自身免疫性溶血性貧血患者的類同種自身抗體檢測及其輸血對策探討

袁文聲，易峰，何銳洪，林惠燕

(中山市中心血站，廣東 中山528400)

近年研究結(jié)果表明，在同種抗體和自身抗體之間還存在一種兼有兩者特點的抗體，稱之為類同種自身抗體，該類抗體既具有選擇性的針對相應的紅細胞上的血型抗原、類似于同種抗體的性質(zhì)，又有針對自身紅細胞血型抗原的自身抗體的性質(zhì)，因為通常認為不常見，到目前為止，鮮有關(guān)于類同種自身抗體的研究報告，本文擬就AIHA患者血清中類同種自身抗體的檢出率、相對特異性及對輸血對策的影響進行研究，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 AIHA患者71例，診斷標準[1]：(1)血紅蛋白<11g/L；(2)直接抗人球蛋白試驗(direct antiglobulin test，DAT)陽性；(3)符合以下溶血標準中至少一條：網(wǎng)織紅細胞計數(shù)>120×109/L；結(jié)合珠蛋白<10 mg/dL；總膽紅素>1 mg/dl；(4)近期無特殊用藥史或輸血史。

1.2 試劑與儀器 抗人球蛋白微柱凝膠卡(LISS/Coombs)(長春博訊生物技術(shù)公司)，專用血型卡離心機(西班牙)和37℃恒溫振搖式水浴箱(韓國)。血型不規(guī)則抗體篩查細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號(上海血液生物公司)和抗體鑒定譜細胞1～10號 (上海血液生物公司)，IgG抗D、抗 C、抗 c、抗E試劑血清及抗人球蛋白試劑 (上海市血液生物)，Rh表型凝膠卡 (瑞士)。 ABO、RhD血型、ZAPP試劑(長春博德生物技術(shù)公司)。

1.3 血清學檢測方法

1.2.2.1 常規(guī)實驗室檢測 包括直接抗人球蛋白實驗、間接抗人球蛋白實驗、抗體鑒定實驗、紅細胞血型鑒定實驗，參照文獻[1]和相應的試劑說明書操作。

1.2.2.2 放散試驗 氯喹放散試驗參照文獻[2，3]，放散后的紅細胞用于紅細胞血型鑒定和后續(xù)的自身抗體吸收試驗；乙醚放散試驗參照文獻[2]，放散液用于抗體鑒定。

1.2.2.3 吸收試驗 參照文獻[2]。

1.2.2.4 類同種自身抗體的確認 取適量自身免疫性溶血性貧血患者紅細胞進行乙醚放散，放散液用于抗體特異性鑒定，采用不含該抗體相應抗原的O型紅細胞進行吸收、放散試驗，得到的放散液與與譜細胞反應，若結(jié)果仍顯示和原放散液具有相同的反應格局，則確認該自身抗體為類同種自身抗體。

2 結(jié)果

見表 1,表 2,表 3。

表1 71例AIHA患者血清學特點分類

表2 類同種自身抗體特異性情況

表3 類同種自身抗體特異性與患者Rh抗原表型比較

3 討論

類同種自身抗體由Funderberg等[4]第一次描述。因為通常認為自身抗體不具有特異性，且不常見[5]，到目前為止，很少有關(guān)AIHA患者血清中類同種自身抗體的研究報告。Issitt等[5]報道，21.0%(29/138)的溫暖抗體型AIHA患者血清中的自身抗體表現(xiàn)為類同種自身抗體。Wheeler等[6]通過使用同種紅細胞吸收技術(shù)，發(fā)現(xiàn)12.0%(12/100)的直接抗人球蛋白試驗(DAT)陽性血清樣本的自身抗體顯示類同種自身抗體，而本研究中AIHA患者血清含類同種抗體的頻率為18.3%(13/71)，含類同種自身抗體伴同種抗體為1.4%(1/71)，與相關(guān)報道[7]相近，另本次研究表明AIHA患者血清中含有類同種自身抗體較含自身抗體(9.9%)或含自身抗體伴同種抗體伴同種抗體(5.6%)更為常見(見表1)，且類同種自身抗體均直接抗Rh系統(tǒng)抗原，如C+e、e、C和E(見表2)。其中6例患者紅細胞上存在類同種自身抗體“特異性”針對的抗原，8例患者的紅細胞上不含有類同種自身抗體“特異性”針對的紅細胞抗原(見表 3)。

