• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    3-甲基-4-硝基酚對(duì)公雞睪丸早期發(fā)育的影響

    2015-06-07 10:06:08徐偉風(fēng)樸元國(guó)李延森李春梅
    生態(tài)毒理學(xué)報(bào) 2015年4期
    關(guān)鍵詞:硝基睪酮公雞

    徐偉風(fēng),樸元國(guó),李延森,李春梅

    南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,南京 210095

    3-甲基-4-硝基酚對(duì)公雞睪丸早期發(fā)育的影響

    徐偉風(fēng),樸元國(guó),李延森,李春梅*

    南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,南京 210095

    研究環(huán)境內(nèi)分泌干擾物3-甲基-4-硝基酚(3-methyl-4-nitrophenol,PNMC)對(duì)公雞睪丸早期發(fā)育的影響。48只1 d齡白羽公雞隨機(jī)分成3個(gè)組,分別為對(duì)照組、10和100 mg·L-1PNMC處理組,連續(xù)飲水42 d。檢測(cè)公雞的生長(zhǎng)性能、睪丸重量和指數(shù)、睪丸的結(jié)構(gòu)變化、血清激素水平和睪丸中CYP17A1及其相關(guān)基因的表達(dá)情況。結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,10 mg·L-1PNMC處理組顯著降低公雞的生長(zhǎng)性能;睪丸重量和睪丸指數(shù)均無(wú)顯著性變化;睪丸細(xì)精管生精細(xì)胞均有不同程度的空泡兼或脫落;血清孕酮和雌二醇水平均無(wú)顯著性差異,睪酮水平隨飲水中PNMC濃度的升高呈遞減的趨勢(shì);公雞睪丸中CYP17A1、HSD3B2和CYP19A1有升高的趨勢(shì),HSD17B4在10 mg·L-1PNMC組呈降低的趨勢(shì),在100 mg·L-1PNMC組呈升高的趨勢(shì)。結(jié)果表明:飲水中添加10 mg·L-1PNMC顯著影響了公雞的生長(zhǎng)性能;飲水中添加100 mg·L-1PNMC引起公雞睪丸細(xì)精管生精細(xì)胞變性、壞死,造成結(jié)構(gòu)病理?yè)p傷,從而對(duì)生殖系統(tǒng)造成損傷。

    3-甲基-4-硝基酚;睪丸;公雞;生殖損傷

    環(huán)境內(nèi)分泌干擾物是一類通過(guò)干擾生物體內(nèi)調(diào)節(jié)發(fā)育過(guò)程的天然激素的合成、分泌、運(yùn)輸、結(jié)合、反應(yīng)和代謝等過(guò)程,從而對(duì)生物體生殖、神經(jīng)和免疫系統(tǒng)等功能產(chǎn)生影響的外源性化學(xué)物質(zhì)[1]。3-甲基-4-硝基酚(3-methyl-4-nirophenol,PNMC),系苯酚衍生物,是一種重要的化工原料,廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)殺蟲劑、除草劑、染料、醫(yī)藥等行業(yè),常常在生產(chǎn)和使用過(guò)程中被釋放到環(huán)境中,它們難以降解,在環(huán)境中可長(zhǎng)期殘留,對(duì)土壤、水體和大氣造成嚴(yán)重的污染,已被美國(guó)環(huán)境保護(hù)局和我國(guó)列為“優(yōu)先控制污染物”之一。最近研究發(fā)現(xiàn)柴油車尾氣中也含有PNMC,約1 kg尾氣顆粒中PNMC含量可以高達(dá)28 mg[2],而且PNMC是有機(jī)磷殺蟲劑——?dú)⒚傻乃猱a(chǎn)物[3]。環(huán)境中各種來(lái)源的PNMC可以通過(guò)呼吸道、消化道以及皮膚等途徑進(jìn)入機(jī)體內(nèi)部,嚴(yán)重威脅著人類及動(dòng)物的健康。我們的前期研究發(fā)現(xiàn)PNMC具有雌激素和抗雄激素的作用[4-5],能夠引起精囊、前列腺以及陰莖頭重量顯著降低,擾亂雄性大鼠腎上腺皮質(zhì)類固醇激素的分泌[6]。

    目前,關(guān)于PNMC作用機(jī)制的相關(guān)研究在大鼠[7-8]、小鼠[9]、鵪鶉[10]等動(dòng)物上已有報(bào)道,但是,PNMC對(duì)家禽生殖的影響仍處于空白。因此,本試驗(yàn)以白羽公雞為研究對(duì)象,在飲水中添加不同濃度的PNMC,研究PNMC對(duì)白羽公雞的生長(zhǎng)性能、睪丸指數(shù)、睪丸組織結(jié)構(gòu)變化、血清激素水平和睪丸中CYP17A1及相關(guān)基因表達(dá)的影響,為今后研究PNMC對(duì)家禽的影響提供試驗(yàn)依據(jù)。

    1 材料與方法(Materials and methods)

    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

    1 d齡健康白羽公雞48只(南京青龍山實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供)。

    1.2 主要試劑

    3-甲基-4-硝基酚(3-methyl-4-nitrophenol,PNMC,純度99.9%,成都科隆化學(xué)品有限公司),電解多維(四川天紅牧業(yè)有限公司),多聚甲醛(上海凌峰化學(xué)試劑有限公司),動(dòng)物切片石蠟(熔點(diǎn)60~62 ℃,上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司),HE(蘇木精-伊紅)染液(南京建成生物科技有限公司),反轉(zhuǎn)錄試劑盒(大連寶生物工程有限公司),PCR定量試劑盒(上海皓嘉科技發(fā)展有限公司),雌二醇試劑盒(北京北方生物技術(shù)研究所),孕酮和睪酮試劑盒(南京建成生物科技有限公司)。

    1.3 主要試驗(yàn)儀器

    石蠟切片機(jī)Leica RM2235和烘片機(jī)Leica HI1220(上海徠卡儀器有限公司),光學(xué)顯微鏡Nikon YS100和倒置顯微鏡(日本Nikon株式會(huì)社),酶標(biāo)儀(美國(guó)Thermo公司),5417R型臺(tái)式冷凍高速離心機(jī)(德國(guó)Eppendorf公司),低溫冷凍離心機(jī)J2-MI型(德國(guó)Beckman公司),Real-time PCR儀(美國(guó)Bio-rad公司)。

