電化學指紋圖譜法測定復方中藥祛痘軟膏劑含量①

祁永華，吳 迪，劉 麗，張 玲，方 丹，彭玉生，李守君

(1.佳木斯大學藥學院，黑龍江 佳木斯 154007；2.黑龍江中醫(yī)藥大學佳木斯學院，黑龍江 佳木斯 154007)

電化學指紋圖譜法測定復方中藥祛痘軟膏劑含量①

祁永華1,2，吳 迪2，劉 麗1，張 玲1，方 丹1，彭玉生1，李守君1

(1.佳木斯大學藥學院，黑龍江 佳木斯 154007；2.黑龍江中醫(yī)藥大學佳木斯學院，黑龍江 佳木斯 154007)

目的：建立一種應用電化學指紋圖譜技術測定復方中藥祛痘軟膏劑含量的方法。方法：采用電化學指紋圖譜技術，以誘導時間為評價指標，對復方中藥祛痘軟膏劑含量進行測定。結果：中藥浸膏粉檢測范圍6～34mg/mL，回歸方程：t=6898-183.5c，R=0.9970，日內RSD為1.07%，日間RSD為1.68%，加樣回收率RSD<1%，三批樣品含量(相當標示量)在98.6%～101.4%，符合要求。結論：通過方法學考察，建立一種有效、便捷、可靠、準確地評價中藥軟膏劑的方法。

電化學指紋圖譜；復方中藥祛痘軟膏；苦參；黃芩；蘆薈

復方中藥祛痘軟膏劑是由苦參、黃芩和蘆薈三種中藥按等比例混合所得浸膏粉，與基質制備成O/W型軟膏劑?；|成分主要為有機物，與主藥分離困難，測量時會產生干擾，很難準確測定含量，因此，為測得軟膏劑準確含量，不得不研究主藥與基質的分離方法，費時且專業(yè)技術要求高，增加了軟膏劑分析的難度[1～3]。電化學指紋圖譜在中藥領域被廣泛應用，是一種方便快捷鑒別中藥的方法[4,5]。李守君等人采用電化學指紋圖譜技術優(yōu)化大黃提取工藝及鑒別黃連真?zhèn)蝃6,7]，張海珍等人采用電化學指紋圖譜(Electrochemicalfingerprint)技術測定蜂蜜中糖含量[8]。本文利用中藥活性成分參與電化學振蕩反應而軟膏劑基質不參與這種反應這一原理，對復方中藥祛痘軟膏劑浸膏粉含量進行測定。該方法不需要分離主藥和基質[9]，操作簡便,結果準確,為中藥軟膏劑質量檢測研究開拓新思路。

1 材料

數控超級恒溫器(SC-15型，寧波海曙天恒儀器廠)；電化學工作站(LK2005型，天津蘭力克科技有限公司)；電子天平(BP211D，德國Sartorius)；硫酸、硫酸錳、丙酮、溴酸鉀均為分析純，水均為二次蒸餾水；苦參、黃芩、蘆薈購于藥材市場(由黑龍江中醫(yī)藥大學陳效忠教授鑒定)。

2 方法

2.1 樣品制備

取中藥浸膏粉1.0021g，用20mL蒸餾水稀釋，置于25mL容量瓶中定容，吸取上述溶液1、2、3、4、5mL分別置于25mL容量瓶中定容，作為對照品溶液；取空白基質和復方中藥祛痘軟膏劑各5g，置于25mL容量瓶中定容。

2.2 電化學指紋圖譜測定方法

開啟B-Z振蕩系統(tǒng)，當溫度達到(37±0.02)℃時，依次加入硫酸溶液、硫酸錳溶液、丙酮溶液各10mL，加入待測溶液4mL，攪拌15min，加入KBrO3溶液10mL開始計時，由電化學工作站記錄電勢(E)隨時間(t)的變化，繪制指紋圖譜。

2.3 精密度考察

精密稱取濃度為70mg/g復方中藥祛痘軟膏劑10g，按2.2方法進行測量，重復測量5次，隔日同法測量5次。

2.4 加樣回收率考察

精密稱取浸膏粉和空白基質，配制成含量為50mg/g、70mg/g、90mg/g軟膏，每種軟膏精密稱取5g，按2.2方法進行測量，每個樣品平行測量3次。

2.5 復方中藥祛痘軟膏劑中藥浸膏含量測定

按照2.2方法，對三批樣品進行測量，每批樣品平行測量3次。

3 結果

3.1 標準曲線的繪制

以誘導時間為評價指標，繪制誘導時間(t)與濃度(c)的曲線，得回歸方程：t=6898-183.5c，R=0.9970，由圖1可知，不同含量復方中藥祛痘軟膏劑的誘導時間隨含量增大而減小，中藥浸膏濃度在6～34mg/mL范圍內線性相關良好。

圖1 復方中藥軟膏劑標準曲線

3.2 空白對照品與供試品的電化學指紋圖譜比較

由圖2可知，空白基質的電化學指紋圖譜在0～8000s內沒有產生振蕩波形，是一條平滑曲線，而供試樣品在5000～7000s產生振蕩圖譜，表明空白基質在軟膏劑檢測計量范圍內不產生電化學振蕩，不會對中藥軟膏劑含量測定產生影響。

