獨(dú)活寄生湯通過miRNAs調(diào)控炎癥性骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞功能改變的機(jī)制探討

陳后煌 邵翔 馬玉環(huán) 鄭文偉 葉蕻芝 李西海

【摘 要】 軟骨細(xì)胞功能改變在骨關(guān)節(jié)炎病理過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。炎癥因子是介導(dǎo)骨關(guān)節(jié)炎軟骨退變的主要因素，其表達(dá)與MicroRNAs （miRNAs）密切相關(guān)。miRNAs是一類在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達(dá)的非編碼蛋白的RNA分子，參與了軟骨細(xì)胞增殖、分化，以及合成與分解代謝等生物學(xué)過程。中醫(yī)藥治療骨關(guān)節(jié)炎獨(dú)具特色，能夠靶向調(diào)節(jié)miRNAs介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，獨(dú)活寄生湯長期運(yùn)用于臨床，能有效抑制關(guān)節(jié)炎癥，其藥效機(jī)制可能是通過調(diào)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞中miRNAs的表達(dá)，以及改變miRNAs和炎癥因子之間的相互協(xié)調(diào)作用而發(fā)揮對(duì)炎癥性骨關(guān)節(jié)炎的治療作用。多層次、多角度地探討?yīng)毣罴纳鷾淖饔脵C(jī)制及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，可為闡明獨(dú)活寄生湯治療炎癥性骨關(guān)節(jié)炎提供新的研究思路。

【關(guān)鍵詞】 骨關(guān)節(jié)炎；獨(dú)活寄生湯；軟骨細(xì)胞；miRNAs；炎癥

doi：10.3969/j.issn.2095-4174.2015.09.016

骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）是多種生物因素與機(jī)械損傷因素相互作用所致生物力學(xué)紊亂而引起的病理改變[1]，并以軟骨退變?yōu)槠涓静±碜兓＼浌羌?xì)胞是軟骨中的唯一細(xì)胞，分散于細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrixc，ECM）中，對(duì)維持軟骨的完整性以及軟骨的負(fù)重功能具有重要作用。軟骨細(xì)胞功能退變，是引起OA的重要因素。獨(dú)活寄生湯能夠有效改善OA軟骨的炎性癥狀[2]，但其具體機(jī)制不甚明了?，F(xiàn)就miRNAs與炎癥性O(shè)A的關(guān)系及獨(dú)活寄生湯調(diào)控炎癥性O(shè)A的機(jī)制進(jìn)行探討。

1 miRNAs調(diào)控OA軟骨細(xì)胞功能的機(jī)制

miRNAs是一類內(nèi)源性、非編碼蛋白的單鏈小RNA家族，由20～22個(gè)核苷酸組成，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因的表達(dá)，通過調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化等影響細(xì)胞的功能[3]。目前研究發(fā)現(xiàn)，miRNAs表達(dá)廣泛，在OA軟骨細(xì)胞增殖、分化，以及合成與分解代謝等過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用[4]。

1.1 miRNA調(diào)控軟骨細(xì)胞的增殖 miRNAs能夠上調(diào)Ⅱ型膠原和蛋白聚糖的表達(dá)，促進(jìn)軟骨基質(zhì)的合成和軟骨細(xì)胞的增殖。miR-200a特異性地在胚胎發(fā)育過程中表達(dá)，研究表明，miR-200a能夠下調(diào)軟骨中促軟骨細(xì)胞形成基因的表達(dá)，而轉(zhuǎn)染miR-200a抑制劑到發(fā)育中的下頜髁突軟骨中，則促進(jìn)了軟骨的形成，提示miR-200a可能通過調(diào)控軟骨細(xì)胞的增殖，抑制早期軟骨形成[5]。將雙鏈miR-21轉(zhuǎn)染到軟骨細(xì)胞后，促進(jìn)了軟骨細(xì)胞的增殖以及軟骨基質(zhì)的合成[6]。

