HPLC法測定百癬夏塔熱片浸膏中沒食子酸的含量

王靜 陳秀娟 李彩霞 劉丹 謝飛

摘 要：目的 建立用HPLC法測定百癬夏塔熱片浸膏中沒食子酸含量的方法。方法 色譜柱為Eclipse plus C18（5um，4.6×250mm），流動相為甲醇-0.1%磷酸（6：94），流速1.000ml/min，檢測波長270nm，柱溫30℃。結(jié)果 沒食子酸在10.55～84.40ug/ml間呈良好的線性關(guān)系，r= 0.9996，平均回收率99.72%，RSD=1.64%。結(jié)論 該方法可用于百癬夏塔熱片浸膏沒食子酸含量的測定和質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：百癬夏塔熱片；浸膏；HPLC；沒食子酸

百癬夏塔熱片收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》維吾爾藥分冊， 由蘆薈 、地錦草、西青果、訶子肉、毛訶子肉、司卡摩尼亞脂等制成。具有清除異常粘液質(zhì)、膽液質(zhì)及敗血，消腫止癢的功能。用于治療手癬、體癬、足癬、花斑癬、銀屑病、過敏性皮炎、帶狀皰疹、痤瘡等[1]?，F(xiàn)執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)為國家食品藥品監(jiān)督管理局（試行）YBZ03372004，標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定成品的沒食子酸（C7H4O5）不得少于1.8mg/片（0.4g）[2]，為保證其成品的沒食子酸含量合格，我們采用 HPLC法[3]測定其浸膏的沒食子酸含量，以便更好的控制百癬夏塔熱片的質(zhì)量。

1 儀器和試劑

1.1主要儀器：AL104電子天平，BT125D電子天平，LC-10ATVP 液相色譜儀，KQ2200DB型數(shù)控超聲波清洗器。

1.2試劑：色譜純甲醇、分析純磷酸、沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品（購自中國藥品生物制品檢定所，批號110831-200302）、超純水。

1.3試藥：百癬浸膏，批號：140316、140934、140935、1401110， 由新疆銀朵蘭維藥股份有限公司提取車間提供。

2 實驗方法

2.1色譜條件：色譜柱為Eclipse plus C18（5um，4.6×250mm），流動相為甲醇-0.1%磷酸（6：94），流速1.0ml/min，檢測波長270nm，柱溫30℃。進(jìn)樣量10ul。

2.2對照品溶液的制備：精密稱取沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品0.10550g，加甲醇定容至100ml容量瓶，的濃度為105.50 ug/ml的沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品母液。

2.3供試品溶液的制備：取約0.7g百癬浸膏置于100ml的三角瓶內(nèi)，精確稱定，加甲醇約60ml，用玻璃棒將浸膏攪散，超聲處理30min，溶液轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶內(nèi)，加甲醇定容至刻度，搖勻，濾過，1ml移液管精密量取濾液1ml，置10ml的容量瓶內(nèi)，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾器過濾，即得。

2.4線性關(guān)系的考察：移液管分別精密吸取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0ml沒食子酸母液于10ml的容量瓶內(nèi)，加流動相稀釋至刻度，搖勻，分別得到濃度為10.550ug/ml、21.100ug/ml、42.200ug/ml、63.300ug/ml、84.400ug/ml的沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液，過濾，依次進(jìn)樣各10μl注入液相色譜儀，按2.1項下色譜條件，以沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：y = 18114x + 3300，r=0.9996結(jié)果表明沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品在10.55～84.40ug/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5精密度實驗：精密吸取上述沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液（濃度21.100ug/ml）10ul，各連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄沒食子酸峰面積積分值，結(jié)果RSD=0.93%，表明儀器精密度良好。

2.6穩(wěn)定性實驗：取同一批供試品（批號：140316），按照2.3供試品溶液的配制方法配置，室溫放置。分別在0，2，6，24小時測定沒食子酸峰面積。結(jié)果百癬浸膏樣品沒食子酸峰面積積分RSD=1.28%，表明本方法24小時內(nèi)供試品溶液穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性實驗：取同一批浸膏（批號：140316）的供試品6份，按照2.3供試品溶液的配制方法配置，計算沒食子酸含量及RSD值。結(jié)果RSD=0.76%，說明測定的方法重復(fù)性較好。

2.8 加樣回收實驗：取已準(zhǔn)確測定的百癬浸膏（批號：140316）約0.35g，共9份，精密稱定，置于100ml具塞三角瓶，分別精密加入沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量。按照上述2.3供試品溶液的配制方法處理，計算加樣回收率。結(jié)果下表1。結(jié)果表明，高、中、低3個質(zhì)量濃度的加樣回收率為99.72%，RSD=1.64%（n=9）。

2.9樣品測定：取3批百癬浸膏，按照2.3供試品溶液的配制方法配置，測定沒食子酸含量，各批次浸膏中沒食子酸含量分別為41.10 mg/g、42.58 mg/g、39.85 mg/g（n=3）。

3 討論

本試驗采用HPLC法測定百癬夏塔熱片浸膏中沒食子酸含量，色譜峰之間能有效的分離，精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性較好，回收率符合規(guī)定，可以作為檢測百癬夏塔熱片浸膏中沒食子酸含量的檢測標(biāo)準(zhǔn)。

參考文獻(xiàn)

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)：維吾爾藥分冊[J].烏魯木齊：新疆科技衛(wèi)生出版社，1998，：124.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國 藥典2010年版[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄29.

[3]國家食品藥品監(jiān)督管理局.標(biāo)準(zhǔn)（試行）YBZ03372004[S].2004.