IL－10基因－592A／C單核苷酸多態(tài)性對替西羅莫司干預(yù)的膀胱癌患者預(yù)后的影響

肖 郁

（長春市中心醫(yī)院，吉林長春130051）

IL－10基因－592A／C單核苷酸多態(tài)性對替西羅莫司干預(yù)的膀胱癌患者預(yù)后的影響

肖 郁

（長春市中心醫(yī)院，吉林長春130051）

在我國的泌尿生殖系腫瘤中，膀胱癌發(fā)病率占第一位［1］。膀胱癌具有多發(fā)病灶和術(shù)后高復(fù)發(fā)率的特征，而術(shù)后灌注化療可有效降低術(shù)后復(fù)發(fā)率，改善患者預(yù)后和提高生存率［2］。膀胱癌患者的復(fù)發(fā)與膀胱癌治療過程中出現(xiàn)的耐藥性有相關(guān)性［3］。替西羅莫司（CCI－779）作為雷帕霉素抗癌衍生物，對癌癥有顯著的療效［4］。因此，通過檢測膀胱癌IL－10單核苷酸基因多肽性，對不同基因型的患者的生存率進(jìn)行分析及其對預(yù)后的影響。

1 材料和方法

1.1 組織標(biāo)本

2011－2013年長春市中心醫(yī)院泌尿外科膀胱癌患者組織標(biāo)本46例，以病理為基礎(chǔ)分組，其中手術(shù)治療組18例，術(shù)后化療治療組28例。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

通過PCR方法檢測組織樣本中提取的全基因組DNA，IL－10基因啟動(dòng)子區(qū)序列。

PCR引物：

antisense：5′－TGAGAAATAATTGGGTCCCC－3′

sense：5′－CCTGTGACCCCGCCTGTC－3′

擴(kuò)增片斷為：285bp［5］。

PCR體系10μl，循環(huán)參數(shù)：95℃預(yù)變性5min，94℃變性45s、61℃復(fù)性45s、72℃延伸5min，循環(huán)25次，72℃延伸10min，4℃停止。產(chǎn)物通過軟件Chromas處理。測序后，－592位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)A／C突變。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

用SPSS11.5軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。組間數(shù)據(jù)比對采用方差分析，雙側(cè)檢驗(yàn)P＜0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著差異。通過Kaplan-Meier分析方法，研究不同基因型對生存時(shí)間的影響，log－rank檢驗(yàn)存活率的組間比較，患者生存期的計(jì)算以第一次手術(shù)為起始。

2 結(jié)果

2.1 膀胱癌IL－10基因型分析

對46例膀胱癌患者組織檢測IL－10基因啟動(dòng)子區(qū)－592位點(diǎn)的基因多態(tài)性，發(fā)現(xiàn)27例（59%）為A／C基因型，19例患者（41%）為C／C基因型，未檢測出A／A基因型，結(jié)果見表1。

表1 A／C單核甘酸多態(tài)性測序結(jié)果

2.2 IL－10基因－592 A／C多態(tài)性對膀胱癌患者生存期的影響

經(jīng)對46例膀胱癌患者尋訪，平均生存期為20.5月。手術(shù)治療的患者18例平均生存期16.9月，術(shù)后替西羅莫司治療的患者28例平均生存期為23.6月（P＜0.05）。經(jīng)測序后，發(fā)現(xiàn)IL－10－592A／C基因型與IL－10－592C／C基因型患者的平均生存期分別為24.6月、17.5月（P＝0.161）。根據(jù)數(shù)據(jù)顯示：IL－10基因的－592位點(diǎn)A／C基因型與C／C基因型相比，A／C基因型對膀胱癌患者的生存期影響更大。

2.3 IL－10基因－592 A／C多態(tài)性對CCI－779治療的膀胱癌患者的生存期影響

在28例CCI－779治療的患者的組織中，IL－10－592A／C基因型為15例，IL－10－592C／C基因型為13例，兩組的平均生存期分別為24.2月、15.1月（P＝0.046）。根據(jù)數(shù)據(jù)顯示：IL－10－592A／C基因?qū)πg(shù)后進(jìn)行CCI－779化療的患者生存期有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

膀胱癌是成人泌尿系常見的、極具侵襲性的腫瘤，診斷為膀胱癌的患者的平均生存期不超過五年［6］。膀胱細(xì)胞的癌變是一個(gè)復(fù)雜的過程［7］。手術(shù)治療是膀胱腫瘤最有效方法，化療是重要的輔助治療手段，對放療敏感的患者，化療也是很好的聯(lián)合方法［8］。盡管，替西羅莫司在臨床的應(yīng)用中有較良好反應(yīng)，但也具有同其他化療藥物一樣的耐藥性。

本研究提示IL－10－592A／C基因型對膀胱癌患者的生存期有較大的影響。在28例替西羅莫司治療的患者組織中，A／C基因型與C／C基因型患者的組織樣本相對平衡（分別為15、13例），并經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，顯示兩組生存期有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.046）。在46例膀胱癌患者的組織研究中，IL－10－592A／C基因型顯著增高，不能排除這種現(xiàn)象是由樣本數(shù)量較少或種族差異引起。

盡管在少量樣本中進(jìn)行單核苷酸多肽性分析，其效果可能不能充分顯現(xiàn)，然而在相對平衡、前后對比的樣本數(shù)據(jù)中，卻有利于對影響患者生存期的因素分析。

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2014－01－26）

1007－4287（2015）02－0279－02