大黃對(duì)急性應(yīng)激性胃腸黏膜病變的藥理作用機(jī)制研究

張曉紅

[摘要] 目的 探討大黃對(duì)重型顱腦損傷后應(yīng)激性胃腸黏膜病變的預(yù)防作用。 方法 45只大鼠隨機(jī)均分為三組：A組行假手術(shù)；B組制備重型顱腦損傷模型；C組造模后大黃灌胃。 結(jié)果 造模24 h后，B、C組神經(jīng)損害程度接近，但均低于A組（P<0.05）；相較B組，C組胃黏膜血流更高、胃黏膜潰瘍指數(shù)更低（P<0.05），血清胃泌素更高，組織CAT、SOD水平更高，血清AST更低（P<0.05）。潰瘍指數(shù)與胃黏膜血流、血清胃泌素、組織CAT、SOD負(fù)相關(guān)，與血清AST正相關(guān)。 結(jié)論 大黃有助于預(yù)防急性應(yīng)激性胃腸黏膜潰瘍。

[關(guān)鍵詞] 大黃；急性應(yīng)激性潰瘍；胃泌素；重型顱腦損傷；藥理學(xué)

[中圖分類號(hào)] R285 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2015）15-0011-03

[Abstract] Objective To investigate the preventive influence of rhubarb on severe head injury after stress gastrointestinal mucosa lesion. Methods All 45 adult rats were randomly divided into three groups： group A was did sham operation； group B made preparation model of severe traumatic brain injury； group C underwent gavage of rhubarb powder suspension after model. Results After 24 h modeling， neural damage degree of group B， C was close （P>0.05）， but was significantly lower than group A （P<0.05）； compared with group B， 24 h after gastric mucosal blood flow in group C was significantly higher， gastric mucosal ulcer index was significantly lower （P<0.05）； compared with group B， gastric mucosal blood flow in group C was higher， serum gastrin was higher， tissue CAT， serum SOD were significantly higher， AST were significantly lower （P<0.05）. UI were negatively correlated to ogastric mucosal blood flow， serum gastrin， tissue CAT， SOD， and positively correlated with serum AST （P<0.05）. Conclusion Rhubarb can help prevent acute stress gastrointestinal mucosa ulcer.

[Key words] Rhubarb； Acute stress ulcer； Gastrin； Severe craniocerebral injury； Pharmacology

顱腦損傷致死率極高，而顱腦損傷后急性應(yīng)激性胃腸黏膜病變是患者主要死亡因素之一，且其發(fā)生率高達(dá)91%，多因胃黏膜微循環(huán)障礙引起[1]，故臨床認(rèn)為需積極預(yù)防該并發(fā)癥。大黃為傳統(tǒng)中草藥，醫(yī)學(xué)典籍指出其有下淤血、蕩滌腸胃等功效，既往藥理學(xué)研究指出其主要作用為胃腸道，有促進(jìn)消化、改善胃黏膜血流灌注等作用[2]，可能有助于急性應(yīng)激性胃腸黏膜病變的預(yù)防。基于此，本研究以雄性SD大鼠為對(duì)象，應(yīng)用Feeney自由落體法制備模型，探討了大黃對(duì)該并發(fā)癥的預(yù)防作用及可能的預(yù)防機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為雄性SD大鼠，購(gòu)自華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院，共45只，體質(zhì)量（252±19）g，行隨機(jī)數(shù)字表法分為三組。藥劑主要為大黃粉，由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院提供，以生理鹽水混合，制備大黃懸濁液，濃度50 g/L。其他試劑還包括SOD、CAT、AST、125碘125-胃泌素試劑盒，均由南京建成生物工程研究所提供。主要儀器：超薄切片機(jī)（瑞典）、恒溫水浴鍋（天津泰斯特）、分光光度計(jì)（上海第三儀器）、激光血流儀（上海安亭）等。本研究開(kāi)展時(shí)間為2014年12月。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 造模方法 所有大鼠行顱骨開(kāi)窗術(shù)，骨窗中心位于中線旁1 mm處，直徑5 mm，術(shù)后保持硬膜完整；術(shù)后B、C組參考Feeney等設(shè)計(jì)的方案，行自由落體法制備重型顱腦損傷模型，沖擊力1000 g·cm；結(jié)束后所有大鼠行骨窗封閉術(shù)。C組在手術(shù)完畢后予大黃懸濁液10 mL/kg灌胃。

