Cyclin E、p27及Ki—67蛋白在顱內(nèi)腫瘤患者中的表達(dá)及臨床意義

吳伶莉 金賽燕 彭國平 崔大偉

[摘要] 目的 探討Cyclin E、p27及Ki-67蛋白在顱內(nèi)腫瘤患者中的表達(dá)及臨床意義。 方法 以46例顱內(nèi)腫瘤患者的腫瘤組織標(biāo)本為腫瘤組，以其周邊正常腦組織標(biāo)本為對照組。采用免疫組織化學(xué)法分別對腫瘤組和對照組的腦組織中Cyclin E、p27及Ki-67蛋白的表達(dá)進(jìn)行檢測。分析兩組標(biāo)本中三者的陽性表達(dá)率及其這些表達(dá)的蛋白與顱內(nèi)腫瘤病理特征的關(guān)系。結(jié)果 腫瘤組患者腫瘤組織中Cyclin E、Ki-67陽性表達(dá)率均高于對照組（P均<0.05），而p27陽性表達(dá)率低于對照組正常腦組織（P<0.05）。惡性腫瘤者及Ⅲ～Ⅳ級(jí)高惡化腫瘤者Cyclin E、Ki-67陽性表達(dá)率均分別高于良性腫瘤者及Ⅰ～Ⅱ級(jí)低惡化腫瘤者（P<0.05），p27陽性表達(dá)率分別低于良性腫瘤者及Ⅰ～Ⅱ級(jí)低惡化腫瘤者（P<0.05）。 結(jié)論CyclinE、Ki-67的高表達(dá)及p27低表達(dá)可能是參與顱內(nèi)腫瘤發(fā)生、發(fā)展的重要因素，且Cyclin E、p27、Ki-67的陽性表達(dá)與顱內(nèi)腫瘤的性質(zhì)及分化程度有關(guān)。

[關(guān)鍵詞] 顱內(nèi)腫瘤；Cyclin E；p27；Ki-67

[中圖分類號(hào)] R735.8 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2015）19-0005-03

顱內(nèi)腫瘤是神經(jīng)外科最常見的腫瘤類型之一，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究強(qiáng)調(diào)，因細(xì)胞增殖及周期調(diào)節(jié)失控所導(dǎo)致的細(xì)胞異常增殖是導(dǎo)致腫瘤發(fā)生、發(fā)展的重要危險(xiǎn)因素[1]。而近年來，隨著臨床醫(yī)學(xué)對腫瘤疾病發(fā)病機(jī)制研究的不斷深入，參與細(xì)胞增殖及周期調(diào)控機(jī)制的因子成為臨床醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)[2-4]。本文以我院收治的46例顱內(nèi)腫瘤患者為研究對象，探討Cyclin E、p27及Ki-67在患者腫瘤組織中的表達(dá)及意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇我院2013年1～12月期間收治的46例顱內(nèi)腫瘤患者為腫瘤組，所有患者均經(jīng)手術(shù)病理確診。其中男25例，女21例；年齡45～65歲，平均（58.4±4.2）歲。同時(shí)選擇46例患者中的40例癌旁正常組織為對照組，其中男21例，女19例。組織標(biāo)本來自醫(yī)院手術(shù)病理科保存的人腦膠質(zhì)瘤和腦膜瘤及癌旁正常腦組織石蠟包埋組織標(biāo)本。兩組患者性別、年齡比較差異均無顯著性（P>0.05）。

1.2 方法

①Cyclin E、p27及Ki-67檢測。采用免疫組織化學(xué)法（IHC）對兩組患者標(biāo)本組織的Cyclin E、p27及Ki-67表達(dá)進(jìn)行檢測，以磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗作陰性對照。②Cyclin E、p27及Ki-67陽性表達(dá)判斷標(biāo)準(zhǔn)。以出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒為Cyclin E、p27、Ki-67染色陽性細(xì)胞，陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)為染色陽性細(xì)胞數(shù)≥5%，染色強(qiáng)度為中度以上[5]。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1 兩組患者標(biāo)本組織Cyclin E、p27及Ki-67陽性表達(dá)率 根據(jù)檢測結(jié)果，對比分析兩組患者標(biāo)本組織中Cyclin E、p27及Ki-67的陽性表達(dá)率。

