克隆抗體夾心法測(cè)定TNF-α水平，試劑盒購(gòu)買于武漢博士的生物技術(shù)有限公司。

2 結(jié)果

2.1 2組患者血清IL-8、IL-12及IL-37水平比較 治療前2組血清IL-8、IL-12及IL-37水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療后2組IL-18、IL-12及IL-37水平下降(P<0.05)，與對(duì)照組相比，治療組IL-18、IL-12及IL-37水平較低(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 2組患者血清IL-12、IL-18及IL-37水平比較Tab.1 Comparison of serum IL-8，IL-12 and IL-37 levels between

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對(duì)照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.2 2組血清TNF-α水平比較 治療前2組血清TNF-α水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療后2組TNF-α水平下降(P<0.05)，與對(duì)照組相比，治療組TNF-α水平較低(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 2組患者血清TNF-α水平比較Tab.2 Comparison of serum TNF-α levels between two groups(±s，μg/L)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對(duì)照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.3 2組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 對(duì)照組患者出現(xiàn)惡心2例、頭疼2例、氣脹及消化不良3例、腹痛7例，治療組出現(xiàn)惡心1例、頭疼1例、氣脹及消化不良1例，治療組總不良反應(yīng)率8.82%(3例)顯著低于對(duì)照組的43.75%(14例)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10.52，P<0.05)。

3 討論

乙型肝炎病毒是一個(gè)嚴(yán)重的世界公共衛(wèi)生問(wèn)題，研究顯示全球約20億HBV感染者，每年約有100萬(wàn)人死于肝炎病毒感染所致的肝硬化[6]。肝硬化晚期出現(xiàn)肝臟功能損害以及門靜脈高壓，表現(xiàn)為多器官受累，導(dǎo)致上消化道出血、繼發(fā)感染、腹水以及脾功能亢進(jìn)等并發(fā)癥。在細(xì)胞激酶刺激下替比夫定被磷酸化為活性產(chǎn)物腺苷，通過(guò)HBV天然底物胸腺嘧啶的競(jìng)爭(zhēng)作用，從而抑制HBV-DNA多聚酶，終止乙肝病毒DNA鏈延長(zhǎng)，阻止乙肝病毒的復(fù)制[7]。臨床應(yīng)用替比夫定治療乙型肝炎病毒復(fù)制并伴有血清氨基轉(zhuǎn)移酶升高或者肝臟組織病變肝功能代償?shù)燃膊〉某赡曷砸倚透窝谆颊摺?/p>

IL-18產(chǎn)生于巨噬細(xì)胞、枯否氏細(xì)胞以及上皮細(xì)胞的活化作用，具有誘導(dǎo)免疫細(xì)胞分泌γ干擾素(interferon-γ，IFN-γ)，刺激NK 細(xì)胞以及T細(xì)胞的增殖分化，使淋巴細(xì)胞毒性作用增加，刺激Th細(xì)胞分泌IFN-γ、IL-2以及粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor，GM-CSF)等，黏附因子以及FasL表達(dá)作用增強(qiáng)，借助FasL依賴性肝細(xì)胞凋亡模式，最終造成肝臟受損。IL-12是具有與IL-18相同抗病毒感染作用的細(xì)胞因子[8]，有利于機(jī)體病毒清理，發(fā)生持續(xù)的炎癥反應(yīng)。IL-12和IL-18協(xié)同作用，共同誘導(dǎo)CD4+T分化為Th1細(xì)胞，發(fā)揮特異性免疫反應(yīng)，清除病毒并攻擊表面HBV抗原，損傷肝細(xì)胞。研究顯示，乙型肝炎肝硬化患者IL-12和IL-18水平較健康人明顯增高[9]，具有檢測(cè)疾病發(fā)展以及病毒復(fù)制狀態(tài)的應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，替比夫定輔助治療組IL-18、IL-12水平降低顯著(P<0.05)，證實(shí)了替比夫定具有抑制病毒復(fù)制，緩解病情的作用。

