HPLC法在現(xiàn)代中藥中的應用

韓磊

摘 要：高效液相色譜法，又稱高壓液相色譜法，在現(xiàn)代科學尤其在藥學研究領域占有非常重要的地位，是藥學方面常用的研究手段，是在液相色譜基礎上發(fā)展起來的一種色譜方法，已在天然藥物中獲得廣泛應用，發(fā)揮作用巨大。文章主要介紹了高效液相色譜法在現(xiàn)代中藥中的應用。

關鍵詞：HPLC法；現(xiàn)代中藥；應用；綜述

引言

高效液相色譜法，自上世紀世紀六十年代崛起，經(jīng)過不斷的發(fā)展，從理論、實踐方面日臻完善，應用范圍較廣，涉及醫(yī)藥領域、環(huán)境保護、生命科學、石化等基礎和應用領域。大多數(shù)有機化合物可以用HPLC來分析測定。在藥物分析機分離中的應用尤其廣泛，發(fā)展尤其快速。按分離機理的不同，主要有：吸附色譜法、液-液分配色譜法、離子交換色譜法、分子排阻色譜法、親和色譜法、手性色譜法等。高效液相色譜法自五年版《中國人民共和國藥典》收載以來，在藥物分析領域的應用發(fā)展迅速，藥品質(zhì)量控制中的作用日益突顯，已發(fā)展成為一種主流的色譜分析方法。

1 高效液相色譜法在有效成分分析中的應用

1.1 黃酮類化合物中的應用

中藥的成分復雜多樣，多數(shù)含有黃酮類化合物，也是天然藥物中非常重要的一類化合物，隨著黃酮類化合物的廣泛研究，其分析和分離的手段不斷得到改進，高效液相色譜法在析和分離黃酮類化合物方面的應用也非常廣泛。田娜等人采用制備液相色譜法，從荷葉中分離和制備了一類黃酮化合物。方法是采用60%乙醇回流提取，粗提取液濃縮，以D-101柱與聚酰胺色譜分離，后經(jīng)Symmetry PrepTMC18柱分離，采用水-乙腈為流動相，進行梯度洗脫，流速以5ml/min，最后分析出3種黃酮類化合物。利用紫外、紅外、核磁共振、質(zhì)譜等分析，確定以上三個化合物分別為紫云英苷、異槲皮苷和金絲桃苷。三種化合物的純度都達到了97%以上。其中紫云英苷為首次從荷葉中分離[1]。Justesen等采用液相質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對15種藥材中的黃酮進行了分析和分離，分析發(fā)現(xiàn)歐芹的芹菜素含量最高，達到了510-630mg/100g[2]。Chen等研究漆樹黃酮在小鼠體內(nèi)的代謝，采用HPLC分離漆樹黃酮及其代謝物，并采用質(zhì)譜和HPLC，最終確定了代謝產(chǎn)物的化學結(jié)構(gòu)[3]。

1.2 皂苷類化合物中的應用

皂苷類成分也屬于中藥中常見的活性成分，多數(shù)沒有紫外吸收，或者只有末端吸收，易受試劑干擾，因此使用紫外檢測法有一定的局限性。采用用高效液相色譜與蒸發(fā)光檢測器，可以有效檢測皂苷類成分。在分析浙麥冬、川麥冬中麥冬皂苷D含量的應用較好[4]，在對酸棗仁中酸棗仁皂苷的含量測定[5]，柴胡中柴胡皂苷的含量測定[6]，黃芪中黃芪甲苷的含量測定[7]，天麻中天麻苷含量測定[8]都取得很好的分析效果。

2 HPLC-ELSD在中藥分析中的應用

一方面中藥的化學成分很多，結(jié)構(gòu)復雜，其中一些成分不存在紫外吸收，有的只在紫外末端有吸收。另一方面，色譜分離困難和流動相存在干擾，致使紫外檢測在定性定量方面的分析有一定的難度。而ELSD在一定程度上彌補了此方面的不足，因此應用較廣在糖類成分、內(nèi)酯類成分、皂苷類成分、氨基酸、萜類成分和生物堿類成分等其他成分分析中，得到了較好的分析效果[9]。

3 結(jié)束語

中藥成分的復雜性和多樣性卻是現(xiàn)代中藥研究者們所頭疼的問題，同時也在制約中藥制劑的發(fā)展和臨床上的應用，中藥的資源不斷地豐富與發(fā)展，但質(zhì)量卻遠遠沒有一個科學的量化標準體系，而實現(xiàn)這些就得通過精密的分析和檢測手段。作者通過對相關資料的查閱，綜述了高效液相色譜法在黃酮、皂苷、糖類等中藥化學成分中的分析和分離方面的應用，HPLC法具有良好的分離性能、選擇性好、分析速度快、適用范圍廣、樣品用量少、靈敏度高等諸多優(yōu)點。

參考文獻

[1]田娜，劉仲華，黃建安，等.高效制備液相色譜法從荷葉中分離制備黃酮類化合物[J].色譜，2007（1）：88-92.

[2]Justesen UJ，knuthsen p.Composition of flavnoids in fresh herbs and calculation of flavonoid intake by use of herbs in traditional Danish dishes [J].Food chemistry，2001（73）：245-250.

[3]Chen H，Zuo Y G，Deng Y W.Separation and determination of flavonoids and other phenolic compounds in cranberry juice by highperformance liquid chromatography [J].J.Chromatogr.A.2001，913：387-395.

[4]俞建平，馬月光，邵建峰，等.ELSD-HPLC法測定浙麥冬、川麥冬中麥冬皂苷D含量的方法研究[J].中藥新藥與臨床藥理，2002，13（4）：253.

[5]李會軍，李萍.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測器測定酸棗仁中酸棗仁皂苷A及B的含量[J].藥物分析雜志，2000，20（2）：82.

[6]陳妍.HPLC-ELSD法測定柴胡中柴胡皂苷a、d的含量[J].天津藥學，2002，14（3）：73.

[7]田南卉，楊國紅，方穎，等.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射器測定黃芪甲苷的含量[J].藥物分析雜志，2000，20（3）：199.

[8]魏泱，丁明玉，李紅霞.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射和紫外檢測法測定天麻中天麻甙含量[J].高等學校化學學報，2001，22（4）：563.

[9]黃永焯，王寧生.HPLC/ELSD在天然藥物分析中的應用[J].中藥新藥與臨床藥理，2001，12（6）：444.