1.3.2 Cyclin E、p27及Ki-67表達(dá)與顱內(nèi)腫瘤病理特征的關(guān)系分析 對比分析不同腫瘤性質(zhì)、分化程度及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移下，顱內(nèi)腫瘤患者Cyclin E、p27及Ki-67的陽性表達(dá)情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Cyclin E、p27及Ki-67在正常腦組織與顱內(nèi)腫瘤組織中的表達(dá)

腫瘤組患者腫瘤組織中Cyclin E、Ki-67陽性表達(dá)率均高于對照組正常腦組織（P均<0.05），而p27陽性表達(dá)率低于對照組正常腦組織（P<0.05）。其中46例腫瘤組織中，Cyclin E（+）14例，（++）10例，（+++）4例，（-）18例；p27（+）13例，（++）5例，（+++）2例，（-）26例；Ki-67（+）8例，（++）9例，（+++）7例，（-）22例；40例正常腦組織中，Cyclin E（+）5例，（-）35例；p27（+）12例，（++）15例，（+++）11例，（-）2例；Ki-67（+）4例，（-）36例，見表1。病理切片結(jié)果見封三圖2～7。

表1 Cyclin E、p27及Ki-67在正常腦組織與顱內(nèi)腫瘤組織中的表達(dá)[n（%）]

2.2 Cyclin E、p27及Ki-67陽性表達(dá)與顱內(nèi)腫瘤病理特征的關(guān)系分析

從表2可以看出，惡性腫瘤者Cyclin E、Ki-67陽性表達(dá)率高于良性腫瘤者（P均<0.05），p27陽性表達(dá)率低于良性腫瘤者（P<0.05）；Ⅲ～Ⅳ級(jí)高惡化腫瘤者Cyclin E、Ki-67陽性表達(dá)率高于Ⅰ～Ⅱ級(jí)低惡化腫瘤者（P均<0.05），p27陽性表達(dá)率低于Ⅰ～Ⅱ級(jí)低惡化腫瘤者（P<0.05）；而有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Cyclin E、p27及Ki-67陽性表達(dá)率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均>0.05）。

表2 Cyclin E、p27及Ki-67陽性表達(dá)與顱內(nèi)腫瘤病理特征的關(guān)系分析

[n（%）]