IL-37是人體外周血單核細(xì)胞細(xì)胞因子，由血漿單核細(xì)胞以及肺上皮細(xì)胞過(guò)度表達(dá)產(chǎn)生，其過(guò)度表達(dá)引起體內(nèi)炎癥發(fā)應(yīng)，炎癥因子表達(dá)中斷，促炎因子的表達(dá)合成量降低，其表達(dá)降低樹(shù)突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、CD4+T、CD8+T、CD19+B等細(xì)胞，阻止IL-1β、TNF-α等促炎細(xì)胞因子分泌，在病原微生物清理過(guò)程中發(fā)揮重要作用，通過(guò)負(fù)反饋機(jī)制抑制過(guò)度的免疫反應(yīng)。研究顯示，隨著肝功能損傷程度加重，IL-37水平增高[10]。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，替比夫定輔助治療組IL-37水平降低顯著(P<0.05)，證實(shí)替比夫定改善肝功能以及免疫反應(yīng)。

有研究顯示，乙型肝炎肝硬化患者TNF-α水平顯著高于健康人[11]。TNF-α是一種內(nèi)源性細(xì)胞因子，主要產(chǎn)生于單核-巨噬細(xì)胞，正常人機(jī)體內(nèi)TNF-α具有調(diào)節(jié)免疫調(diào)節(jié)、抗感染以及抗腫瘤的作用，過(guò)度分泌導(dǎo)致膿毒敗血癥、感染性休克以及多器官功能衰竭等癥狀的發(fā)生。乙型肝炎肝硬化患者機(jī)體內(nèi)，TNF-α屬于細(xì)胞因子介導(dǎo)，對(duì)肝細(xì)胞造成損害。研究顯示，與對(duì)照組相比，替比夫定輔助治療TNF-α水平降低顯著(P<0.05)，證實(shí)替比夫定阻止肝臟受損，改善病情。

替比夫定臨床常見(jiàn)不良反應(yīng)為虛弱、頭痛、惡心、腹瀉以及消化不良等，均為可逆[12]。本研究顯示，與對(duì)照組相比，替比夫定輔助治療組臨床不良反應(yīng)發(fā)生率較低(P<0.05)。研究證實(shí)替比夫定不良反應(yīng)發(fā)生率低，安全性高。

本研究通過(guò)對(duì)本院乙型肝炎肝硬化患者66例的血清IL-18、IL-12、IL-37、TNF-α水平以及不良反應(yīng)進(jìn)行研究，證實(shí)了替比夫定輔助治療乙型肝炎肝硬化具有抑制病毒復(fù)制，改善肝功能以及免疫反應(yīng)，緩解病情的作用，藥物毒副作用小，適宜臨床推廣。在下一步研究中，本課題組將進(jìn)行生物分子學(xué)研究，對(duì)本實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)的現(xiàn)象做進(jìn)一步研究。

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(編校：王儼儼)

Effect of telbivudine on serum IL-18,IL-12, IL-37 and TNF-α levels in patients with HBV-related hepatocirrhosis

LIU Jian-taoΔ, ZHANG Xu

(Department of Hepatopathy, Qian’an Infectious Disease Hospital, Tangshan 064400)

ObjectiveTo explore the effect of telbivudine on serum interleukin-18(IL-18),IL-12, IL-37 and tumor necrosis factor α(TNF-α) levels in patients with HBV-related hepatocirrhosis.Methods66 cases of patients with HBV-related hepatocirrhosis were collected and divided into treatment group and control group according to the different treatment method, 34 cases in control group were treated with routine treatment, 32 cases in treatment group were treated by telbivudine on the basis of routine treatment. The serum IL-18, IL-12, IL-37, TNF-α levels and adverse reactions were compared post-treatment.ResultsCompared with control group, the levels of IL-18, IL-12, IL-37 and TNF-α decreased significantly post-treatment(P<0.05). The above levels were significantly lower in treatment group post-treatment than that in control group(P<0.05).ConclusionTelbivudine adjuvant therapy could suppress viral replication, and improve liver function and immune response in patients with HBV-related hepatocirrhosis.

telbivudine; HBV-related hepatocirrhosis; interleukin-18; interleukin-12； interleukin-37; tumor necrosis factor α

劉建濤，通信作者，男，本科，主治醫(yī)師，研究方向：慢性乙型肝炎的抗病毒治療、重癥肝炎的搶救治療，E-mail：13933394586@139.com。

R575.2

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1005-1678(2015)11-0130-03