目前，國內(nèi)除了少數(shù)病例外，還沒有專門關(guān)于血清中含類同種自身抗體的AIHA患者紅細胞輸注的研究報告。Dwyre等[8]認為當血清中含有類同種自身抗體的患者需要輸血時，輸注抗原陰性紅細胞通常被認為是可行的，Yun等[9]報道，一個血清含抗-e類同種自身抗體患者接受一個單位的e抗原陽性紅細胞輸注，沒有發(fā)生急性溶血性輸血反應或其他嚴重的輸血反應。Issitt等[5]認為，如果患者血清含有類同種自身抗體，可能沒有必要提供抗原陰性紅細胞。但向東等[10]則認為如果檢出類同種自身抗體，而患者紅細胞卻存在對應抗原，則選擇避開含該抗原的紅細胞輸注，而不考慮患者自身相應的血型。在本研究中，我們給5名血清中含有類同種自身抗體患者輸注 “最少不相容”紅細胞，我們沒有觀察任何臨床癥狀表明嚴重急性或延誤溶血性輸血反應，與Das等[11]的研究相符。此外，我們發(fā)現(xiàn)了即使血清中含有高濃度類同種自身抗體的患者接受大量“最少不相容”紅細胞輸注后，仍然沒有嚴重急性和延遲溶血性輸血反應發(fā)生。因此，我們認為類同種自身抗體AIHA患者可能不引起急性或延遲溶血性輸血反應。

因此，我們認為如果AIHA患者血清中只含有類同種自身抗體，不一定要輸注抗原陰性紅細胞，但對于含有同種抗體的患者，應該輸注抗原陰性紅細胞。

[1]Michel M.Classification and therapeutic approaches in autoimmune hemolytic anemia:An update[J].Expert Rev Hematol,2011,4(6):607-618.

[2]朱劍熒,胡利亞,蘭炯采,等.自身抗體Rh血型特異性4例[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2009,27(2):205.

[3]Bercher ME．TechnicaI Manual．15th[M]．Bethesda：American Association of Blood Banks，2005：783-784．

[4]Fundenberg HH,Rosenfield RE,Wasserman LR.Unusual specificity of auto-antibody in auto-immune hemolytic diseases[J].J Mt Sinai Hosp N Y,1958,25(4):324-329.

[5]Issitt PD,Combs MR,Bumgarner DJ,et al.Studies of antibodies in the sera of patients who have made red cell autoantibodies[J].Transfusion,1996,36(6):481-486.

[6]Wheeler CA,Calhoun L,Blackall DP.Warm reactive autoantibodies:clinical and serologic correlations[J].Am J Clin Pathol,2004,122(5):680-685.

[7]Jang MJ,Cho D,Park KU,et al.Autoantibodies with mimicking specificity detected by the dilution technique in patients with warm autoantibodies[J].Ann Lab Med，2013,33(5):343-348.

[8]Dwyre DM,Clapper A,Heintz M,et al.A red blood cell autoantibody with mimicking anti-E specificity[J].Transfusion,2004,44(9):1287-1292.

[9]Yun HK,Cho D,Chae MJ,et al.No hemolytic transfusion reactions in a patient with the apparent anti-e autoantibody following transfusion of packed red cells with CcDEe phenotype[J].Korean J Blood Transfus,2007,18(3):116-120.

[10]向東,劉曦,王健蓮,等.紅細胞溫自身抗體的血清學特點分析及配血對策[J].中國輸血雜志,2008,21(12):926-927.

[11]Das SS,Zaman RU,Safi M.Incompatible blood transfusion:Challenging yet lifesaving in the management of acute severe autoimmune hemolytic anemia[J].Asian J Transfus Sci,2014,8(2):105-108.