    1.4 動(dòng)物分組與處理

    試驗(yàn)為單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)。將48只1 d齡健康白羽公雞隨機(jī)分為3個(gè)處理組,每個(gè)處理組設(shè)4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)4只雞,試驗(yàn)期為42 d。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧采用玉米-豆粕型日糧,分1~21 d和21~42 d兩階段進(jìn)行飼養(yǎng),日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。對(duì)照組飲水中不添加PNMC,試驗(yàn)組分別向飲水中添加10 mg·L-1和100 mg·L-1的PNMC。試驗(yàn)階段采用籠養(yǎng),24 h光照,并且確保雞群能夠自由飲水和采食,對(duì)照組與試驗(yàn)組采用相同的免疫程序進(jìn)行免疫以及相同的飼養(yǎng)管理方式進(jìn)行飼養(yǎng)。

    1.5 測(cè)定指標(biāo)與方法

    1.5.1 生長(zhǎng)性能

    從初生重開(kāi)始記錄,于每周對(duì)所有雞只進(jìn)行稱重(稱重前12 h斷料),按重復(fù)記錄飼料采食量和剩余采食量,根據(jù)體重和采食量,計(jì)算各階段平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)。

    1.5.2 睪丸重量與睪丸指數(shù)

    試驗(yàn)結(jié)束后,采用頸部割喉法處死雞只,剝離、取出睪丸并準(zhǔn)確地除去表面的脂肪和結(jié)締組織,稱重前用濾紙吸干血水后稱重并詳細(xì)記錄每只雞的睪丸重量,計(jì)算睪丸指數(shù)。

    表1 基礎(chǔ)飼糧組成以及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diet (dry mass basis)

    注:1) 每kg飼糧提供的微量元素為Fe 80 mg,Cu 8.0 mg,Zn 65 mg,Mn 110 mg,I 1.1 mg,Se 0.3 mg;

    2) 每kg飼糧提供的維生素為VA 24 mg,VD3 6 mg,VE 20 mg,VK 1.3 mg,VB12.2 mg,VB28 mg,VB340 mg,VB64 mg,VB120.013 mg,VH 0.04 mg;葉酸1 mg,桿菌肽鋅30 mg,膽堿400 mg,泛酸鈣10 mg;

    3) 營(yíng)養(yǎng)水平為計(jì)算值。

    Note: 1) One kg of the diet provides trace elements: Fe 80 mg,Cu 8.0 mg,Zn 65 mg,Mn 110 mg,I 1.1 mg,Se 0.3 mg;

    2) One kg of the diet provides Vitamins: VA 24 mg,VD36 mg,VE 20 mg,VK 1.3 mg,VB12.2 mg,VB28 mg,VB340 mg,VB64 mg,VB120.013 mg,VH 0.04 mg; Folic acid 1 mg,bacitracin zinc 30 mg,choline 400 mg,calcium pantothenate 10 mg;

    3) Nutrient levels are calculated values.

    1.5.3 睪丸組織結(jié)構(gòu)觀察

    試驗(yàn)結(jié)束后,試驗(yàn)公雞采血后屠宰,分離睪丸,取部分樣品放入福爾馬林溶液中固定,用石蠟包埋處理,切片為5 μm,進(jìn)行HE染色,觀察睪丸組織結(jié)構(gòu)變化。

    1.5.4 血清激素水平

    試驗(yàn)結(jié)束后,采用頸部割喉法處死雞只,收集血液,3 500 r·min-1離心15 min,吸取上清液,-20 ℃保存。采用試劑盒測(cè)定血清睪酮(testosterone)、孕酮(progesterone)和雌二醇(estradiol)的含量。

    1.5.5 睪丸組織總RNA的提取和定量測(cè)定

    按照Trizol說(shuō)明書提取睪丸組織的總RNA,提取的RNA保存于-70 ℃超低溫冰箱中,或立即用于反轉(zhuǎn)錄。反轉(zhuǎn)錄時(shí),按照Takara Prime Script ? RT reagent Kit反轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書,取上述純化的總RNA 2.0 μg 加入2×RT Buffer 10 μL、20×RT Enzyme Mix 1 μL、Nuclease-free H2O補(bǔ)足至20 μL,置于PCR儀內(nèi)37 ℃15 min,95 ℃反轉(zhuǎn)錄滅活15 s,反應(yīng)結(jié)束后所得cDNA用于定量PCR。按照TakaraSYBR? Premix Ex TaqTM定量試劑盒說(shuō)明書,依次往定量PCR管加入下列試劑(20 μL體系):H2O 3.4 μL、引物(10 μmol·L-1)各0.2 μL、模板1 μL、ROX Reference Dye 0.2 μL、SYBR Premix Ex Taq 5 μL,混勻離心后在Real-time PCR儀上反應(yīng)檢測(cè),反應(yīng)程序如下:95 ℃變性10 min,95 ℃ 15 s,60 ℃ 45 s,重復(fù)45個(gè)循環(huán);反應(yīng)結(jié)束繪制熔解曲線。利用2-△△Ct法對(duì)基因表達(dá)進(jìn)行相對(duì)定量,下表為試驗(yàn)中所用引物序列,見(jiàn)表2。

    1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

    數(shù)據(jù)采用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。用單因素ANOVA法分析差異性,若差異顯著則用LSD法進(jìn)行多重比較(當(dāng)P <0.05時(shí)即被認(rèn)為差異顯著),試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean±SEM)表示。

    2 結(jié)果(Results)

    2.1 PNMC對(duì)公雞生長(zhǎng)性能的影響

    PNMC對(duì)公雞生長(zhǎng)性能的影響見(jiàn)表3。與對(duì)照組相比,10 mg·L-1組的全期平均日增重顯著降低(P<0.05),全期平均日采食量和全期料重比卻有極顯著的上升(P<0.01);與對(duì)照組相比,100 mg·L-1組在1~21 d時(shí)平均日采食量和料重比極顯著的增加(P<0.01),其他各個(gè)時(shí)期的平均日增重、平均日采食量和料重比都無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

    表2 Real-time PCR所用引物Table 2 Primers for real-time PCR analyses

    表3 3-甲基-4-硝基酚(PNMC)對(duì)公雞生長(zhǎng)性能的影響Table 3 Effects of 3-methyl-4-nitrophenol (PNMC) on growth performance of roosters

    注:同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)小寫字母不同表示差異顯著(P <0.05),大寫字母不同表示差異極顯著(P<0.01)。

    Note: In the same row,values with different small letter superscripts mean the difference is significantly at 0.05,and values with different capital letter superscripts mean the difference is significantly at 0.01.

