Ezrin和E－cadherin在宮頸癌中的表達(dá)及其相關(guān)性探討

呂紅梅，魏雙梅

（1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院，黑龍江佳木斯154002；2.佳木斯市婦幼保健院）

Ezrin和E－cadherin在宮頸癌中的表達(dá)及其相關(guān)性探討

呂紅梅1，魏雙梅2

（1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院，黑龍江佳木斯154002；2.佳木斯市婦幼保健院）

目的 探討Ezrin和E－cadherin在宮頸癌中的表達(dá)情況及其相關(guān)性。方法 隨機(jī)選擇的50例宮頸癌組織作為宮頸癌組（A組）、50例宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）組織作為CIN組（B組）以及50例正常宮頸組織作為對照組（C組），用免疫組織化學(xué)法（S－P法）進(jìn)行Ezrin和E－cadherin的表達(dá)情況檢測。并將表達(dá)情況與臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果 Ezrin和E－cadherin在A、B、C三組中的陽性表達(dá)率分別為74.0%、36.0%、18.0%和32.0%、64.0%、90.0%，組間比較具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）；Erzin和E－cadherin在宮頸癌組織中的陽性表達(dá)與組織分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有顯著相關(guān)性（P＜0.05）；Erzin和E－cadherin在宮頸癌中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r＝－0.393，P＜0.05）。結(jié)論 Ezrin及E－cadherin的異常表達(dá)共同促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的浸潤及轉(zhuǎn)移，可以作為初步預(yù)測宮頸癌預(yù)后的指標(biāo)。

宮頸癌；Ezrin；E－cadherin；免疫組織化學(xué)法

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0937）

腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是一個錯綜復(fù)雜的過程，其中腫瘤細(xì)胞對人體的侵襲及轉(zhuǎn)移則是導(dǎo)致病情惡化的主要原因［1］。埃茲蛋白（Ezrin）作為一種膜－細(xì)胞骨架連接蛋白，可以同上皮鈣粘蛋白（E－cadherin）相互作用，參與腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移［2］。本次研究探討Ezrin和E－cadherin在宮頸癌中的表達(dá)情況，以及二者與臨床病理各參數(shù)之間的規(guī)律?，F(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選取2013年1月至12月，佳木斯婦幼保健院收治的，經(jīng)病理檢查確診為宮頸癌的患者50例作為A組，年齡范圍26－62歲，平均年齡（52.3±5.7）歲，其中≥45歲者34例，＜45歲者16例，鱗狀細(xì)胞癌40例，腺癌10例；高、中分化者31例，低分化者19例；伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者24例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者26例；Ⅰ－Ⅱa期22例，Ⅱb－Ⅳ期28例，分期標(biāo)準(zhǔn)采用2009年國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）制定的宮頸癌臨床分期標(biāo)準(zhǔn)。另選同時段宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）患者50例作為B組，年齡范圍24－60歲，平均年齡（54.1±4.4）歲，因非腫瘤原因行子宮切除術(shù)的患者50例作為C組，年齡范圍25－64歲，平均年齡（53.8±5.2）歲。三組患者在一般臨床資料上不存在顯著差異（P＞0.05）。A組患者均為首次診斷有且只有宮頸癌，之前未接受過其它任何方式的治療。

1.2 研究方法 將采集到的標(biāo)本切成厚3μm的切片，每例標(biāo)本3張。采用免疫組織化學(xué)法（S－P法）對宮頸癌組織、CIN組織和正常宮頸組織中Ezrin和E－cadherin的表達(dá)情況進(jìn)行檢測。一抗采用兔抗人的Ezrin單克隆抗體和鼠抗人的E－cadherin單克隆抗體，C組切片采用磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗。SP試劑盒和DAB顯色液均購自江蘇安惠生物科技有限公司。所有操作均嚴(yán)格按照說明書上進(jìn)行。