1.2.2 檢測(cè)指標(biāo) 造模24 h后，檢測(cè)如下指標(biāo)：①NSS評(píng)分；②應(yīng)用激光血流儀檢測(cè)胃賁門、幽門前后壁胃黏膜血流，取均值作為胃黏膜血流；③取胃組織，剪開(kāi)、展平，HE染色后測(cè)量潰瘍區(qū)長(zhǎng)寬，計(jì)算潰瘍指數(shù)；④取胃組織，制備勻漿液，離心后取上清，檢測(cè)SOD及CAT水平；⑤采血分離血清，檢測(cè)血清胃泌素及AST水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS19.0處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料均采用（x±s）表示，多組對(duì)比行F檢驗(yàn)，并進(jìn)一步行兩組間SNK-q檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson分析。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大鼠NSS評(píng)分變化

造模24 h后，A組NSS評(píng)分（20.4±1.6）分，明顯高于B組（14.6±1.6）分、C組（14.7±0.9）分（q=5.345、4.726；P<0.01），且B組、C組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=0.451；P>0.05）。提示顱腦損傷后應(yīng)用大黃并不會(huì)改善大鼠神經(jīng)功能缺損。

2.2 大鼠胃黏膜血流、UI變化

造模24 h后，A組胃黏膜血流明顯高于B、C組（P<0.05），且C組此指標(biāo)明顯高于B組（P<0.05）；造模24 h后，A組胃黏膜UI明顯低于B、C組（P<0.05），且C組此指標(biāo)明顯低于B組（P<0.05）。見(jiàn)表1。提示大黃有助于預(yù)防急性應(yīng)激性胃腸黏膜病變。相關(guān)性分析顯示UI與胃黏膜血流呈負(fù)相關(guān)（r=-0.382，P<0.05）。

2.3 大鼠血清胃泌素及AST水平變化

造模24 h后，A組胃泌素水平明顯高于B、C兩組（P<0.05），且C組此指標(biāo)明顯高于B組（P<0.05）；造模24 h后，A組AST水平明顯低于B、C兩組（P<0.05），且C組此指標(biāo)明顯低于B組（P<0.05）。見(jiàn)表2。提示大黃有助于抑制胃泌素下降及AST上升。相關(guān)性分析顯示UI與血清胃泌素水平呈負(fù)相關(guān)（r=-0.512，P<0.05）、與血清AST呈正相關(guān)（r=0.531，P<0.05）。

2.4 大鼠組織CAT及SOD水平變化

造模24 h后，A組CAT及SOD水平均明顯高于B、C兩組（P<0.05），且C組上述指標(biāo)明顯高于B組（P<0.05）。見(jiàn)表3。提示大黃有助于抑制CAT及SOD異常下降。相關(guān)性分析顯示UI與組織CAT及SOD水平呈負(fù)相關(guān)（r=-0.622、-0.581，P<0.05）。

3 討論

急性應(yīng)激性胃腸黏膜病變是重型顱腦損傷后常見(jiàn)并發(fā)癥，與創(chuàng)傷所致機(jī)體強(qiáng)烈應(yīng)激有關(guān)[3，4]。此應(yīng)激反應(yīng)有助于增強(qiáng)機(jī)體抗損傷能力，但可能會(huì)損傷其他功能，如藍(lán)斑-交感-腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)在創(chuàng)傷后迅速反應(yīng)，可通過(guò)強(qiáng)化中樞神經(jīng)系統(tǒng)情緒反應(yīng)，且可通過(guò)提升外周血兒茶酚胺濃度穩(wěn)定血氧循環(huán)功能；然而其亦可收縮胃及十二指腸血管，使組織供血量極具下降，影響胃黏膜微循環(huán)[5]。