    2.2 PNMC對(duì)公雞體重和睪丸重量的影響

    對(duì)照組和PNMC處理組公雞生長(zhǎng)正常。與對(duì)照組相比,10 mg·L-1組體重極顯著降低(P<0.01),100 mg·L-1組體重下降,但差異不顯著(P>0.05)。睪丸重量和睪丸指數(shù)均無(wú)顯著性差異(P>0.05),見(jiàn)表4。

    2.3 PNMC對(duì)公雞睪丸組織結(jié)構(gòu)的影響

    圖1為各組公雞睪丸組織的HE染色圖。從圖中可以看到,對(duì)照組公雞睪丸組織間質(zhì)細(xì)胞、支持細(xì)胞、生精細(xì)胞均清晰可見(jiàn),排列整齊、均勻分布、緊湊有序,形態(tài)正常(圖1A)。與對(duì)照組相比,PNMC組(圖1B、圖1C)呈現(xiàn)不同程度的病理形態(tài)學(xué)變化:10 mg·L-1組部分睪丸組織體積縮小,排列不夠緊湊并出現(xiàn)輕微的空泡化(圖1B);100 mg·L-1組細(xì)精管細(xì)胞排列疏松存在嚴(yán)重的脫落趨勢(shì)(圖1C)。

    表4 PNMC對(duì)公雞體重、睪丸重及睪丸指數(shù)影響Table 4 Effects of PNMC on the body weight,testicle weight and testicle index of roosters

    注: 同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)大寫字母不同表示差異極顯著(P<0.01)。

    Note: In the same column,values with different capital letter superscripts mean the difference is significantly at 0.01.

    圖1 PNMC處理對(duì)公雞睪丸組織結(jié)構(gòu)的影響(A)對(duì)照組; (B)10 mg·L-1 PNMC組; (C)100 mg·L-1 PNMC組

    2.4 PNMC對(duì)公雞血清激素水平的影響

    與對(duì)照組相比,PNMC處理組中血清孕酮和雌二醇水平均無(wú)顯著性差異(P>0.05),睪酮水平隨飲水中PNMC濃度的升高呈遞減的趨勢(shì),但差異不顯著(P>0.05),見(jiàn)表5。

    表5 PNMC對(duì)公雞血清激素水平的影響Table 5 Effects of PNMC on serum hormone levels of roosters

    2.5 PNMC對(duì)公雞睪丸組織類固醇激素合成相關(guān)酶的基因表達(dá)的影響

    圖2為各組公雞睪丸組織中CYP17A1、HSD3B2、CYP19A1和HSD17B4 mRNA相對(duì)表達(dá)量的變化。與對(duì)照組相比,10 mg·L-1組的CYP17A1(圖4A)、HSD3B2(圖4B)和CYP19A1(圖4C)有升高的趨勢(shì),但差異不顯著(P>0.05),HSD17B4(圖4D)呈降低的趨勢(shì)(P>0.05);CYP17A1(圖4A)、HSD3B2(圖4B)、CYP19A1(圖4C)和HSD17B4(圖4D)在100 mg·L-1組均有升高趨勢(shì),但差異不顯著(P>0.05)。

    3 討論(Discussion)

    3.1 PNMC對(duì)公雞生長(zhǎng)性能及睪丸重量的影響

    飲水中分別添加濃度為10 mg·L-1和100 mg·L-1PNMC,不會(huì)引起急性中毒癥狀。濃度為10 mg·L-1時(shí)顯著影響公雞的生長(zhǎng)性能,而濃度為100 mg·L-1時(shí)無(wú)顯著影響,這一結(jié)果與岳卓等[7]、Li等[11]的研究不同。分析其原因,可能PNMC對(duì)公雞生長(zhǎng)性能的影響不存在濃度依賴性,當(dāng)濃度為10 mg·L-1PNMC進(jìn)入動(dòng)物消化道后,可能改變消化道內(nèi)環(huán)境,降低了動(dòng)物對(duì)養(yǎng)分的消化吸收能力,從而引起生長(zhǎng)性能的降低;而濃度為100 mg·L-1時(shí)無(wú)顯著影響,可能與給藥方式、試驗(yàn)動(dòng)物、處理時(shí)間等有關(guān),但具體作用機(jī)制尚不清楚。在睪丸重量和睪丸指數(shù)方面,如果睪丸指數(shù)變小,表明睪丸可能出現(xiàn)萎縮和退行性變化;如果睪丸指數(shù)變大,表明睪丸可能出現(xiàn)水腫、充血和增生等病變[12]。濃度為10 mg·L-1和100 mg·L-1PNMC沒(méi)有引起公雞睪丸重量和睪丸指數(shù)發(fā)生顯著性變化,說(shuō)明PNMC在本試驗(yàn)劑量下對(duì)公雞生殖器官的生長(zhǎng)沒(méi)有顯著影響。

    圖2 PNMC處理對(duì)公雞睪丸組織類固醇激素合成相關(guān)酶的基因表達(dá)的影響

    3.2 PNMC對(duì)公雞睪丸組織結(jié)構(gòu)變化的影響

    飲水中添加不同濃度的PNMC對(duì)公雞睪丸有不同程度的損傷。這與前人報(bào)道一致,如岳卓等[7]的研究表明對(duì)照組大鼠睪丸曲細(xì)精管內(nèi)支持細(xì)胞和各級(jí)生精細(xì)胞排列緊密、有序,精細(xì)胞整齊密集;PNMC處理(皮下注射)可導(dǎo)致大鼠睪丸組織均有不同程度的損傷,主要表現(xiàn)為曲細(xì)精管內(nèi)大量生精細(xì)胞壞死,細(xì)胞核固縮凝聚,并出現(xiàn)形成空泡樣結(jié)構(gòu)。布同良等[13]研究表明100 mg·kg-1的PNMC腹腔注射可引起小鼠睪丸的局部嚴(yán)重?fù)p傷,表現(xiàn)為曲細(xì)精管的損傷,生精上皮中生殖細(xì)胞量顯著減少。上述研究表明PNMC可能是阻礙生精細(xì)胞在減數(shù)分裂前后的分化與增殖,使其發(fā)育成精子細(xì)胞和精子的數(shù)量減少。