1.3 染色結(jié)果判定 Ezrin和E－cadherin蛋白主要在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)，少數(shù)在細(xì)胞膜上表達(dá)，以細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜上出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性表達(dá)。判斷標(biāo)準(zhǔn)為：每張切片隨機(jī)選擇4個互不重疊的400倍視野，每個視野計數(shù)100個細(xì)胞中染色細(xì)胞數(shù)目，每例標(biāo)本計算3張切片共12個視野的平均染色細(xì)胞數(shù)：按染色細(xì)胞百分率分：陽性細(xì)胞數(shù)≤10%為0分；10%－25%為1分；25%－50%為2分；＞50%為3分。再按照陽性細(xì)胞染色強(qiáng)度，0分：為染色；1分：淡黃色；2分：棕黃色或黃褐色。將每個標(biāo)本的切片上述兩項評分相乘，結(jié)果分為4個等級［3］：陰性（－）：0分；弱陽性（＋）：1－2分；中等陽性（＋＋）：3－4分；強(qiáng)陽性（＋＋＋）：5－6分。陽性率＝陽性標(biāo)本數(shù)／該組標(biāo)本總數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 21.0軟件對所有實(shí)驗所得數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，對計數(shù)資料用χ2檢驗，對計量資料用t檢驗，組間比較采用F檢驗，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性檢驗，P＜0.05有顯著差異。

2 結(jié)果

2.1 Ezrin和E－cadherin在各組中的表達(dá)情況Ezrin在A、B、C三組中的陽性表達(dá)率分別為74.0%（37／50）、36.0%（18／50）和18.0%（9／50），組間比較具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05），而E－cadherin在A、B、C三組中的陽性表達(dá)率分別為32.0%（16／50）、64.0%（32／50）和90.0%（45／50），組間比較具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。見表1。

表1 Ezrin和E－cadherin在各組中的表達(dá)情況（n）

表2 Erzin和E－cadherin的表達(dá)與臨床資料的關(guān)系

2.2 Erzin和E－cadherin的表達(dá)與臨床資料的關(guān)系Erzin蛋白和E－cadherin蛋白在宮頸癌組織中的陽性表達(dá)與組織分化程度，以及是否有淋巴結(jié)的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移具有顯著相關(guān)性（P＜0.05），而與年齡、組織學(xué)類型和臨床分期不存在顯著相關(guān)性（P＞0.05）。見表2。

2.3 Erzin和E－cadherin在宮頸癌組織中表達(dá)的相關(guān)性 利用Spearman相關(guān)性檢驗對Erzin和E－cadherin在宮頸癌組織中表達(dá)的相關(guān)性進(jìn)行檢驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者在宮頸癌中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r＝－0.393，P＜0.05）。

3 討論

Ezrin蛋白在細(xì)胞中起到連接細(xì)胞膜和微絲、微管和中間纖維的作用［4］。Auvinen在研究中發(fā)現(xiàn)，Erzin蛋白只有在活性狀態(tài)下，才能發(fā)揮其生物學(xué)功能——即連接功能［5］。當(dāng)某些內(nèi)、外源性信號使其C端的一個保守的蘇氨酸殘基磷酸化后，便可通過肌動蛋白與細(xì)胞膜相連，而與細(xì)胞膜結(jié)合在一起的N端則與細(xì)胞表面膜蛋白連接在一起，共同調(diào)節(jié)細(xì)胞與基質(zhì)、細(xì)胞與細(xì)胞分子之間的黏附性，影響惡性腫瘤細(xì)胞侵襲性的生物學(xué)行為［6］。E－cadherin蛋白是Cadherin蛋白家族中的一員，是一種跨膜糖蛋白。陸洪軍在研究中發(fā)現(xiàn)，E－cadherin蛋白可以將同種細(xì)胞相互連接起來，起到一個粘附作用［7］。當(dāng)E－cadherin表達(dá)減少，這種作用就會減弱，當(dāng)其發(fā)生在腫瘤組織中時，會導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移更加容易。Daniele等發(fā)現(xiàn)，在高侵襲性腫瘤細(xì)胞中E－cadherin出現(xiàn)表達(dá)的減弱或消失［8］。由E－cadherin介導(dǎo)的同種細(xì)胞間的黏附功能的異常可由它自身功能的異常引起，也可由與它相連的Ezrin蛋白引起。

