乳頭狀甲狀腺癌中KISS－1、VEGF－C的表達及與臨床病理的關(guān)系

李學慶，黨永巖，湯承輝，孫曉紅，候益民，史永照

（1.上海市第五人民醫(yī)院普外科，上海200240；2.華東師范大學生命學院，上海200241）

乳頭狀甲狀腺癌中KISS－1、VEGF－C的表達及與臨床病理的關(guān)系

李學慶1，黨永巖2，湯承輝1，孫曉紅1，候益民1，史永照1

（1.上海市第五人民醫(yī)院普外科，上海200240；2.華東師范大學生命學院，上海200241）

目的研究乳頭狀甲狀腺癌中KISS－1、VEGF－C的表達及與臨床病理的關(guān)系。方法選取2012年7月到2013年7月我院收集的乳頭狀甲狀腺癌病理標本60例（研究組），另選取正常甲狀腺組織30例（對照組），應(yīng)用免疫組織化學SP法測定KISS－1、VEGF－C在兩組中的表達情況，并分析其與臨床病理的關(guān)系。結(jié)果研究組KISS－1陽性者顯著少于對照組，VEGF－C陽性者顯著多于對照組，兩組比較差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；KISS－1、VEGF－C在乳頭狀甲狀腺癌組織的表達和腫瘤大小、臨床分期以及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，且差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），KISS－1、VEGF－C的表達和年齡、性別無關(guān)，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結(jié)論KISS－1、VEGF－C的表達和乳頭狀甲狀腺癌存在一定關(guān)系，且和腫瘤的大小、臨床分期以及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。

乳頭狀甲狀腺癌；KISS－1；VEGF－C；臨床病理

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0223）

乳頭狀甲狀腺癌是甲狀腺癌最常見的類型，其惡性程度較輕，但若存在血管侵犯，則應(yīng)該擴大手術(shù)范圍，進而延長患者壽命。但是如何觸診乳頭狀甲狀腺癌頸部淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況，進而制定合理的手術(shù)方式，需要有可靠的診斷依據(jù)。本研究旨在分析KISS－1、VEGF－C在乳頭狀甲狀腺癌中的表達，并且分析其和乳頭狀甲狀腺癌臨床病理的關(guān)系，進而為選擇合適的手術(shù)方式做準備，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年7月到2013年7月我院收集的乳頭狀甲狀腺癌病理標本60例（研究組），另選取正常甲狀腺組織30例（對照組），所有患者實施手術(shù)前均未進行任何的治療，且入選病例均有較完整的臨床資料和病理學資料。研究組男性21例，女性39例，年齡介于23－69歲，平均年齡為（58.3±0.8）歲，臨床分期Ⅰ期者19例，Ⅱ期者23例，Ⅲ期者16例，IV期者2例，腫瘤直徑超過1cm者38例，低于1cm者22例，有頸部轉(zhuǎn)移者22例，無頸部轉(zhuǎn)移者38例。對照組男性11例，女性19例，年齡介于23－70歲，平均年齡為（58.4±0.6）歲。兩組一般情況比較無顯著差異（P＞0.05），具有可比性，研究經(jīng)倫理委員會批準，所有入選者均知情同意并簽訂知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 試劑 選取濃縮型兔抗人KISS－1型蛋白單克隆抗體（由美國Santa Cruz Biotechnology inc生產(chǎn)），且經(jīng)預(yù)實驗確定其濃度是1∶50；采用即用型的兔抗人VEGF－C的多克隆抗體（由美國Santa Cruz Biotechnology inc生產(chǎn)）。

1.2.2 試驗方法 入選的組織標本均應(yīng)用10%的中性福爾馬林溶液固定，然后應(yīng)用蠟塊包埋，然后將組織以4μm的厚度連續(xù)切片，應(yīng)用SP免疫組化技術(shù)檢測組織中KISS－1、VEGF－C的表達情況。檢測操作均根據(jù)試劑盒上的說明書進行，并且由經(jīng)驗豐富的專業(yè)人員操作。

1.3 檢測結(jié)果評價標準

KISS－1主要的著色位于細胞漿中，呈棕褐色或者棕黃色顆粒。高倍鏡下有低于10%陽性細胞數(shù)目即為陰性（－）；陽性細胞數(shù)目超過10%則為陽性（＋）；VEGF－C主要于細胞漿中著色，其陽性的染色部分呈現(xiàn)棕黃色，高倍鏡下有低于10%陽性細胞數(shù)目即為陰性（－）；陽性細胞數(shù)目超過10%則為陽性（＋）。

1.4 統(tǒng)計學方法

全部數(shù)據(jù)均在SPSS17.0軟件上統(tǒng)計，計數(shù)資料應(yīng)用χ2檢驗，檢驗標準以P＜0.05表示有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組KISS－1、VEGF－C的表達情況比較

研究組KISS－1陽性者顯著少于對照組，VEGF－C陽性者顯著多于對照組，兩組比較差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組KISS－1、VEGF－C的表達情況比較（例，%）