    3.3 PNMC對(duì)血清激素水平和睪丸組織類固醇激素合成相關(guān)酶的基因表達(dá)的影響

    作為汽車尾氣顆粒物中成分之一的PNMC可抑制成年小鼠[14]、大鼠[15]以及未成年大鼠精子的生成[16]。飲水中添加10 mg·L-1和100 mg·L-1PNMC時(shí),睪酮的含量雖無(wú)顯著性減少,但呈降低的趨勢(shì)。這與他人的研究結(jié)果一致,如岳卓等[9]報(bào)道,PNMC處理(經(jīng)口灌胃)會(huì)導(dǎo)致曲細(xì)精管內(nèi)睪酮含量降低,最終導(dǎo)致精子生成障礙。同時(shí)Li等[17]研究表明PNMC肌肉注射可以使成年雄性鵪鶉的睪酮分泌下降,并影響睪丸功能,但機(jī)制尚不清楚。近來(lái)研究表明,生理劑量的孕激素可以促進(jìn)雄激素依賴的雄性性行為表現(xiàn),這在Young等[18]的實(shí)驗(yàn)中已得到證實(shí)。與10 mg·L-1PNMC組相比,飲水中添加100 mg·L-1PNMC時(shí),雌二醇的含量呈降低的趨勢(shì),肉雞血清中孕酮的含量有升高的趨勢(shì)。這一結(jié)果與Li等[19]報(bào)道類似,100 mg·kg-1PNMC組肌肉注射顯著降低了雌二醇的含量,顯著增加了孕酮的含量。說(shuō)明飲水中添加PNMC能夠在一定程度上影響血清激素水平的變化,導(dǎo)致內(nèi)分泌功能紊亂,從而對(duì)生殖系統(tǒng)造成損傷。

    性腺發(fā)育受到下丘腦-垂體-性腺信號(hào)通路的調(diào)節(jié)和控制,激素在信息傳遞中起重要作用,也成為環(huán)境內(nèi)分泌干擾物作用的主要靶點(diǎn)[20]。細(xì)胞色素P450系列酶參與了類固醇激素的合成過(guò)程[21]。CYP11A1和HSD3B2在膽固醇轉(zhuǎn)化成孕酮的生化過(guò)程中不可或缺,CYP17和HSD17B在孕酮轉(zhuǎn)化成睪酮的過(guò)程中扮演著重要的角色,而CYP19在睪酮進(jìn)一步轉(zhuǎn)化成雌二醇的過(guò)程中發(fā)揮重要的作用[22-23]。其中,由CYP17基因編碼的細(xì)胞色素P450 17α-羥化酶(17α-hydroxylase)、17,20-裂解酶(17,20-lyase)能參與睪丸中膽固醇轉(zhuǎn)化為睪酮的過(guò)程,調(diào)控睪丸性激素合成的總量[24]。P450芳香化酶(P450arom)是調(diào)節(jié)脊椎動(dòng)物體內(nèi)雌激素形成的關(guān)鍵酶,廣泛分布于脊椎動(dòng)物的腦和性腺等器官組織中[25]。魚類CYP19A基因編碼性腺中的P450arom,主要分布于卵巢[26],在睪丸間質(zhì)細(xì)胞中有少量表達(dá),調(diào)控原始精原細(xì)胞的增殖[27]。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)CYP19A1基因的表達(dá)量在PNMC處理組公雞睪丸組織中有增加趨勢(shì),這一結(jié)果與Hatef等[28]的報(bào)道類似。因此,我們推測(cè)PNMC對(duì)公雞睪丸功能的影響可能是通過(guò)提高CYP19A1基因表達(dá)加速了睪酮向雌激素的轉(zhuǎn)化,使血清中睪酮含量減少,增強(qiáng)雌激素效應(yīng)。CYP17A1、HSD3B2和HSD17B4基因表達(dá)無(wú)明顯的變化,可能是由于這些基因位于上游,但具體作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

    綜上所述,在公雞早期發(fā)育過(guò)程中,飲水中添加10 mg·L-1PNMC時(shí)可顯著影響肉雞的生長(zhǎng)性能,并且這種影響不具有濃度依賴性;飲水中添加100 mg·L-1PNMC時(shí)公雞血清睪酮的生成減少,睪丸細(xì)精管生精細(xì)胞變性、壞死,造成結(jié)構(gòu)變化,引起睪丸功能損傷。而PNMC通過(guò)影響公雞睪丸組織類固醇激素合成相關(guān)酶的表達(dá)而干擾激素分泌的作用機(jī)制還有待進(jìn)一步的研究。

    [1] 宋美艷,張永輝,樸元國(guó),等.4-硝基酚對(duì)大鼠肝臟的毒性及氧化損傷[J].生態(tài)毒理學(xué)報(bào),2014,9(3): 495-502

    Song M Y,Zhang Y H,Piao Y G,et al.Toxic effects and oxidative damage of 4-nitrophenol on rat liver [J].Asian Journal of Ecotoxicology,2014,9(3): 495-502 (in Chinese)

    [2] Mori Y,Kamta K,Toda N,et al.Isolation of nitrophenols from diesel exhaust particles(DEP)as vasodilatation compounds [J].Biological & Pharmaceutical Bulletin,2003,28(3): 394-395

    [3] Zayed S M,Mahdy F.Decomposition of 14C-fenitrothion under the influence of UV and sunlight under tropical and subtropical conditions [J].Chemosphere,2008,7(9): 1653-1659

    [4] Furuta C,Li C,Taneda S,et al.Immunohistological study for estrogenic activities of nitrophenols in diesel exhaust particles [J].Endocrine,2005,27(1): 33-36

    [5] Taneda S,Mori Y,Kamata K,et al.Estrogenic and anti-androgenic activity of nitrophenols in diesel exhaust particles(DEP) [J].Biological & Pharmaceutical Bulletin,2004,27(6): 835-837

    [6] Li C M,Li X Z,Suzuki A K,et al.Effects of exposure to nanoparticle-rich diesel exhaust on adrenocortical function in adult male mice [J].Toxicology Letters,2012,209(3):277-281