3 討論

本研究結(jié)果顯示腫瘤組患者腫瘤組織中Cyclin E、Ki-67陽性表達(dá)率均高于對照組正常腦組織，而p27陽性表達(dá)率低于對照組正常腦組織。提示Cyclin E、Ki-67的高表達(dá)及p27低表達(dá)可能是參與顱內(nèi)腫瘤發(fā)生的重要因子[6，7]。臨床醫(yī)學(xué)強(qiáng)調(diào)細(xì)胞周期及細(xì)胞增值失控是腫瘤發(fā)生、細(xì)胞癌變的關(guān)鍵因素，而參與細(xì)胞增殖及周期調(diào)控機(jī)制的因子越來越多[8-10]。在本研究的三種因子中，Cyclin E作為細(xì)胞周期蛋白的重要調(diào)節(jié)因子，在限制細(xì)胞G1/S期轉(zhuǎn)化速度中發(fā)揮著重要的作用，其高表達(dá)可激活周期蛋白依賴性激酶（CDK）的活性，從而縮短G1期，使細(xì)胞由G1期快速進(jìn)入S期，造成中心體過增殖，引發(fā)細(xì)胞周期調(diào)節(jié)失控、細(xì)胞增殖發(fā)生異常，最終導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。Ki-67是臨床醫(yī)學(xué)所公認(rèn)的細(xì)胞增生活性標(biāo)志物及細(xì)胞增值指數(shù)，其表達(dá)水平的高低與腫瘤細(xì)胞的增殖活性呈正相關(guān)[11]。因其在多種腫瘤組織中呈高表達(dá)態(tài)勢，因而被推測為一種原癌基因。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道強(qiáng)調(diào)當(dāng)Ki-67在組織內(nèi)達(dá)到一定的表達(dá)水平后易引發(fā)細(xì)胞的增殖發(fā)生失控，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。p27是一種廣譜的、非特異性的CDKI，其能夠通過對CDK復(fù)合物的抑制來調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)程，對細(xì)胞由 G 期到進(jìn)入S 期有抑制作用，進(jìn)而發(fā)揮抑制細(xì)胞增殖的作用機(jī)制。而當(dāng)p27表達(dá)下降或缺失時(shí)，該作用機(jī)制所發(fā)揮的效果降低，可誘發(fā)細(xì)胞增殖失控，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生[12]。因此，在Cyclin E、p27及Ki-67中，Cyclin E與Ki-67的高表達(dá)是引發(fā)細(xì)胞周期及細(xì)胞增殖失控、導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的重要因子；而p27的低表達(dá)則是降低細(xì)胞增殖抑制作用、誘發(fā)細(xì)胞增殖失控、導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的重要因子。三者在相互作用下共同參與顱內(nèi)腫瘤的發(fā)生機(jī)制。

本研究結(jié)果顯示惡性腫瘤者及Ⅲ～Ⅳ級(jí)高惡化腫瘤者Cyclin E、Ki-67陽性表達(dá)率分別高于良性腫瘤者及Ⅰ～Ⅱ級(jí)低惡化腫瘤者，p27陽性表達(dá)率分別低于良性腫瘤者及Ⅰ～Ⅱ級(jí)低惡化腫瘤者。提示Cyclin E、p27、Ki-67的陽性表達(dá)與顱內(nèi)腫瘤的性質(zhì)就分化程度有關(guān)。首先，Cyclin E、Ki-67作為癌基因，其表達(dá)失控目前已均被臨床醫(yī)學(xué)認(rèn)為是腫瘤由良性向惡性轉(zhuǎn)化的重要分子標(biāo)準(zhǔn)，其原因主要是二者的高表達(dá)一方面加快了細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期的進(jìn)程，另一方面也加速了細(xì)胞增殖，綜合影響下引發(fā)細(xì)胞染色體的缺失，造成腫瘤向惡性發(fā)展[13]。因此，惡性腫瘤者Cyclin E、Ki-67陽性表達(dá)率分別高于良性腫瘤者。其次，Ⅲ～Ⅳ級(jí)高惡化腫瘤患者，其細(xì)胞周期及增殖的失控程度必然高于Ⅰ～Ⅱ級(jí)低惡化腫瘤者，那么其Cyclin E、Ki-67的陽性表達(dá)率則高于Ⅰ～Ⅱ級(jí)低惡化腫瘤者。最后，p27作為“腫瘤抑制基因”，其低表達(dá)是細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的重要因子，同時(shí)也是導(dǎo)致腫瘤病情惡化程度加深的重要因子[14，15]。因此，惡性腫瘤者及Ⅲ～Ⅳ級(jí)高惡化腫瘤者p27陽性表達(dá)率分別低于良性腫瘤者及Ⅰ～Ⅱ級(jí)低惡化腫瘤者。

綜上，Cyclin E、Ki-67的高表達(dá)及p27低表達(dá)可能是參與顱內(nèi)腫瘤發(fā)生、發(fā)展的重要因子，且Cyclin E、p27、Ki-67的陽性表達(dá)與顱內(nèi)腫瘤的性質(zhì)及分化程度有關(guān)。

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（收稿日期：2015-03-13）