2.2 KISS－1、VEGF－C表達水平和臨床病理的關(guān)系

KISS－1、VEGF－C在乳頭狀甲狀腺癌組織的表達和腫瘤大小、臨床分期以及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，且差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），KISS－1、VEGFC的表達和年齡、性別無關(guān)，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 KISS－1、VEGF－C表達水平和臨床病理的關(guān)系（例，%）

3 討論

甲狀腺癌的發(fā)病率較高，其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。乳頭狀甲狀腺癌是主要類型的甲狀腺癌，據(jù)統(tǒng)計，該類型大約占80%－90%。乳頭狀甲狀腺癌的主要轉(zhuǎn)移途徑為頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，臨床觸診檢測腫瘤是否發(fā)生轉(zhuǎn)移的誤診率較高，即使觸診不到腫大的頸部淋巴結(jié)其轉(zhuǎn)移率仍高達64.3%。且臨床上缺乏較準確的分子診斷方法。KISS－1是一種腫瘤轉(zhuǎn)移的抑制基因，該基因位于染色體的Iq32－q41區(qū)，是由4個外顯子構(gòu)成的，編碼145個氨基酸構(gòu)成的蛋白質(zhì)。KISS－1主要表達于正常的組織，或者是未出現(xiàn)轉(zhuǎn)移的細胞組織中表達，而腫瘤出現(xiàn)轉(zhuǎn)移時會缺失。據(jù)報道，該物質(zhì)在乳腺癌、食管癌以及胃癌等惡性腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中缺失，KISS－1抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的主要機制為：KISS－1和受體作用以后會抑制腫瘤細胞的增殖、轉(zhuǎn)移和趨化，KISS－1基因缺乏可能與活化的腫瘤細胞侵襲粘附有關(guān)，進而促進腫瘤的轉(zhuǎn)移。本研究發(fā)現(xiàn)，研究組KISS－1陽性表達陽性率顯著高于對照組，和其他研究結(jié)果具有一致性，提示KISS－1在乳頭狀甲狀腺癌中表達較少。

VEGF－C是淋巴管的生成因子，該物質(zhì)的基因定位在4q34中，是一種近期發(fā)現(xiàn)的血管內(nèi)皮生長因子家族中的，該物質(zhì)由腫瘤細胞分泌，和其受體結(jié)合作用以后，可以引起淋巴管增生。有研究顯示，VEGF－C作用于淋巴管內(nèi)皮細胞，誘導內(nèi)皮細胞發(fā)生較強的有絲分裂，促進腫瘤細胞的淋巴管生成。而淋巴管形成是惡性腫瘤出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)。本研究發(fā)現(xiàn)，研究組VEGF－C表達陽性顯著高于對照組，提示乳頭狀甲狀腺癌患者中VEGF－C表達較正常組織高。且研究還發(fā)現(xiàn)，KISS－1、VEGF－C在乳頭狀甲狀腺癌組織的表達和腫瘤大小、臨床分期以及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，且差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），KISS－1、VEGF－C的表達和年齡、性別無關(guān)，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），提示KISS－1、VEGFC的表達和腫瘤大學、臨床分期以及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在密切的關(guān)系。但是兩者的表達均和年齡、性別無關(guān)。

綜上所述，乳頭狀甲狀腺癌組織中會出現(xiàn)KISS－1表達缺失和VEGF－C的異常表達，且兩者的表達和腫瘤大小、臨床分期以及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，而與年齡、性別無關(guān)，提示KISS－1和VEGF－C可以用來篩選是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，進而為臨床選擇治療方案提供依據(jù)。

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The expression and relationship with clinical pathology of KISS－1，VEGF－C in papillary thyroid carcinoma

LI Xue－qing1，DANG Yong－yan2，TANG Cheng－h(huán)ui1，et al.（1.Department of general surgery，The Fifth People＇s Hospital of Shanghai，Shanghai 200240，China；2.School of Life，East China Normal University，Shanghai 200241，China）

ObjectiveTo study the expression and relationship with clinical pathology of KISS－1，VEGF－C in papillary thyroid carcinoma.Methods60cases（the study group）pathological specimens of papillary thyroid carcinoma were collected from our hospital during the period from July 2012to July 2013，30cases（the control group）normal thyroid tissue were also collected，the expression of two groups of KISS－1，VEGF－C were measured in immunohistochemical SP method，and to analyze its relationship with clinical pathology.ResultsThe KISS－1positive of the study group were significantly less than the control group，VEGF－C positive of the study group were significantly more than the control group，the difference was statistically significant（P＜0.05）；the expression of KISS－1，VEGF－C in papillary thyroid carcinoma had relationship with tumor size，clinical stage and lymph node metastasis，the difference was statistically significant（P＜0.05），the expression of KISS－1，VEGF－C had no relationship with age and sex，the difference was no statistically significant（P＞0.05）.ConclusionThe expression of KISS－1，VEGF－C had relationship with papillary thyroid carcinoma，and had relationship with tumor size，clinical stage and lymph node metastasis.

Papillary thyroid carcinoma；KISS－1；VEGF－C；Clinical Pathology

R736.1

A

李學慶（1970－），男，本科學歷，副主任醫(yī)師，從事乳腺甲狀腺方向的研究。

2014－02－20）

1007－4287（2015）02－0223－03