雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦對糖尿病腎病患者足細胞損傷的影響

劉建林等

[摘要] 目的 探討雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦對糖尿病腎病患者足細胞損傷的保護作用。 方法 選擇糖尿病腎病患者80例為研究對象，隨機分為A組、B組、C組和D組，所有患者均予積極控制血糖等治療，同時A組給予厄貝沙坦聯(lián)合雷公藤多苷片治療，B組給予雷公藤多苷片治療，C組給予厄貝沙坦治療。比較各組患者治療前后足細胞數(shù)量及尿中CTGF、TGF-β、OPN、BMP7等濃度。 結(jié)果 治療后4組尿蛋白、足細胞數(shù)、CTGF、TGF-β、OPN均顯著下降，BMP-7較治療前顯著升高（P均<0.01或0.05）。并且A組、B組和C組治療后尿蛋白、足細胞數(shù)、CTGF、TGF-β、OPN均顯著低于D組，BMP-7顯著高于D組（P均<0.01）。尿足細胞數(shù)量與尿蛋白呈正相關(guān)的關(guān)系，兩者與CTGF 、TGF-β、OPN均具有正相關(guān)的關(guān)系，與BMP-7呈負相關(guān)的關(guān)系（P均<0.01）。 結(jié)論 雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦治療糖尿病腎病，具有保護腎臟足細胞的作用。

[關(guān)鍵詞] 雷公藤多苷；糖尿病腎??；足細胞

[中圖分類號] R587.2 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2015）15-0076-03

[Abstract] Objective To discuss effect of Tripterygium glycosides combined with Irbesartan on podocyte injury in diabetic nephropathy. Methods All 80 cases with diabetic nephropathy were selected as subjects， and were divided into group A， group B， group C and group D. Based on active control of blood sugar and other treatment，group A was treated with Tripterygium glycosides combined with Irbesartan， group B was treated with Tripterygium glycosides， and group C was treated with Irbesartan. Sufficient number of cells， and urinary CTGF， TGF-β， OPN， BMP-7 concentration were compared. Results After treatment， proteinuria， podocyte number， CTGF， TGF-β， OPN of four group were decreased apparently， and BMP-7 was increased（P all<0.01 or 0.05）. Proteinuria， podocyte number， CTGF， TGF-β， OPN of group A， B， C were lower than group D， and BMP-7 was higher than group D（P all <0.01）. Urinary podocyte number and urine protein were positively correlated with each other， and urinary podocyte number and urine protein were positively correlated with CTGF， TGF-β，OPN， negative correlated with BMP-7（P all <0.01）. Conclusion Tripterygium glycosides combined with Irbesartan for diabetic nephropathy has a role in protecting the kidney podocytes.

[Key words] Tripterygium glycosides； Diabetic nephropathy； Podocyte

目前關(guān)于糖尿病腎病發(fā)病的治療缺乏針對性。足細胞功能損傷或者丟失會通過多種機制導(dǎo)致大量蛋白尿的發(fā)生，最終導(dǎo)致腎小球硬化，終末期腎病[1]。糖尿病腎病患者尿液中可檢測到脫落的足細胞，為尿沉渣圖片檢測足細胞提供了可能性[2]。研究顯示，雷公藤多苷能夠減少多種腎小球疾病的蛋白尿情況，其主要成分是雷公藤甲素，體外實驗顯示其具有穩(wěn)定足細胞骨架、逆轉(zhuǎn)足細胞損傷、修復(fù)其骨架結(jié)構(gòu)及相關(guān)分子表達的功能[3]。本研究分析雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦對糖尿病腎病患者足細胞損傷的影響?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014年1～12月在我院治療的糖尿病腎病患者80例為研究對象，其中男44例，女36例，年齡51～74歲，平均（61.1±7.4）歲。納入標準：所有患者均確診為糖尿病腎病，血Cr低于126 μmol/L，24 h尿蛋白超過0.15 g，糖化血紅蛋白低于10%，空腹血糖低于8 mmol/L，餐后2 h血糖低于12 mmol/L。排除標準：1型糖尿病，其他系統(tǒng)嚴重疾病的患者。80例患者隨機分為A組、B組、C組和D組，每組20例。4組患者的一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2治療方法

4組患者均采用胰島素控制血糖治療，合并高血壓的患者控制高血壓。在此基礎(chǔ)上，A組給予厄貝沙坦（Sanofi Winthrop Industrie，國藥準字J20080061， 300 mg/d，每天1次口服）聯(lián)合雷公藤多苷片治療（湖南協(xié)力藥業(yè)有限公司，國藥準字Z43020138，每天每公斤體重1 mg計算服用量，分3次飯后口服）。B組給予雷公藤多苷片治療，C組給予厄貝沙坦300 mg/d治療，用法用量同A組。D組僅給予基礎(chǔ)治療。所有患者療程12周。

