連翹的加速穩(wěn)定性試驗研究

姜 濤，張立偉

（1.吉林醫(yī)藥學院，吉林吉林132013；2.山西大學分子科學研究所，山西太原030006）

連翹的加速穩(wěn)定性試驗研究

姜 濤1，2，張立偉2

（1.吉林醫(yī)藥學院，吉林吉林132013；2.山西大學分子科學研究所，山西太原030006）

目的：對連翹藥材穩(wěn)定性進行評價。方法：利用溫度（40±2）℃，相對濕度75%為加速條件，以薄層鑒別、雜質(zhì)、水分、總灰分、浸出物及含量測定為指標，對連翹炮樣品進行加速穩(wěn)定性試驗。結果：連翹在加速條件下，6個月各項指標均穩(wěn)定，無明顯改變。結論：連翹炮制品穩(wěn)定性較好。

連翹；穩(wěn)定性；連翹苷；連翹酯苷A

穩(wěn)定性試驗目的是考察原料藥或者藥物制劑在溫度、濕度、光線的影響下隨著時間變化的規(guī)律，為藥品的生產(chǎn)、包裝、貯存及運輸條件提供了科學依據(jù)，同時通過試驗建立了藥品的有效期。而加速穩(wěn)定性試驗是在加速條件下進行的。其目的是通過加速藥物的化學或者物理變化，探討藥物的穩(wěn)定性，為其制劑設計、包裝、運輸、貯存提供必要的資料［1］。在過去的研究中，一般僅僅對原料藥或藥物制劑進行穩(wěn)定性試驗［2-3］。連翹，作為一種中藥材，被用于多種中藥成方制劑，它的穩(wěn)定性直接影響了制劑的質(zhì)量穩(wěn)定。目前，對于連翹飲片還沒有系統(tǒng)的穩(wěn)定性研究，本實驗將對采用沸水煮8min，加水量為6倍炮制方法炮制的三批連翹樣品及連翹生品進行穩(wěn)定性試驗，以薄層鑒別、雜質(zhì)、水分、總灰分、浸出物及含量測定為評價指標，對其穩(wěn)定性進行評價。

1 實驗材料及儀器

Agilent 1200高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RE52（上海亞榮生化儀器廠）；Sarturius-BS110S分析天平（北京賽多利斯天平有限公司）；SK22OOH超聲波提取器（上?？茖С晝x器有限公司）；數(shù)顯鼓風干燥箱（上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設備廠）；恒溫水浴鍋（余姚市東方電工儀器廠）；馬弗爐（沈陽市節(jié)能電爐廠）；HZS-H水浴振蕩器（哈爾濱市東聯(lián)電子技術開發(fā)有限公司）；連翹苷（批號：110821-201112，中國藥品生物制品檢定所）；連翹酯苷A（批號：111810-201102，中國藥品生物制品檢定所）；乙腈，冰醋酸（均為色譜純，天津市科密化學試劑開發(fā)中心）；連翹（采于山西省黎城縣）；其它試劑均為分析純，所用水均為哇哈哈純凈水。

2 實驗方法

2.1 實驗樣品：采用沸水煮8min，加水量為6倍炮制方法炮制的三批連翹樣品及連翹生品作為實驗材料，見表1。

表1 連翹樣品統(tǒng)計表Tab.1 The statistical table of Forythia Suspensa（Thunb.）Vahl

2.2 加速條件：采用溫度（40±2）℃，相對濕度75%的條件下保存。分別在第1個月、2個月、3個月、6個月各取樣一次，并按照檢測項目進行考察。

2.3 檢測指標及方法

2.3.1 薄層鑒別：稱取連翹粉末1g，加石油醚20ml，密塞，采用超聲處理15min，濾過，棄去石油醚提取液，殘渣揮干石油醚，再加甲醇20ml，密塞，用超聲處理20min，濾過，得到的濾液蒸干，殘渣加甲醇10ml溶解，作為供試品溶液。另稱取一份連翹對照藥材1g，采用相同法制成對照藥材溶液。再取連翹苷、連翹酯苷A對照品，加甲醇制成濃度為0.25mg／ml的溶液。照薄層色譜法（2010版《中國藥典》附錄VI B）試驗，分別吸取上述四種溶液各2μl，點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲酸-水（9∶2∶1）為展開劑，進行展開，取出，晾干，再噴以10%硫酸乙醇溶液，使其在105℃加熱至斑點顯色清晰。觀察在供試品色譜中，與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，是否顯相同顏色的斑點。