    [7] 岳卓,佘銳萍,田紀(jì)景,等.3-甲基-4-硝基酚對(duì)大鼠睪丸組織的損傷作用[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2010,31(S): 66-69Yue Z,She R P,Tian J J,et al.Study on toxic effect of 3-methly-4-nitrophenol on SD rat testis [J].Progress in Veterinary Medicine,2010,31(S): 66-69 (in Chinese)

    [8] 岳卓,佘銳萍,葉楠,等.3-甲基-4-硝基酚對(duì)大鼠腸道粘膜免疫的影響[C].第二屆中國(guó)獸醫(yī)臨床大會(huì)論文集 (下冊(cè)),2010: 1567-1570

    [9] 岳卓,佘銳萍,朱金鳳,等.3-甲基-4-硝基酚對(duì)雄性小鼠生殖毒性的研究[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫,2011,28(6): 50-52

    Yue Z,She R P,Zhu J F,et al.Study on the reproductive toxicity of 3-methly-4-nitrophenol in male mice [J].Journal of Chinese Animal Quarantine,2011,28(6): 50-52 (in Chinese)

    [10] Li C M,Taneda S,Suzuki A K,et al.Anti-androgenic activity of 3-methyl-4-nitrophenol in diesel exhaust particles [J].European Journal of Pharmacology,2006,543: 194-199

    [11] Li C M,Takahashi S,Taneda S,et al.Effects of 3-methyl-4-nitrophenol in diesel exhaust particles on the regulation of reproductive function in immature female Japanese quail (Coturnix japonica) [J].Journal of Reproduction and Development,2007,53: 673-678

    [12] 沈建忠.動(dòng)物毒理學(xué)[M].北京: 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2002: 107-108

    [13] 布同良,米玉玲,曾衛(wèi)東,等.3-甲基-4-硝基酚引起的睪丸氧化損傷及其修復(fù)的研究 [J].畜牧與獸醫(yī),2012,12(4): 48-51

    Bu T L,Mi Y L,Zeng W D,et al.Oxidative damage induced by 3-methyl-4-nitrophenol and its repair in testis [J].Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2012,12(4): 48-51 (in Chinese)

    [14] Yoshida S,Sagai M,Oshio S,et al.Exposure to diesel exhaust affects the male reproductive system of mice [J].International Journal of Andrology,1999,22: 307-315

    [15] Tsukue N,Toda N,Tsubone H,et al.Diesel exhaust (DE) affects the regulation of testicular function in male Fischer 344 rats [J].Toxicology Environment Health,2001,63: 115-126

    [16] Watanabe N,Oonuki Y.Inhalation of diesel engine exhaust affects spermatogenesis in growing male rats [J].Environmental Health Perspectives,1999,107: 539-544

    [17] Li C M,Takahashi S,Taneda S,et al.Impairment of testicular function in adult male Japanese quail (Coturnix japonica) after a single administration of 3-methyl-4-nitrophenol in diesel exhaust particles [J].Journal of Endocrindogy,2006,189: 555-564

    [18] Young L J,Greenberg N,Crews D.The effects of progesterone on sexual behavior in male green anolelizards (Anoliscarolinensis) [J].Hormones Behavior,1991,25(4): 477-488

    [19] Li C M,Takahashi S,Taneda S,et al.Effects of 3-methyl-4-nitrophenol on the reproductive toxicology in female Japanese quail (Coturnix japonica) [J].Biological & Pharmaceutical Bulletin,2008,31(11): 2158-2161

    [20] Kallivretaki E,Eggen R,Neuhauss S,et al.Aromatase in zebrafish: A potential target for endocrine disrupting chemicials [J].Marine Enviromental Research,2006,62:S187-S190

    [21] 云丹,劉曉麗,程樂(lè)華,等.雙酚A對(duì)斑馬魚精巢性激素生成酶基因表達(dá)的影響[J].生態(tài)毒理學(xué)報(bào),2014,9(1): 81-89

    Yun D,Liu X L,Cheng L H,et al.Alterations in the mRNAs of enzymes responsible for sex steroidogenesis in the testis of zebrafish exposed to bisphenol-A [J].Asian Journal of Ecotoxicology,2014,9(1): 81-89 (in Chinese)

    [22] 高連連,蔡德培.環(huán)境內(nèi)分泌干擾物對(duì)性激素合成相關(guān)酶基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的不良影響[J].國(guó)際兒科學(xué)雜志,2012,39(5): 521-524

    Gao L L,Cai D P.The effect of environmental endocrine disruptors on gene regulative networks related to steroidogenesis [J].International Journal of Pediatrics,2012,39(5): 521-524 (in Chinese)

    [23] Hu M C,Chiang E,Tong S K,et al.Regulation of steroidogenesis in transgenic mice and zebrafish [J].Molecular and Cellular Endocrinology,2001,171(1-2): 130-139

    [24] Schulz R W,Vischer H F,Cavaco J E B,et al.Gonadotropins,their receptors,and the regulation of tesicular functions in fish [J].Comparative Biochemistry and Physiology Part B:Biochemistry and Molecular Biology,2001,129B: 407-417

    [25] 王慧,李霞,張育輝.CYP19基因表達(dá)與芳香化酶活性調(diào)控因子的研究進(jìn)展[J].中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志,2010,19(3): 109-113

    Wang H,Li X,Zhang Y H.Research progress of factors regulating CYP19 gene expression and aromatase activity [J].Chinese Journal of Histochemistry and Cytochemistry,2010,19(3): 109-113 (in Chinese)

    [26] Tong S K,Chung B C.Analysis of zebra fish cyp19 promoters [J].Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology,2003,86: 381-386

    [27] Schulz R W,de Franca L R,Lareyre J J,et al.Spermatogenesis in fish [J].General and Comparative Endocrinology,2010,165: 390-411

    [28] Hatef A,Zare A,Alavi S M,et al.Modulations in androgen and estrogen mediating genes and testicular response in male goldfish exposed to bisphenol A [J].Enviromental Toxicology and Chemistry,2012,31(9): 2069-2077

    Effects of 3-methyl-4-nitrophenol on the Early Development of Rooster Testes

    Xu Weifeng,PiaoYuanguo,Li Yansen,Li Chunmei*

    College of Animal Science and Technology,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China