1.2 miRNA調(diào)控軟骨細(xì)胞的分化 組蛋白脫乙酰酶（histone deacetylase，HDAC）4特異性地在非肥大軟骨細(xì)胞中表達(dá)，并且通過抑制轉(zhuǎn)錄因子Runx2的激活調(diào)控軟骨細(xì)胞的肥大分化。研究證實(shí)，HDAC4是miR-140的下游靶標(biāo)之一[7]，而miR-140在促進(jìn)軟骨細(xì)胞分化中的關(guān)鍵作用已被證實(shí)[8]。因此，miR-140可通過抑制HDAC4的表達(dá)，從而消除HDAC4對(duì)轉(zhuǎn)錄因子Runx2的抑制作用，進(jìn)而促進(jìn)軟骨細(xì)胞的肥大分化。miR-145可直接作用于其靶標(biāo)SOX-9，從而調(diào)控軟骨細(xì)胞分化的早期階段[9]。miR-145還可以特異性地降低OA軟骨ECM中Col2a1基因、蛋白聚糖和miR-140的表達(dá)，同時(shí)上調(diào)軟骨細(xì)胞中Runx2和基質(zhì)金屬蛋白酶-13（matrix metalloproteinases-13，MMP-13）的表達(dá)水平[10]。此外，miR-221也被證實(shí)可以促進(jìn)軟骨細(xì)胞的分化和軟骨ECM的合成[11]。

1.3 miRNA調(diào)控軟骨細(xì)胞的凋亡 軟骨細(xì)胞凋亡是引起OA的重要分子事件，眾多miRNAs參與關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的凋亡過程。白細(xì)胞介素-1（interleukin-1，IL-1）誘導(dǎo)的OA模型中，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡的數(shù)量隨著miR-34a水平的增加而增加，表明miR-34a可能與軟骨細(xì)胞的過度凋亡有關(guān)，當(dāng)使用miR-34a抑制劑或者沉默miR-34a后，軟骨細(xì)胞凋亡的現(xiàn)象出現(xiàn)明顯的改善[12]。IL-1β介導(dǎo)的OA模型中，miR-145呈高表達(dá)，miR-145通過調(diào)控Smad3繼而影響后者下游基因的表達(dá)，最終導(dǎo)致OA軟骨細(xì)胞ECM的降解[13]。與之相反的是，在相同OA模型中，miR-127-5p的表達(dá)量降低并伴隨MMP-13的表達(dá)量上升。而過表達(dá)的miR-127-5p則可以抑制MMP-13的產(chǎn)生，并且減緩OA軟骨退變進(jìn)程[14]。miR-27a通過減少M(fèi)MP-1和IGFBP5的合成，抑制軟骨細(xì)胞凋亡，從而間接調(diào)控OA的病理進(jìn)程[15]。

2 miRNAs調(diào)控炎癥性O(shè)A的機(jī)制

2.1 炎癥介質(zhì)參與OA軟骨細(xì)胞功能改變的機(jī)制 炎癥介質(zhì)對(duì)OA的發(fā)病進(jìn)展具有重要影響，其中，細(xì)胞因子在OA發(fā)病中的作用越來越受關(guān)注，其在OA軟骨細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用。IL-1和腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）是OA病理過程中促進(jìn)軟骨基質(zhì)降解和關(guān)節(jié)軟骨破壞的最主要細(xì)胞因子，對(duì)維持關(guān)節(jié)軟骨ECM的降解與合成平衡具有關(guān)鍵作用[16]。IL-1分為IL-1α和IL-1β兩種亞型，它們生物活性相似，具有相同的致炎能力，其中IL-1β在整個(gè)OA進(jìn)程中處于核心地位。

