自身抗體檢測(cè)在自身免疫性肝病中的應(yīng)用及其臨床分析

鄭福來(lái)

自身免疫性肝病是一種由自身免疫反應(yīng)導(dǎo)致的肝膽系統(tǒng)損傷的慢性進(jìn)展性疾病。可以分為以肝炎為主的自身免疫性肝炎、以膽管損害和膽汁淤積為主型的原發(fā)性膽汁性肝硬化和原發(fā)性硬化性膽管炎，以及兼具上述兩組特征的重疊綜合征[1-2]。研究自身抗體譜檢測(cè)在自身免疫性肝病中的應(yīng)用，對(duì)于疾病的診斷、分型是十分有利的。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2014年1-12月確診的32例自身免疫性肝病患者為試驗(yàn)組，其中男7例，女25例；年齡19~67歲，平均（45.6±18.3）歲；自身免疫性肝炎有17例（53.1%），原發(fā)性膽汁性肝硬化有10例（31.3%），原發(fā)性硬化性膽管炎有5（15.6%）。另外，再隨機(jī)選取同時(shí)段本院收治的病毒性肝炎患者32例為對(duì)照組，其中男15例，女17例，年齡25~77歲，平均（52.1±22.7）歲。自身免疫性肝炎診斷符合國(guó)際自身免疫性肝炎小組的診斷標(biāo)準(zhǔn)及積分系統(tǒng)，原發(fā)性膽汁性肝硬化和原發(fā)性硬化性膽管炎診斷符合2003年美國(guó)肝病學(xué)會(huì)指導(dǎo)建議，重疊綜合征的診斷參考文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)[3-6]。

1.2 方法 在治療上，自身免疫性肝炎患者長(zhǎng)期應(yīng)用潑尼松或潑尼松聯(lián)合硫唑嘌呤，原發(fā)性膽汁性肝硬化和原發(fā)性硬化性膽管炎患者使用熊去氧膽酸以及免疫抑制類藥物環(huán)孢素A、氨甲蝶呤或硫唑嘌呤等，對(duì)兩組的自身抗體均進(jìn)行檢測(cè)。采用間接免疫熒光法檢測(cè)的抗體有抗核抗體（ANA）、抗平滑肌抗體（SMA）、抗線粒體抗體（AMA-M2）；采用免疫印跡檢測(cè)的抗體有：抗可溶性肝抗原/肝胰抗原（SLA/LP）抗體、抗肝腎微粒體抗體I型（LKM-1）、抗核膜糖蛋白抗體（gp210）、抗可溶性酸性核蛋白抗體（Sp100）、抗肝細(xì)胞漿I型抗原抗體（LC-1）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 兩組檢測(cè)結(jié)果采用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，使用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用（s）表示，比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用字2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組的一般資料比較 試驗(yàn)組中男7例（21.9%），女25例（78.1%）；對(duì)照組中男15例（46.9%），女17例（53.1%）。試驗(yàn)組中女性比例顯著高于對(duì)照組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說(shuō)明自身免疫性肝病好發(fā)于女性。試驗(yàn)組平均年齡（45.6±18.3）歲，對(duì)照組平均年齡（52.1±22.7）歲，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.2 兩組的抗體檢出率比較 試驗(yàn)組ANA抗體陽(yáng)性率17例（53.1%）顯著高于對(duì)照組4例（12.5%），試 驗(yàn) 組 SMA、AMA-M2、SLA/LP、LKM-1、gp210、Sp100和LC-1抗體陽(yáng)性率分別為40.6%、25.0%、15.6%、6.3%、9.4%、6.3%和9.4%， 而 對(duì) 照 組 均沒有檢出這些抗體，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表 1。

2.3 不同類型自身免疫性肝病的抗體檢出率比較 在檢測(cè)的幾種抗體中，試驗(yàn)組均檢測(cè)到了，但是試驗(yàn)組有不同的分型，分析不同類型的抗體陽(yáng)性率的差異將有助于疾病類型的確定。試驗(yàn)組中，自身免疫性肝炎有17例，原發(fā)性膽汁性肝硬化有10例，原發(fā)性硬化性膽管炎有5例。經(jīng)自身抗體檢測(cè)，自身免疫性肝炎組ANA抗體陽(yáng)性率為76.5%，顯著高于另外兩組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。自身免疫性肝病中檢出SLA/LP抗體陽(yáng)性率為29.4%，LKM-1抗體陽(yáng)性率為11.8%，LC-1抗體陽(yáng)性率為17.6%，這3種抗體為自身免疫性肝病特有。原發(fā)性膽汁性肝硬化組ANA抗體陽(yáng)性率為40.0%，顯著低于自身免疫性肝炎組，但高于原發(fā)性硬化性膽管炎組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；AMA-M2抗體陽(yáng)性率為80.0%，gp210抗體陽(yáng)性率為30.0%，Sp100抗體陽(yáng)性率為20.0%，這3種抗體為原發(fā)性膽汁性肝硬化所特有。原發(fā)性硬化性膽管炎組沒有檢出任何一種抗體，見表2。