    25 December 2014 accepted 4 February 2015

    To investigate the effects of 3-methyl-4-nitrophenol (PNMC),a major component of diesel exhaust particles,on the early development of the rooster testes,forty-eight white roosters(1-d-old) were randomly divided into three groups and supplemented with PNMC in drinking water in different doses (0,10,100 mg·L-1)for 42 days.Growth performance,testes weight and index,the morphological changes of testes,serum hormone levels and the expression levels of the testicular CYP17A1 and related genes were assessed.The results showed that the growth performance was significantly reduced in the 10 mg·L-1PNMC-treated group compared with the control group.The values of testes weight and index showed no significant change among 3 groups.The increased vacuolation were observed in the spermatogenic cells of the seminiferous tubules in the 10 mg·L-1PNMC-treated group.There was no significant difference in serum progesterone,estradiol and testosterone levels.The expression levels of the testicular CYP17A1,HSD3B2 and CYP19A1 in the 10 mg·L-1PNMC-treated group was higher than those of the control group.The expression level of the testicular HSD17B4 was lower in the 10 mg·L-1PNMC-treated group and higher in the 100 mg·L-1PNMC group when comparing with that of the control group.In conclusion,the supplementation of 10 mg·L-1PNMC in drinking water affected the growth performance whereas supplementation of 100 mg·L-1PNMC caused the cell degeneration and necrosis in the seminiferous tubules and triggered the structural changes.Therefore our results indicate that early exposure to PNMC resulting in the damages in the reproductive system of rooster.

    3-methyl-4-nitrophenol; testes; rooster; reproductive damage

    江蘇省自然基金面上項(xiàng)目(BK20131315);“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2012BAD39B02)

    徐偉風(fēng)(1990-),女,碩士研究生,研究方向?yàn)榄h(huán)境毒理學(xué),E-mail:2013105059@njau.edu.cn;

    *通訊作者(Corresponding author),E-mail: chunmeili@njau.edu.cn

    10.7524/AJE.1673-5897.20141225001

    2014-12-25 錄用日期:2015-02-04

    1673-5897(2015)4-146-08

    X171.5

    A

    李春梅(1974-),女,博士,教授,博士生導(dǎo)師。主要研究方向動(dòng)物環(huán)境生理與營(yíng)養(yǎng)毒理學(xué)。

    徐偉風(fēng),樸元國(guó),李延森,等.3-甲基-4-硝基酚對(duì)公雞睪丸早期發(fā)育的影響[J].生態(tài)毒理學(xué)報(bào),2015,10(4): 146-153

    Xu W F,Piao Y G,Li Y S,et al.Effects of 3-methyl-4-nitrophenol on the early development of rooster testes [J].Asian Journal of Ecotoxicology,2015,10(4): 146-153 (in Chinese)