OA中存在明顯的軟骨細(xì)胞凋亡。參與炎癥介導(dǎo)的軟骨細(xì)胞凋亡信號(hào)通路有：一氧化氮（nitric oxide，NO）途徑、絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）通路和核轉(zhuǎn)錄因子-κB（nuclear factor-kappaB，NF-κB）通路等。NO是IL-1β作用于軟骨細(xì)胞的主要效應(yīng)分子，正常軟骨細(xì)胞中無NO產(chǎn)生，IL-1β等可以激活誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide，iNOS）產(chǎn)生大量NO，后者可引起體外培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞發(fā)生凋亡[17]。IL-1通過激活NF-κB途徑，影響細(xì)胞核內(nèi)基因轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后修飾，誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞合成MMPs、NO和蛋白聚糖酶等，最終引起關(guān)節(jié)炎癥和軟骨細(xì)胞凋亡[18]。另外，IL-1可直接引起線粒體功能異常、能量衰竭，進(jìn)而誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞凋亡。TNF-α在OA軟骨中表達(dá)上調(diào)，其通過激活MAPK信號(hào)下游的MEK/ERK信號(hào)通路，抑制促合成代謝因子SOX-9、蛋白聚糖和Ⅱ型膠原的產(chǎn)生，進(jìn)而誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞凋亡[19]。

2.2 miRNAs參與調(diào)控炎癥性O(shè)A的軟骨細(xì)胞功能改變 miRNAs廣泛參與OA的炎癥反應(yīng)過程，尤其是炎癥因子介導(dǎo)的軟骨細(xì)胞凋亡[20]。在OA軟骨中，存在著某種由透明質(zhì)酸、纖連蛋白、膠原或蛋白聚糖等分子揭示的內(nèi)源性損傷相關(guān)分子模式，這些分子能被TOLL樣受體（TLRs）以一種外源性病原相關(guān)分子模式識(shí)別[21-22]。TOLL樣受體信號(hào)能夠激活NF-κB信號(hào)，后者能夠誘導(dǎo)相關(guān)基因的表達(dá)，繼而誘發(fā)OA的炎癥反應(yīng)[23]。同樣，促炎細(xì)胞因子IL-1能夠激活NF-κB信號(hào)，因此IL-1可能通過調(diào)控基因的表達(dá)，在關(guān)節(jié)軟骨的分解代謝中發(fā)揮重要作用。

眾多miRNAs參與了對(duì)這些信號(hào)通路的調(diào)控。miR-155通過靶向調(diào)節(jié)TGF-β激活的蛋白激酶1結(jié)合蛋白2，抑制TGF-β激活的蛋白激酶1，繼而抑制NF-κB和MAPK信號(hào)，從而負(fù)向調(diào)節(jié)TLR/IL-1介導(dǎo)的炎癥性通路[24]。miR-146a則通過激活I(lǐng)L-1受體相關(guān)蛋白激酶1和TNF受體相關(guān)因子6，減少M(fèi)MP-13、ADAMTS-5對(duì)Ⅱ型膠原和蛋白多糖的降解，抑制上述炎癥性通路的激活[25-26]。IL-1β誘導(dǎo)產(chǎn)生的其他miRNAs包括miR-194和miR-27b等[27-28]。

3 獨(dú)活寄生湯治療炎癥性O(shè)A的機(jī)制探討

OA屬中醫(yī)學(xué)“痹證”范疇，其發(fā)病機(jī)制分為虛實(shí)兩類，氣血虛弱、肝腎虧虛，則筋骨失養(yǎng)，即不榮則痛，屬虛證；風(fēng)寒濕邪侵襲，則經(jīng)絡(luò)氣血瘀阻，即不通則痛，屬實(shí)證。OA核心病機(jī)為本痿標(biāo)痹，病在筋骨，病位在肝腎。肝腎虧虛，筋骨失養(yǎng)而為痿；腠理空虛易感風(fēng)寒濕之邪而為痹[29]。基于OA本痿標(biāo)痹的病理特點(diǎn)，治以補(bǔ)腎柔肝為主（治痿），輔以祛風(fēng)除濕散寒（治痹）。

3.1 獨(dú)活寄生湯的立論依據(jù) 獨(dú)活寄生湯出自唐·孫思邈的《備急千金要方》，方藥由獨(dú)活9 g，桑寄生、牛膝、肉桂、當(dāng)歸、干地黃、杜仲、芍藥、細(xì)辛、川芎、秦艽、防風(fēng)、人參、茯苓、甘草各