1.3 療效評價

測定治療前后患者24 h尿蛋白定量，留取24 h尿，加防腐劑混勻后，取10 mL送檢，采用全自動生化分析儀檢測。測定治療前后尿結(jié)締組織生長因子（CTGF）、尿骨形成蛋白-7（BMP-7）、尿骨橋蛋白（OPN）、尿轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β），采用雙抗體夾心法檢測，在酶標儀450nm波長測定吸光度，計算濃度。尿沉渣查足細胞量，采用簡潔免疫熒光法檢測，在熒光顯微鏡下，足細胞呈現(xiàn)為圓形或者橢圓形，大小不一，胞體為翠綠色熒光，細胞核淡然，選擇全片左上、左下、右上、右下、中不同部位共20個高倍鏡視野，記錄足細胞數(shù)，根據(jù)稀釋體積計算尿足細胞數(shù)，單位個/mL。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS11.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析。計量資料用均數(shù)±標準差表示，采用t檢驗或者F檢驗。相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1治療前后患者24 h尿蛋白、足細胞數(shù)、CTGF、TGF-β、OPN、BMP-7水平

見表2。治療后4組尿蛋白、足細胞數(shù)、CTGF、TGF-β、OPN均顯著下降，BMP-7較治療前顯著升高（P均<0.01或P<0.05）。并且A組、B組和C組治療后尿蛋白、足細胞數(shù)、CTGF、TGF-β、OPN均顯著低于D組，BMP-7顯著高于D組（P均<0.01）。并且以A組變化更明顯。

2.2尿足細胞數(shù)量、尿蛋白與CTGF、TGF-β、OPN、BMP-7水平相關(guān)性

見表3。尿足細胞數(shù)量與尿蛋白呈正相關(guān)關(guān)系，兩者與CTGF 、TGF-β、OPN均具有正相關(guān)關(guān)系，與BMP-7呈負相關(guān)關(guān)系（P均<0.01）。

3討論

足細胞位于腎小球基底膜外側(cè)，是一種高分化細胞，組成腎小球濾過屏障，足細胞功能障礙、丟失，通過血流動力學、免疫性損失、毒素、活性氧基團、藥物、細胞因子、趨化因子、病毒感染、代謝等多種機制而出現(xiàn)大量的蛋白尿，加速腎臟功能的損害[4，5]。實驗證實，在正常人以及糖尿病尿蛋白正?；颊叩哪蛑形礄z測到脫落的足細胞，而糖尿病蛋白尿患者則可以普遍檢測到尿中脫落的足細胞，并且多出現(xiàn)在腎臟疾病早期，提示糖尿病腎病的進展[6]?；颊甙l(fā)生明顯腎功能不全時，足細胞反而呈陰性，可能是足細胞大量減少、腎小球大部分硬化所致。足細胞是終末期分化細胞，附著于腎小球基底膜外，高度分化，與毛細血管、腎小球基底膜共同組成濾過屏障。糖尿病腎病早期，足細胞損傷主要是足突融合，隨后出現(xiàn)一系列的變化，直到足細胞脫落[7，8]。

在腎臟疾病中，足細胞數(shù)量及密度的下降與多種細胞因子具有相關(guān)性，包括CTGF（結(jié)締組織生長因子）、TGF-β（轉(zhuǎn)化生長因子-β）、OPN（骨橋蛋白）、BMP-7（骨形態(tài)發(fā)生蛋白）。CTGF是TGF-β的下游因子，兩者密切關(guān)聯(lián)，通過多種機制誘導(dǎo)足細胞損傷，導(dǎo)致腎小球硬化、腎臟細胞肥大、腎小管纖維化等[9，10]。BMPs屬于TGF-β超家族，BMP-7可減少足細胞脫落，阻斷TGF-β信號通路，抑制其產(chǎn)生，從而發(fā)揮延緩腎臟纖維化的作用。OPN是足細胞應(yīng)激調(diào)節(jié)適應(yīng)分子，參與人體炎癥免疫反應(yīng)。

雷公藤多苷對蛋白尿的近期作用比較明顯，具有祛風解毒、除濕消腫、舒筋通絡(luò)的作用，有抗炎及抑制細胞免疫和體液免疫等作用[11，12]。厄貝沙坦治療糖尿病腎病試驗（IDNT）顯示其能夠減慢慢性腎功能不全和有明顯蛋白尿患者的腎功能進展。在本研究中，4組治療后24 h尿蛋白、尿足細胞數(shù)均顯著下降，而A組下降更明顯，均顯著低于D組患者。這說明經(jīng)過控制血糖、血壓后患者24 h尿蛋白、尿足細胞數(shù)有所改善，患者腎臟損傷情況有所抑制，但是在基礎(chǔ)治療基礎(chǔ)上聯(lián)合雷公藤及厄貝沙坦治療，對患者足細胞的保護作用更明顯，也能顯著降低患者24 h尿蛋白水平。進一步分析與足細胞相關(guān)的細胞因子，結(jié)果顯示，治療后4組尿CTGF、TGF-β、OPN均顯著下降，而BMP-7顯著升高，說明治療后尿中炎癥因子CTGF、TGF-β、OPN顯著下降，而抗炎因子BMP-7顯著升高，提示雷公藤多苷可能具有抑制炎癥反應(yīng)的作用，并且能夠阻滯腎組織的纖維化過程，減少足細胞的損傷，保護腎臟功能。

雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦治療糖尿病腎病，具有保護腎臟足細胞的作用，兩者聯(lián)合使用效果優(yōu)于單用。其可能是通過抑制炎癥反應(yīng)、抑制腎組織纖維化等機制發(fā)揮減少足細胞損傷的作用。

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（收稿日期：2015-03-19）