    猜你喜歡
    硝基睪酮公雞
    淺談睪酮逃逸
    兩只公雞
    硝基胍烘干設(shè)備及工藝研究
    化工管理(2021年7期)2021-05-13 00:46:24
    運(yùn)動(dòng)員低血睪酮與營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充
    血睪酮、皮質(zhì)醇與運(yùn)動(dòng)負(fù)荷評(píng)定
    高塔硝基肥,科技下鄉(xiāng)助農(nóng)豐收
    正說(shuō)睪酮
    大眾健康(2016年3期)2016-05-31 23:59:46
    說(shuō)話的公雞
    九硝基三聯(lián)苯炸藥的合成及表征
    聰明的公雞
    国产伦一二天堂av在线观看| 欧美高清成人免费视频www| 六月丁香七月| 99九九线精品视频在线观看视频| 成人欧美大片| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产成年人精品一区二区| 免费在线观看影片大全网站| 少妇熟女aⅴ在线视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产av一区在线观看免费| 麻豆国产av国片精品| 一级毛片电影观看 | 九九爱精品视频在线观看| 国产淫片久久久久久久久| 夜夜爽天天搞| 欧美一区二区亚洲| 一级毛片电影观看 | 国产精品女同一区二区软件| 亚洲熟妇熟女久久| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 九九热线精品视视频播放| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 在线观看免费视频日本深夜| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲在线自拍视频| 亚洲国产精品国产精品| 国产淫片久久久久久久久| 色播亚洲综合网| 天美传媒精品一区二区| 成人午夜高清在线视频| 国产黄a三级三级三级人| 欧美日韩在线观看h| 网址你懂的国产日韩在线| 国产成人a区在线观看| 免费黄网站久久成人精品| 欧美高清成人免费视频www| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 亚洲综合色惰| 日日撸夜夜添| 99久久中文字幕三级久久日本| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产av一区在线观看免费| 国产成人aa在线观看| 性插视频无遮挡在线免费观看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 久久这里只有精品中国| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 国产在视频线在精品| 高清日韩中文字幕在线| 久久久久久伊人网av| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲专区国产一区二区| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲久久久久久中文字幕| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产乱人偷精品视频| 午夜福利成人在线免费观看| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 校园春色视频在线观看| 又爽又黄a免费视频| 国产精品一区二区免费欧美| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 韩国av在线不卡| 亚洲欧美日韩高清专用| 免费观看的影片在线观看| 亚洲国产色片| 日本黄色片子视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产单亲对白刺激| 三级毛片av免费| 禁无遮挡网站| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 色播亚洲综合网| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 午夜福利在线在线| 成人三级黄色视频| 亚洲精品日韩av片在线观看| 波多野结衣高清无吗| 欧美又色又爽又黄视频| 午夜福利18| 精品乱码久久久久久99久播| 免费看美女性在线毛片视频| 久久韩国三级中文字幕| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 99久久无色码亚洲精品果冻| 亚洲av熟女| 欧美日韩乱码在线| 91在线精品国自产拍蜜月| 性插视频无遮挡在线免费观看| 一夜夜www| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲高清免费不卡视频| 在现免费观看毛片| 成年免费大片在线观看| 成年女人毛片免费观看观看9| 毛片一级片免费看久久久久| 亚洲最大成人av| 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲精品影视一区二区三区av| 高清毛片免费观看视频网站| 国产精品久久视频播放| 亚洲精品日韩av片在线观看| 亚洲成人久久性| 色综合色国产| 欧美潮喷喷水| 国产精品一区二区免费欧美| 国产在线精品亚洲第一网站| 精品久久久噜噜| 国产精品不卡视频一区二区| 真人做人爱边吃奶动态| 欧美+日韩+精品| 欧美区成人在线视频| 日本黄大片高清| 日韩一本色道免费dvd| 一级a爱片免费观看的视频| 欧美日韩精品成人综合77777| 精品国产三级普通话版| 国产高清激情床上av| 深夜精品福利| 亚洲性夜色夜夜综合| 日本免费a在线| 免费观看人在逋| 午夜精品在线福利| 蜜臀久久99精品久久宅男| 国产精品一区二区性色av| 国产精品乱码一区二三区的特点| 99精品在免费线老司机午夜| 97超碰精品成人国产| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲美女搞黄在线观看 | 看黄色毛片网站| 国产在视频线在精品| 亚洲第一电影网av| 成人欧美大片| 永久网站在线| 男女做爰动态图高潮gif福利片| av国产免费在线观看| 久久国产乱子免费精品| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 日本与韩国留学比较| 久久99热这里只有精品18| 免费高清视频大片| 搡老妇女老女人老熟妇| 最近手机中文字幕大全| 国产亚洲欧美98| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久久久久久久久成人| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产精品,欧美在线| 夜夜爽天天搞| 久久精品国产亚洲网站| 国产久久久一区二区三区| 免费一级毛片在线播放高清视频| av在线老鸭窝| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 久久久久久久亚洲中文字幕| 午夜激情欧美在线| 三级毛片av免费| 亚洲人与动物交配视频| av视频在线观看入口| 中国美女看黄片| 免费在线观看成人毛片| 天堂影院成人在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 女同久久另类99精品国产91| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 大香蕉久久网| 99视频精品全部免费 在线| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 人妻久久中文字幕网| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 在线观看美女被高潮喷水网站| 精品国产三级普通话版| 婷婷六月久久综合丁香| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲欧美成人精品一区二区| 天堂网av新在线| aaaaa片日本免费| 最后的刺客免费高清国语| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国产精品人妻久久久影院| 天堂动漫精品| 国产一区二区三区av在线 | 日本熟妇午夜| 成人永久免费在线观看视频| 中国美白少妇内射xxxbb| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲美女搞黄在线观看 | 人人妻人人看人人澡| 一级毛片aaaaaa免费看小| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲成人av在线免费| 午夜福利18| 深爱激情五月婷婷| 亚洲一区高清亚洲精品| 99久久精品一区二区三区| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 久久精品影院6| 亚洲av免费在线观看| 亚洲av成人av| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲综合色惰| 午夜a级毛片| 3wmmmm亚洲av在线观看| 精品一区二区免费观看| 国产成人福利小说| 一个人观看的视频www高清免费观看| 亚洲精品国产成人久久av| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲精品国产av成人精品 | 99久国产av精品| 日本在线视频免费播放| 国产精品永久免费网站| 看片在线看免费视频| 在线播放无遮挡| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 免费看日本二区| 日本三级黄在线观看| 久久精品国产亚洲av天美| 又爽又黄a免费视频| 亚洲最大成人中文| 大型黄色视频在线免费观看| 床上黄色一级片| 麻豆成人午夜福利视频| 18+在线观看网站| 亚洲自拍偷在线| 卡戴珊不雅视频在线播放| a级毛色黄片| 联通29元200g的流量卡| 亚洲电影在线观看av| 日日撸夜夜添| 国产精品久久视频播放| 一级av片app| 午夜日韩欧美国产| 91久久精品电影网| 国产精品av视频在线免费观看| 国产精品一区二区三区四区久久| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲四区av| 中文字幕免费在线视频6| 久久久欧美国产精品| 国产精品久久久久久久电影| avwww免费| 露出奶头的视频| 99riav亚洲国产免费| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 免费av不卡在线播放| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产精品av视频在线免费观看| 天堂动漫精品| 日韩强制内射视频| 高清毛片免费观看视频网站| 又爽又黄无遮挡网站| 又爽又黄无遮挡网站| 欧美高清性xxxxhd video| 国产精品人妻久久久久久| 永久网站在线| 亚洲精品成人久久久久久| 国产一区亚洲一区在线观看| 18禁在线播放成人免费| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 在线播放国产精品三级| 亚洲av二区三区四区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国国产精品蜜臀av免费| 99久国产av精品国产电影| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 成年版毛片免费区| 日本与韩国留学比较| 国产黄a三级三级三级人| 国模一区二区三区四区视频| 国产亚洲欧美98| 国产在线男女| 小说图片视频综合网站| 国产男靠女视频免费网站| 长腿黑丝高跟| 日本欧美国产在线视频| 亚洲成人久久爱视频| 高清毛片免费看| 欧美+日韩+精品| 日本 av在线| 六月丁香七月| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 三级经典国产精品| 国产 一区精品| 日本a在线网址| 