6 g組成。獨(dú)活長于祛下焦風(fēng)寒濕邪，蠲痹止痛，為君藥。肉桂溫里祛寒，通利血脈；秦艽、防風(fēng)祛風(fēng)勝濕；細(xì)辛祛寒止痛，均為臣藥。川芎、干地黃、當(dāng)歸養(yǎng)血活血；桑寄生、杜仲、牛膝、芍藥補(bǔ)腎柔肝，強(qiáng)壯筋骨；人參、茯苓、甘草補(bǔ)氣健脾，扶助正氣；以上各藥均為佐藥。甘草調(diào)和諸藥，為使藥。本方以祛風(fēng)寒濕藥為主，輔以補(bǔ)肝腎、養(yǎng)氣血、行氣活血、通絡(luò)止痛之品，邪正兼顧。諸藥相伍，使風(fēng)寒濕邪俱除，氣血充足，肝腎強(qiáng)健，痹痛得以緩解[30]。獨(dú)活寄生湯具有扶正祛邪、標(biāo)本兼顧的特點(diǎn)，體現(xiàn)中醫(yī)學(xué)“以通為用”的治療原則，故為臨床治療OA的經(jīng)典名方之一[31]。

3.2 獨(dú)活寄生湯治療炎癥性O(shè)A的藥理基礎(chǔ) 軟骨退變是OA的主要病理特征，是多因素綜合作用引起的軟骨細(xì)胞、軟骨下骨及軟骨基質(zhì)降解與合成偶聯(lián)失衡的結(jié)果。炎癥反應(yīng)介導(dǎo)的軟骨基質(zhì)降解是引起OA 軟骨退變的關(guān)鍵因素，也在OA的病理過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。IL-1β、TNF-α等誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)，促進(jìn)軟骨退變，在OA發(fā)病過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。因此，抑制炎癥因子對(duì)軟骨的破壞，成為治療OA的重要途徑。

有學(xué)者對(duì)補(bǔ)腎活血法的研究顯示，活血中藥與補(bǔ)腎中藥均能保護(hù)OA軟骨細(xì)胞及維持軟骨的完整性，延緩軟骨內(nèi)膠原的破壞及性質(zhì)改變，抑制關(guān)節(jié)軟骨炎癥反應(yīng)，進(jìn)而對(duì)OA起治療作用?；钛铒L(fēng)、補(bǔ)腎柔肝類中藥復(fù)方能通過影響OA關(guān)節(jié)軟骨內(nèi)的炎癥因子、MMPs、自由基等，從而減輕關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)的退變與降解，進(jìn)而起到保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨、防治OA的作用。另有研究表明，具有活血化瘀、泄?jié)岢凉窆πУ男節(jié)岢詼軌蛞种萍?xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)[32]。以上研究結(jié)果均為補(bǔ)腎活血、祛風(fēng)除濕類復(fù)方治療炎癥性O(shè)A提供了藥理學(xué)基礎(chǔ)。

獨(dú)活寄生湯以獨(dú)活、秦艽、防風(fēng)、肉桂、細(xì)辛祛風(fēng)除濕散寒，而祛風(fēng)除濕散寒藥能抗炎、鎮(zhèn)痛，通過調(diào)控細(xì)胞因子之間的相互作用，參與調(diào)控影響軟骨細(xì)胞功能變化的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，從而調(diào)節(jié)軟骨基質(zhì)降解與合成的平衡[33]；川芎、干地黃、人參、當(dāng)歸、茯苓、甘草活血補(bǔ)血，益氣健脾，而益氣活血藥可以降低骨內(nèi)壓、改善骨內(nèi)微循環(huán)，以及骨內(nèi)血流動(dòng)力學(xué)狀態(tài)，并且可能通過提高SOD活性，抑制NO生成，阻止NO、自由基對(duì)軟骨細(xì)胞的破壞，其中，NO通過介導(dǎo)炎性因子，促進(jìn)軟骨基質(zhì)降解，誘導(dǎo)軟骨的退變[34]；桑寄生、杜仲、牛膝、芍藥補(bǔ)腎柔肝，強(qiáng)筋壯骨，補(bǔ)腎柔肝藥能多層次地調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-性腺軸功能及神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，上調(diào)性激素水平，調(diào)節(jié)異常的細(xì)胞因子水平，抑制滑膜炎癥，延緩軟骨細(xì)胞的功能退變，調(diào)節(jié)軟骨基質(zhì)的降解，參與調(diào)控軟骨退變[29，31]?，F(xiàn)代藥理研究表明，獨(dú)活寄生湯具有以下作用：抗炎，鎮(zhèn)痛；擴(kuò)張血管，改善微循環(huán)；免疫調(diào)節(jié)；改善滑膜組織病理形態(tài)[35-36]。