本研究首先顯示模型組大鼠胃黏膜血流較A組均明顯更低，且證實(shí)胃黏膜血流與潰瘍指數(shù)存在明顯負(fù)相關(guān)性，這說(shuō)明胃黏膜微循環(huán)受到影響后，能夠促進(jìn)胃潰瘍的發(fā)生及發(fā)展。其機(jī)制可能在于：胃黏膜缺血，使上皮能量及氧供不足，碳酸氫鹽及黏液生成量下降，從而導(dǎo)致胃腸道屏障受到破壞，引發(fā)并促進(jìn)潰瘍的發(fā)生及發(fā)展。

本研究同時(shí)顯示，C組行大黃灌胃，造模24 h后胃黏膜血流顯著高于B組，潰瘍指數(shù)也相應(yīng)更低，這說(shuō)明大黃對(duì)急性應(yīng)激性胃腸黏膜病變有一定預(yù)防作用。結(jié)合本研究及其他學(xué)者研究結(jié)果，可以將大黃的預(yù)防機(jī)制歸納為以下幾點(diǎn)：①直接發(fā)揮對(duì)胃腸道的保護(hù)作用。本研究結(jié)果顯示大黃有助于改善胃黏膜血流灌注，其他研究還指出大黃有助于提高胃腸黏膜pH、促進(jìn)平滑肌活動(dòng)、抑制胃蛋白酶等[6，7]，上述作用均可降低胃液游離酸濃度、降低炎癥反應(yīng)。而上述作用均與大黃的依賴性舒張血管有關(guān)，大黃能夠抑制細(xì)胞膜Na+及K+-ATP酶活性，進(jìn)而使血漿滲透壓上升、舒張血管。②大黃有助于消除氧自由基，從而間接作用影響胃潰瘍。本研究結(jié)果顯示大黃可顯著增強(qiáng)大鼠血清SPD、CAT水平，表明C組大鼠體內(nèi)過(guò)氧化脂質(zhì)含量更低，提示大黃有助于抑制脂肪氧合酶活性，C組AST水平較B組低，也可證實(shí)此論點(diǎn)。既往針對(duì)其他類型胃潰瘍的研究指出，氧自由基對(duì)其發(fā)生與發(fā)展有一定促進(jìn)作用[8-10]，考慮到此類疾病癥狀的相似性，能夠推測(cè)氧自由基對(duì)急性應(yīng)激性胃腸黏膜病變亦有促進(jìn)作用，同時(shí)結(jié)合本研究結(jié)果，能夠說(shuō)明大黃有消除多種活性氧的作用，從而減少自由基的形成，防治應(yīng)激性胃潰瘍。③創(chuàng)傷應(yīng)激可導(dǎo)致大鼠血清胃泌素水平下降，且此下降趨勢(shì)隨潰瘍指數(shù)的增加而增加，這可能是因?yàn)閯?chuàng)傷應(yīng)激導(dǎo)致迷走神經(jīng)系統(tǒng)受到抑制，胃泌素合成與釋放下降，使得對(duì)胃黏膜的保護(hù)功能下降，這在陳建章等的研究中有直接反映[11，12]。而大黃則能夠有效提升顱腦損傷大鼠血清胃泌素水平，從而預(yù)防應(yīng)激性胃腸黏膜病變。

由此可以認(rèn)為，大黃確能夠預(yù)防急性應(yīng)激性胃腸黏膜病變，另有部分研究還直接將大黃或相關(guān)制劑應(yīng)用至臨床，也表明其有助于保護(hù)胃腸功能，如周巖等[13]認(rèn)為其有助于預(yù)防胃腸功能衰竭，萬(wàn)兵等[14]還指出其對(duì)同屬消化系統(tǒng)的胰腺有一定保護(hù)作用，并探討了其對(duì)IL-6、CRP的影響，表明其還能有效抗炎。上述研究結(jié)論的藥理學(xué)機(jī)制可能與本例基本一致，可以因此推測(cè)大黃對(duì)預(yù)防人體急性應(yīng)激性胃腸黏膜病變亦有一定作用，值得臨床關(guān)注。

總之，大黃有助于預(yù)防急性應(yīng)激性胃腸黏膜病變，但對(duì)其病理作用機(jī)制尚處于推斷階段，僅認(rèn)為大黃可能通過(guò)改善胃黏膜血流灌注、消除氧自由基、提升胃泌素水平來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)該并發(fā)癥的預(yù)防。

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（收稿日期：2015-03-23）