久久久国产成人精品二区| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 亚洲欧美日韩东京热| 嫩草影视91久久| 长腿黑丝高跟| 51国产日韩欧美| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 在线观看66精品国产| 国产一区二区在线观看日韩| 我要搜黄色片| 国产久久久一区二区三区| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲精品日韩av片在线观看| 综合色丁香网| 如何舔出高潮| 国产精品国产高清国产av| 在线免费观看的www视频| 欧美激情在线99| 男人狂女人下面高潮的视频| 伦精品一区二区三区| 无遮挡黄片免费观看| 激情 狠狠 欧美| 一级黄片播放器| 中文资源天堂在线| 少妇人妻一区二区三区视频| or卡值多少钱| 一进一出抽搐动态| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 九九在线视频观看精品| 少妇的逼好多水| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产精品野战在线观看| ponron亚洲| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲欧美精品综合久久99| 白带黄色成豆腐渣| 美女黄网站色视频| 久久久色成人| 国产大屁股一区二区在线视频| 日韩一区二区视频免费看| 寂寞人妻少妇视频99o| 美女免费视频网站| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 简卡轻食公司| 色5月婷婷丁香| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲av美国av| 国产欧美日韩一区二区精品| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 最新在线观看一区二区三区| 久久99热6这里只有精品| 九九爱精品视频在线观看| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 亚洲最大成人中文| 人人妻人人澡欧美一区二区| 久久综合国产亚洲精品| 日本黄色片子视频| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 日本爱情动作片www.在线观看 | 精品久久久久久久久亚洲| 麻豆成人午夜福利视频| 免费av观看视频| 美女免费视频网站| 欧美成人a在线观看| 欧美潮喷喷水| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 国产精品日韩av在线免费观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 国产精品不卡视频一区二区| 国产视频一区二区在线看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 午夜亚洲福利在线播放| 可以在线观看的亚洲视频| 真人做人爱边吃奶动态| 别揉我奶头 嗯啊视频| 成人亚洲欧美一区二区av| 免费av毛片视频| 国产真实乱freesex| 日韩国内少妇激情av| 亚洲精品色激情综合| 国产日本99.免费观看| 欧美最黄视频在线播放免费| 我的老师免费观看完整版| 天堂√8在线中文| 99热全是精品| 99久久九九国产精品国产免费| 成人三级黄色视频| 国产精华一区二区三区| 美女被艹到高潮喷水动态| 日本五十路高清| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲天堂国产精品一区在线| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产精品爽爽va在线观看网站| 欧美成人一区二区免费高清观看| 性欧美人与动物交配| 国产午夜精品论理片| 国产男靠女视频免费网站| 嫩草影院新地址| 夜夜夜夜夜久久久久| 免费无遮挡裸体视频| 在线免费观看的www视频| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 热99re8久久精品国产| 国产久久久一区二区三区| 国内精品一区二区在线观看| 欧美日本亚洲视频在线播放| 日韩欧美免费精品| av黄色大香蕉| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 亚州av有码| 亚洲精品456在线播放app| 国产午夜福利久久久久久| 搡老妇女老女人老熟妇| 免费观看精品视频网站| 精品国产三级普通话版| 美女高潮的动态| 国产极品精品免费视频能看的| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲欧美清纯卡通| 校园春色视频在线观看| 一进一出抽搐gif免费好疼| 97热精品久久久久久| 国产成人freesex在线 | 免费在线观看成人毛片| 国产极品精品免费视频能看的| av免费在线看不卡| 麻豆av噜噜一区二区三区| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 精品日产1卡2卡| 国产精品一区二区性色av| 一级毛片我不卡| 国产精品国产高清国产av| 日韩成人av中文字幕在线观看 | 亚洲无线在线观看| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 午夜亚洲福利在线播放| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 一区福利在线观看| 极品教师在线视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产亚洲av嫩草精品影院| 成人永久免费在线观看视频| 国产av不卡久久| 亚洲在线自拍视频| 丰满乱子伦码专区| 不卡视频在线观看欧美| 日韩高清综合在线| 欧美一区二区精品小视频在线| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲乱码一区二区免费版| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 日本 av在线| 国产色爽女视频免费观看| 99在线人妻在线中文字幕| 欧美日本视频| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 久久久色成人| 国产男靠女视频免费网站| 亚洲av电影不卡..在线观看| 精品乱码久久久久久99久播| 午夜日韩欧美国产| 99久久无色码亚洲精品果冻| 我的老师免费观看完整版| 99热这里只有是精品在线观看| 久久久久九九精品影院| 两个人的视频大全免费| 国产精品一二三区在线看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 日韩三级伦理在线观看| 欧美日本视频| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲18禁久久av| 天堂影院成人在线观看| 一a级毛片在线观看| 欧美成人免费av一区二区三区| 欧美又色又爽又黄视频| 国产真实乱freesex| 悠悠久久av| 精品欧美国产一区二区三| 婷婷精品国产亚洲av| 亚洲久久久久久中文字幕| 色在线成人网| 免费在线观看成人毛片| 亚洲精品在线观看二区| 久久久国产成人免费| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 老司机影院成人| 最好的美女福利视频网| 国产精品久久电影中文字幕| 少妇的逼好多水| 国产探花极品一区二区| 久久九九热精品免费| 国产av在哪里看| 色尼玛亚洲综合影院| 国产一区二区激情短视频| 少妇熟女aⅴ在线视频| 99久久精品国产国产毛片| 97碰自拍视频| 日本在线视频免费播放| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产免费男女视频| 免费观看的影片在线观看| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲国产精品国产精品| 露出奶头的视频| 三级经典国产精品| 最近2019中文字幕mv第一页| 在线观看一区二区三区| 啦啦啦韩国在线观看视频| 69人妻影院| 国产午夜福利久久久久久| 欧美丝袜亚洲另类| avwww免费| 成人一区二区视频在线观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 不卡一级毛片| 亚洲精品456在线播放app| 亚州av有码| 亚洲,欧美,日韩| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲自拍偷在线| 十八禁国产超污无遮挡网站| 免费观看人在逋| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产视频内射| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲,欧美,日韩| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲自拍偷在线| 日本一本二区三区精品| 日韩成人av中文字幕在线观看 | 成人性生交大片免费视频hd| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 日本三级黄在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产综合懂色| 黄色视频,在线免费观看| 欧美区成人在线视频| 桃色一区二区三区在线观看| 日韩三级伦理在线观看| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲精品影视一区二区三区av| 黄色一级大片看看| 男女视频在线观看网站免费| 国产精品99久久久久久久久| 欧美在线一区亚洲| av天堂中文字幕网| 中国美女看黄片| 身体一侧抽搐| 亚洲成人久久爱视频| 日韩欧美 国产精品| 欧美色视频一区免费| 国产乱人视频| aaaaa片日本免费| 日本色播在线视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 草草在线视频免费看| 亚洲国产精品国产精品| 国产亚洲91精品色在线| 美女被艹到高潮喷水动态| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲自偷自拍三级| av专区在线播放| 露出奶头的视频| 尾随美女入室| а√天堂www在线а√下载| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 99久久无色码亚洲精品果冻| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲精品国产av成人精品 | 五月玫瑰六月丁香| 日韩大尺度精品在线看网址| 国产一区二区激情短视频| 日韩一区二区视频免费看| 国产成人福利小说| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产精品日韩av在线免费观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 香蕉av资源在线| 国产高清三级在线| 哪里可以看免费的av片| 国产激情偷乱视频一区二区| 听说在线观看完整版免费高清| 一级毛片aaaaaa免费看小| 国产欧美日韩精品亚洲av| 成人综合一区亚洲| 亚洲av美国av| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产视频内射| 最新中文字幕久久久久| 精品国内亚洲2022精品成人| 国国产精品蜜臀av免费| 久久亚洲国产成人精品v| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 国产91av在线免费观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 人妻久久中文字幕网| 一a级毛片在线观看| 中文字幕免费在线视频6| 色综合亚洲欧美另类图片| 十八禁国产超污无遮挡网站| 久久久精品94久久精品| 内射极品少妇av片p| av视频在线观看入口| 国产精品亚洲一级av第二区| 简卡轻食公司|