研究表明，具有補(bǔ)氣、活血、通絡(luò)功效的補(bǔ)陽還五湯能夠下調(diào)miR-221、miR-222的表達(dá)水平[37]。

活血化瘀、泄?jié)岢凉竦男節(jié)岢詼軌蛘{(diào)控多種miRNAs的表達(dá)，通過調(diào)控miR-146a的表達(dá)，抑制炎癥反應(yīng)[32]。補(bǔ)腎活血方可以下調(diào)miR-210的表達(dá)水平[38]。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，獨(dú)活寄生湯通過抑制IL-1、IL-6、TNF-α和MMP-13等的表達(dá)水平，減少炎癥因子對(duì)關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)的降解，延緩關(guān)節(jié)軟骨的退變[39-41]，而miRNAs與IL-1、IL-6和TNF-α等誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞凋亡過程密切相關(guān)[42-43]。以上種種研究結(jié)果表明，具有補(bǔ)腎柔肝、祛風(fēng)除濕散寒之功效的獨(dú)活寄生湯在治療炎癥性O(shè)A時(shí)，可能同時(shí)伴有對(duì)miRNAs的調(diào)控過程。

4 結(jié) 語

綜上所述，基于miRNAs與炎癥因子在調(diào)控炎癥性O(shè)A軟骨細(xì)胞功能的過程中相互影響、相互作用，且研究已證實(shí)，獨(dú)活寄生湯能夠有效改善炎癥性O(shè)A患者臨床癥狀，有效抑制IL-1、IL-6和TNF-α等炎癥因子引起的軟骨退變，延緩OA的病理進(jìn)程。我們有理由相信，獨(dú)活寄生湯可能通過調(diào)節(jié)OA軟骨細(xì)胞中miRNAs的表達(dá)，以及改變miRNAs和炎癥因子之間的相互協(xié)調(diào)作用而發(fā)揮對(duì)炎癥性O(shè)A的治療作用。

5 參考文獻(xiàn)

[1] 李西海，梁文娜，葉蕻芝，等.獨(dú)活寄生湯調(diào)控風(fēng)寒濕痹型骨關(guān)節(jié)炎軟骨下骨重建失衡的作用機(jī)制探

討[J].風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2014，3（8）：62-64.

[2] 鄭進(jìn)昌，徐東明，許凱洲.獨(dú)活寄生湯治療膝關(guān)節(jié)退行性關(guān)節(jié)炎的臨床研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2013，10（3）：123-124.

[3] Bartel DP.MicroRNAs：genomics，biogenesis，mechanism，and function[J].Cell，2004，116（2）：281-297.

[4] Le LT，Swingler TE，Clark IM.Review：the role of microRNAs in osteoarthritis and chondrogenesis[J].Arthritis Rheum，2013，65（8）：1963-1974.

[5] Umeda M，Terao F，Miyazaki K，et al.MicroRNA-200a Regulates the Development of Mandibular Condylar Cartilage[J].J Dent Res，2015，94（6）：795-802.

[6] Kongcharoensombat W，Nakasa T，Ishikawa M，et al.The effect of microRNA-21 on proliferation and matrix synthesis of chondrocytes embedded in atelocollagen

gel[J].Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc，2010，18（12）：1679-1684.

[7] Miyaki S，Sato T，Inoue A，et al.MicroRNA-140 plays dual roles in both cartilage development and homeostasis[J].Genes Dev，2010，24（11）：1173-1185.