圖2 空白對照品與供試品的電化學指紋圖譜比較

a.復方中藥祛痘軟膏劑；b.空白基質

3.3 精密度加樣回收率結果

日內RSD為1.07%，日間RSD為1.68%，回收率在98%～102%，均符合方法學要求。對三批樣品進行測量，每批樣品平行測量3次，由表1可知，三批樣品的含量檢測限度在98.6%～101.4%，均在90%～110%，符合藥典軟膏劑含量限度的規(guī)定，達到試驗設計要求。

表1 樣品測定結果 (n=3)

4 討論

4.1 攪拌速度對復方中藥軟膏劑電化學指紋圖譜的影響

攪拌速度主要影響反應溶液體系物質混合的均勻程度。由于軟膏劑制備時原料大多為油脂類，具有一定的黏稠性，當被加入反應溶液體系時，提高了溶液的黏度，增加溶液均勻混合的難度。因此采用電化學指紋圖譜測量軟膏劑時，攪拌速度的選擇較為重要，攪拌速度過低或過高，都會產生混合不均勻現象，獲得的指紋圖譜不理想。本實驗通過實驗測定，攪拌轉數為600r/min時，獲得指紋圖譜較理想。

4.2 電化學指紋圖譜鑒別復方中藥軟膏劑真?zhèn)蔚奶接?/p>

軟膏劑含量測定的難點在于基質的干擾，采用高效液相色譜測定時，需要選擇適當的溶媒溶解基質或主藥[1]，將主藥與基質分離。電化學指紋圖譜法在中藥應用中的特點是，在分析過程中是對中藥群集信息的研究[10]，不必分離有效部位，尤其在復方中藥分析研究時，這一特點表現出極大的優(yōu)勢。本文綜合考慮上述因素，挖掘出，電化學指紋圖譜技術具有解決上述問題的優(yōu)勢。通過對比基質、單味藥和成品指紋圖譜的區(qū)別，可以用來鑒別復方中藥軟膏劑是否含有處方藥材，從而，可建立一種鑒別復方中藥軟膏劑真?zhèn)蔚谋憬菪路椒ā?/p>

[1]葛德升,劉漣,莊衛(wèi)紅.鹽酸環(huán)丙沙星軟膏劑的含量測定及穩(wěn)定性研究[J].安徽醫(yī)藥,2004,8(3):170-172

[2]華玉鈴,賀祝英,張建玲，等.中藥軟膏劑制備方法的研究進展[J].貴陽中醫(yī)學院學報,2008,30(2):66-69

[3]游燕. 中藥軟膏劑制備及質量控制研究進展[J] . 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥, 2010,6(8):150-151

[4]陳效忠,鄒桂華,宗希明，等.電化學指紋圖譜鑒別中藥大黃、虎杖和何首烏[J].黑龍江醫(yī)藥科學,2010,33(2):45

[5]張秀莉,佟德成,李守君.中藥大黃電化學指紋圖譜的研究[J].黑龍江醫(yī)藥科學,2010,33(2):21-22

[6]沈德鳳,黃金寶,李守君，等.應用電化學指紋圖譜優(yōu)化大黃水提取工藝[J].遼寧中醫(yī)雜志,2010,37(6):1105-1107

[7]李守君,黃金寶,蘭煥，等.應用電化學指紋圖譜鑒別黃連及其偽品[J].遼寧中醫(yī)雜志,2010,37(5):902-903

[8]張海珍,肖長龍,唐愛東.采用非線性化學指紋圖譜技術測定蜂蜜中糖含量的新方法[J].福建分析測試,2012,21(4):7-12

[9]李繼睿,丁峰,禹練英，等.電化學指紋圖譜用于中藥的質量控制[J].現代儀器,2011,17(93) :77-79

[10]袁斌.電化學指紋圖譜與中藥群集信息表征[D].天津:南開大學,2007，7-8

The Determination of electrochemical fingerprint on compound Chinese medicine acne ointments content

QIYong-hua1,2,WUDi2,LIULi1,ZHANGLing1,FANGDan1,PENGYu-sheng1,LIShou-jun1

(1.College of Pharmacy of Jiamusi University,Jiamusi 154007, China;2.Heilongjiang University of Chinese Medicine Jiamusi School, Jiamusi 154007,China)

Objective: To establish a method in which an electrochemical fingerprint technology is used to determine the content of the compound medicine acne ointments. Methods: Electrochemical fingerprint technology was used to determine the acne ointment of Chinese medicine with the induction time as the evaluation index. Results: The detection range of Chinese medicine extract powder was 6～34mg/mL. The regression equation is t=6898-183.5c, R=0.9970, days’ RSD 1.07%, daytime RSD 1.68%, Recoveries RSD <1%. The content of the sample batches (The content of the equivalent amount of marked out) ranged between 98.6%～101.4%. Conclusion: By the methodological study, an effective, convenient, reliable, and accurate evaluation of Chinese medicine ointment approach is established.

electrochemical fingerprint; acne ointment of Chinese medicine; Sophora; skullcap; aloe

佳木斯大學研究生科技創(chuàng)新項目，編號：LM2014_059。

祁永華(1982～)女，寧夏固原人，在讀碩士研究生。

李守君(1962～)男，黑龍江綏化人，碩士，教授，碩士研究生導師。E-mail:lishoujun1962@163.com。

R

A

1008-0104(2015)02-0064-02

2014-12-03)