2.3.2 雜質(zhì)：采用2010版《中國藥典》附錄ⅨA法測定其各類雜質(zhì)重量，計算其在供試品中的含量（%）。

2.3.3 水分：稱取供試品30g，精密稱定，置于短頸園底燒瓶中，加甲苯200ml，按照藥2010版《中國藥典》附錄ⅨH第二法，檢讀水量，并計算出供試品中的含水量（%）。

2.3.4 總灰分：取供試品約2g，按照藥2010版《中國藥典》附錄ⅨH法操作，根據(jù)殘渣重量，計算供試品中總灰分的含量（%）。

2.3.5 浸出物：取供試品約4g，按照藥2010版《中國藥典》附錄ⅩA法操作，并計算供試品中醇溶性浸出物的含量（%）。

2.3.6 含量測定［4］：色譜柱選用Agela Venusil XBP-C18（2）（5μm，100，4.6×250nm）；以乙腈（A）-0.3%醋酸溶液（B）為流動相，梯度洗脫，0～5 min，85%～83% A，5～10 min，83%～80%A，10～15min，80%～77%A，15～20 min，77%～75%A，選擇流速0.8 ml／min；柱溫為25℃；波長230 nm。精密稱取連翹酯苷A對照品，加甲醇制成濃度為0.1mg／ml的對照品溶液，需臨用配制，避光保存。精密稱取連翹苷對照品，加甲醇制成每濃度為0.2 mg／ml的對照品溶液。取本品粉末（過三號篩）約1.0g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，加入70%甲醇30ml，稱重，采用超聲處理30min（250 W，40 kHz），放冷，再稱其重量，用70%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，量取續(xù)濾液0.8ml，置于5 ml的容量瓶中，用70%甲醇定容至刻度，即得供試品溶液。精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，測定，即得。

3 實驗結果

按2.3實驗方法對樣品進行考察，考察結果見表2～4。

表2 穩(wěn)定性試驗結果（1）Tab.2 The result of stability test（1）

表3 穩(wěn)定性試驗結果（2）Tab.3 The result of stability test（2）

表4 穩(wěn)定性試驗結果（3）Tab.4 The result of stability test（3）

實驗結果表明，連翹炮制品在加速條件下，6個月各項指標均穩(wěn)定，無明顯改變，由此初步確定保質(zhì)期為2年［5-6］。

4 討論

通過對連翹炮制樣品6個月的加速穩(wěn)定性考察，結果發(fā)現(xiàn)連翹酯苷A及浸出物含量隨時間逐漸減小，但減小的趨勢并不明顯，而連翹苷等其他指標幾乎無變化。由此可知連翹樣品中連翹苷穩(wěn)定性較連翹酯苷A好。

［1］中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）［S］.北京，中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄199-200.

［2］張立偉，楊頻.連翹酯苷穩(wěn)定性研究［J］.中成藥，2003，25（5）：353-356.

［3］王曙賓，鄭亞杰.連翹提取物和連翹酯苷A原料中連翹酯苷A的穩(wěn)定性研究［J］.中草藥，2010，41（6）：909-911.

［4］許佳.青翅的質(zhì)量標合理采收期初步研究［D］.太原：山西大學，2013.

［5］衛(wèi)生部藥政局.中藥新藥研究指南［M］.1994：21-48.

［6］國家藥品監(jiān)督管理局.中藥新藥研究的技術要求［M］.1999：16-19.

R284

B

1002-2376（2015）10-0101-02

2015-08-09

山西省科技攻關，20140313021-3；山西省國際合作項目，2014081049-1.