[8] Miyaki S，Nakasa T，Otsuki S，et al.MicroRNA-140 is expressed in differentiated human articular chondrocytes and modulates interleukin-1 responses[J].Arthritis Rheum，2009，60（9）：2723-2730.

[9] Yang B，Guo H，Zhang Y，et al.MicroRNA-145 regulates chondrogenic differentiation of mesenchymal stem cells by targeting Sox9[J].PLoS One，2011，6（7）：e21679.

[10] Martinez-Sanchez A，Dudek KA，Murphy CL.Regulation of human chondrocyte function through direct inhibition of cartilage master regulator SOX9 by microRNA-145 （miRNA-145）[J].J Biol Chem，2012，287（2）：916-924.

[11] Kim D，Song J，Jin EJ.MicroRNA-221 regulates chondrogenic differentiation through promoting proteosomal degradation of slug by targeting Mdm2[J].J Biol Chem，2010，285（35）：26900-26907.

[12] Abouheif MM，Nakasa T，Shibuya H，et al.Silencing microRNA-34a inhibits chondrocyte apoptosis in a rat osteoarthritis model in vitro[J].Rheumatology（Oxford），2010，49（11）：2054-2060.

[13] Yang B，Kang X，Xing Y，et al.Effect of microRNA-145 on IL-1beta-induced cartilage degradation in human chondrocytes[J].FEBS Lett，2014，588（14）：2344-2352.

[14] Park SJ，Cheon EJ，Lee MH，et al.MicroRNA-127-5p regulates matrix metalloproteinase 13 expression and interleukin-1β-induced catabolic effects in human chondrocytes[J].Arthritis Rheum，2013，65（12）：3141-3152.

[15] Akhtar N，Rasheed Z，Ramamurthy S，et al.MicroRNA-27b regulates the expression of matrix metalloproteinase 13 in human osteoarthritis chondrocytes[J].Arthritis Rheum，2010，62（5）：1361-1371.

[16] Blom AB，van der Kraan PM，van den Berg WB.Cytokine targeting in osteoarthritis[J].Curr Drug Targets，2007，8（2）：283-292.

[17] 邵越峰，陳維毅，衛(wèi)小春，等.周期性張應(yīng)變對(duì)重組人白細(xì)胞介素-1β誘導(dǎo)的一氧化氮表達(dá)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國藥物與臨床，2009，9（4）：265-267.

[18] Berenbaum F.Signaling transduction：target in osteoarthritis[J].Curr Opin Rheumatol，2004，16（5）：616-622.

[19] Appleton CT，Usmani SE，Mort JS，et al.Rho/ROCK and MEK/ERK activation by transforming growth factor-alpha induces articular cartilage degradation[J].Lab Invest，2010，90（1）：20-30.

[20] Iliopoulos D，Malizos KN，Oikonomou P，et al.Integrative microRNA and proteomic approaches identify novel osteoarthritis genes and their collaborative metabolic and inflammatory networks[J].PLoS One，2008，3（11）：e3740.

[21] Sofat N.Analysing the role of endogenous matrix molecules in the development of osteoarthritis[J].Int J Exp Pathol，2009，90（5）：463-479.

[22] Piccinini AM，Midwood KS.DAMPening inflammation by modulating TLR signalling[J].Mediators Inflamm，2010：672395.

[23] Marcu KB，Otero M，Olivotto E，et al.NF-κappaB signaling：multiple angles to target OA[J].Curr Drug Targets，2010，11（5）：599-613.

[24] Ceppi M，Pereira PM，Dunand-Sauthier I，et al.MicroRNA-

155 modulates the interleukin-1 signaling pathway in

activated human monocyte-derived dendritic cells[J].Proc Natl Acad Sci USA，2009，106（8）：2735-2740.

[25] Taganov KD，Boldin MP，Chang KJ，et al.NF-kappaB-dependent induction of microRNA miR-146，an inhibitor targeted to signaling proteins of innate immune responses[J].Proc Natl Acad Sci USA，2006，103（33）：12481-12486.

[26] Gu SX，Li X，Hamilton JL，et al.MicroRNA-146a reduces IL-1 dependent inflammatory responses in the intervertebral disc[J].Gene，2015，555（2）：80-87.