本次研究結(jié)果顯示：Ezrin在三組間的陽性表達(dá)率分別為74.0%、36.0%和18.0%，組間比較具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05），E－cadherin在三組間的陽性表達(dá)率分別為32.0%、64.0%和90.0%，組間比較具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。二者表達(dá)的異常貫穿于整個宮頸疾病發(fā)生發(fā)展的過程。在對兩種蛋白的陽性表達(dá)與臨床資料的相關(guān)性的分析中發(fā)現(xiàn)，兩種蛋白均與組織分化程度和是否存在淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有顯著的相關(guān)性（P＜0.05）。腫瘤組織分化程度越高，Ezrin陽性率越低，E－cadherin陽性率越高，而當(dāng)腫瘤出現(xiàn)淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移時，Ezrin的陽性表達(dá)顯著升高，而E－cadherin的陽性表達(dá)卻顯著降低，這與El Hamdani的研究結(jié)果一致［9］。經(jīng)Spearman等級相關(guān)分析證實(shí)，二者的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r＝－0.393，P＜0.05），充分提示激活后的Ezrin蛋白可以使E－cadherin蛋白從細(xì)胞膜轉(zhuǎn)移到細(xì)胞內(nèi)，造成胞內(nèi)蓄積，導(dǎo)致同種細(xì)胞間黏附能力下降，共同促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵潤及轉(zhuǎn)移，促進(jìn)宮頸癌的發(fā)生及發(fā)展［10］。提示Ezrin及E－cadherin在腫瘤細(xì)胞侵襲發(fā)展中具有著一定的作用，二者的異常表達(dá)可能提示著患者的預(yù)后不良。

綜上，Ezrin及E－cadherin的異常表達(dá)共同促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的浸潤及轉(zhuǎn)移，可以作為初步預(yù)測宮頸癌預(yù)后的指標(biāo)。

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To investigate the expression and correlation of Ezrin and E－cadherin in cervical cancer

LüHong－mei1，WEI Shuangmei2.（1.Heilongjiang University of Chinese Medicine Jiamusi College，Jiamusi 154002，China；2.Jiamusi Maternal and Child Health Hospital Jiamusi）

Objective To investigate Ezrin and E－cadherin expression in cervical carcinoma and their correlation.Methods 50patients of cervical carcinoma were randomly selected as cervical carcinoma group（A group），50patients of cervical intraepithelial neoplasia（CIN）were selected as CIN group（B group）and 50patients of normal cervical tissues were selected as control group（group C）.Using immunohistochemical method（S－P method）to test the Ezrin and E－cadherin’s expression and the expression with the clinical data for statistical analysis.Results The positive expression of Ezrin and E－cadherin in A，B，C groups were respectively 74%，36%，18%and 32%，64%，90%，comparison between groups with statistical difference（P＜0.05）；Erzin and E－cadherin expression in cervical cancer tissues and tissue differentiation and lymph node metastasis was significantly associated with（P＜0.05）；negatively correlated with expression of Erzin and E－cadherin in cervical cancer（R＝0.393，P＜0.05）.Conclusion The abnormal expression of Ezrin and E－cadherin can promote the invasion and metastasis of tumor cells，can be used as a preliminary prediction index of prognosis of cervical cancer.

Cervical cancer；Ezrin；E－cadherin；Immunohistochemical method

R737.33

A

呂紅梅（1974－），女，主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士，主要研究方向：腫瘤病理。

2014－08－09）

1007－4287（2015）06－0937－03