[27] Xu J，Kang Y，Liao WM，et al.MiR-194 regulates chondrogenic differentiation of human adipose-derived stem cells by targeting Sox5[J].PLoS One，2012，7（3）：e31861.

[28] Akhtar N，Rasheed Z，Ramamurthy S，et al.MicroRNA-κ27b regulates the expression of matrix metalloproteinase 13 in human osteoarthritis chondrocytes[J].Arthritis Rheum，2010，62（5）：1361-1371.

[29] 李西海，陳文列，劉獻(xiàn)祥.補(bǔ)腎柔肝法防治骨性關(guān)節(jié)炎作用機(jī)制探討[J].福建中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，21（2）：66-69.

[30] 吳廣文，褚劍鋒，許惠鳳，等.獨(dú)活寄生湯的藥理作用及其在治療骨性關(guān)節(jié)炎中的應(yīng)用[J].中醫(yī)正骨，2012，24（1）：37-39.

[31] 李西海，張翼，葉蕻芝，等.獨(dú)活寄生湯治療風(fēng)寒濕痹型膝骨關(guān)節(jié)炎的機(jī)制[J].中醫(yī)正骨，2012，24（1）：68-71.

[32] Sun WF，Zhang XX，Sun FY，et al.MicroRNA expression patterns of the kidney in hyperuricemia mice treated with Xiezhuo Chubi Decoction[J].Chin J Integr Med，2011，17（1）：35-42.

[33] 鄭春松，徐筱杰，劉獻(xiàn)祥，等.精制透骨消痛顆粒防治骨性關(guān)節(jié)炎的計(jì)算機(jī)藥理學(xué)[J].物理化學(xué)學(xué)報(bào)，2010，26（3）：775-783.

[34] 邵敏.補(bǔ)腎活血中藥對(duì)體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞SOD、NOS的影響[J].福建中醫(yī)藥，2006，37（4）：48-49.

[35] 陳成然.獨(dú)活寄生湯現(xiàn)代藥理研究及臨床應(yīng)用[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2004，13（21）：2926-2928.

[36] 王愛武，劉婭，雒琪，等.獨(dú)活寄生湯抗炎、鎮(zhèn)痛作用的藥效學(xué)研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2008，14（12）：61-64.

[37] Yang J，Gao F，Zhang Y，et al.Buyang Huanwu Decoction （BYHWD）Enhances Angiogenic Effect of Mesenchymal Stem Cell by Upregulating VEGF Expression After Focal Cerebral Ischemia[J].J Mol Neurosci，2015，56（4）：898-906.

[38] 張倍源.補(bǔ)腎活血方調(diào)控microRNA-210促進(jìn)BMSCs成骨分化的研究[J].中國骨質(zhì)疏松雜志，2014，

20（4）：396-399.

[39] 鄭春松，葉蕻芝，許惠鳳，等.分子對(duì)接法預(yù)測獨(dú)活寄生湯對(duì)TNF-α和IL-1β作用的活性成分[J].福建中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，22（4）：28-30.

[40] 高駿.獨(dú)活寄生湯對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎患者血清腫瘤壞死因子-α和白細(xì)胞介素-6水平的影響[J].新中醫(yī)，2015，47（2）：106-107.

[41] Wu G，F(xiàn)an H，Huang Y，et al.Duhuo Jisheng Decoctioncontaining serum promotes proliferation of interleukin1βinduced chondrocytes through the p16-cyclin D1/CDK4-Rb pathway[J].Mol Med Rep，2014，10（5）：2525-2534.

[42] Gu SX，Li X，Hamilton JL，et al.MicroRNA-146a reduces IL-1 dependent inflammatory responses in the intervertebral disc[J].Gene，2015，555（2）：80-87.

[43] Santini P，Politi L，Vedova PD，et al.The inflammatory circuitry of miR-149 as a pathological mechanism in osteoarthritis[J].Rheumatol Int，2014，34（5）：711-716.

收稿日期：2015-05-31；修回日期：2015-07-30