表1 兩組的抗體檢出率比較 例（%）

表2 不同類型自身免疫性肝病的抗體檢出率比較 例（%）

3 討論

我國(guó)慢性肝炎患者以病毒性肝炎為多，自身免疫性肝病的發(fā)病率可能呈上升趨勢(shì)[7]。因此，自身免疫性肝病發(fā)病機(jī)制、診斷以及治療的研究得到了越來(lái)越多的關(guān)注。近年來(lái)，人們對(duì)于自身免疫性肝病的認(rèn)識(shí)水平和檢查手段不斷提高，但由于該病起病隱匿，臨床表現(xiàn)無(wú)特異性，早期診斷和鑒別診斷有一定的困難，時(shí)常會(huì)將自身免疫性肝病誤診為其他類肝炎或肝硬化等病癥，尤其是誤診為病毒性肝炎。一部分患者起病初期有乏力、皮膚瘙癢、納差、黃疸、肝脾腫大等癥狀及體征，但一部分患者無(wú)任何自覺不適，僅因常規(guī)體檢發(fā)現(xiàn)肝功能異常而就診，極個(gè)別患者初次起病來(lái)院時(shí)已進(jìn)展至肝硬化。因此，對(duì)于不明原因的肝功能異常患者，尤其是中老年女性，應(yīng)高度警惕自身免疫性肝病可能，加強(qiáng)隨訪，直至確定或排除自身免疫性肝病[8]。

目前關(guān)于自身免疫性肝病的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，這就給治療帶來(lái)了極大的困難，其發(fā)病機(jī)制常見的主要有感染與分子模擬學(xué)說(shuō)、自身免疫紊亂、遺傳易感性等幾種學(xué)說(shuō)[9]。由于自身免疫性肝病發(fā)病機(jī)制與免疫功能異常密切相關(guān)，自身抗體在發(fā)病機(jī)制中起重要作用。每種自身免疫性肝病都具有特征性自身抗體，因此自身抗體檢測(cè)對(duì)自身免疫性肝病的診斷、分型及鑒別診斷具有重要意義，肝病相關(guān)自身抗體譜檢測(cè)也已逐步成為自身免疫性肝病實(shí)驗(yàn)室診斷的常用指標(biāo)[10-11]。

在此次研究中，筆者選取了本院32例自身免疫性肝病患者與32例病毒性肝炎患者，分別作為試驗(yàn)組和對(duì)照組，檢測(cè)兩組的自身抗體譜，比較分析陽(yáng)性率的差別，將對(duì)疾病的診斷以及分型有一定幫助。筆者檢測(cè)的自身抗體有以下幾種：抗核抗體（ANA）、抗平滑肌抗體（SMA）、抗線粒體抗體（AMA-M2）、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原（SLA/LP）抗體、抗肝腎微粒體抗體I型（LKM-1）、抗核膜糖蛋白抗體（gp210）、抗可溶性酸性核蛋白抗體（Sp100）、抗肝細(xì)胞漿I型抗原抗體（LC-1）。這些抗體的選取是通過基礎(chǔ)理論知識(shí)與查閱相關(guān)文獻(xiàn)而選取的疾病相關(guān)自身抗體譜，首先，筆者對(duì)兩組的一般資料進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組中女患者較多（78.1%），男患者較少（21.9%），而對(duì)照組基本上是男女平均，可以看出此病好發(fā)于女性，兩組平均年齡方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。根據(jù)文獻(xiàn)[12]報(bào)道，自身免疫性肝病是以中老年為好發(fā)年齡，原發(fā)性膽汁性肝硬化多見于40歲以上的女性，而原發(fā)性硬化性膽管炎主要影響男性，這與筆者有一致的地方，就是好發(fā)于女性；但是此次在好發(fā)年齡方面并沒有發(fā)現(xiàn)特點(diǎn)，這可能是由于樣本地區(qū)分布不同造成的，因?yàn)殛P(guān)于自身免疫性肝病的流行病學(xué)研究較少，可能不同的地區(qū)、不同的樣本會(huì)造成結(jié)果的不一致。雖然如此，但是筆者試驗(yàn)組平均年齡為（45.6±18.3）歲，可以看出也是偏向于中老年的。

筆者對(duì)兩組的自身抗體陽(yáng)性率進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，對(duì)照組只檢出了ANA抗體，陽(yáng)性率12.5%，其余均未檢出。試驗(yàn)組每種抗體均檢出陽(yáng)性，并且每種抗體陽(yáng)性率均高于對(duì)照組，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。因此，對(duì)于自身抗體陽(yáng)性對(duì)于自身免疫性肝病的診斷，以及肝功能異?；颊吲懦《拘愿窝资欠浅Ｓ幸饬x的。

筆者對(duì)試驗(yàn)組內(nèi)3種不同類型的自身免疫性肝病的自身抗體陽(yáng)性率進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，以期能找出特異性的抗體，為臨床上疾病的分型提供一定參考意義。試驗(yàn)組中，自身免疫性肝炎有17例（53.1%），原發(fā)性膽汁性肝硬化有10例（31.3%），原發(fā)性硬化性膽管炎有5例（15.6%）。經(jīng)自身抗體檢測(cè)，ANA抗體陽(yáng)性存在于自身免疫性肝炎與原發(fā)性膽汁性肝硬化，且自身免疫性肝炎較高。SLA/LP抗體、LKM-1抗體、LC-1抗體陽(yáng)性只在自身免疫性肝炎中檢出，是其較為特異的抗體；AMA-M2抗體、gp210抗體、Sp100抗體只在原發(fā)性膽汁性肝硬化中檢出，是這種類型較為特異的抗體；而原發(fā)性硬化性膽管炎組沒有檢出任何一種抗體，表明這種類型的自身免疫性肝病缺乏抗體特異性，在臨床上是比較難診斷的一種疾病。

關(guān)于自身免疫性肝病的自身抗體譜的檢測(cè)，已經(jīng)有許多學(xué)者做了相關(guān)研究。李曄等[13]對(duì)北京石景山醫(yī)院的自身免疫性肝病患者的自身抗體譜進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)原發(fā)性膽汁性肝硬化相關(guān)自身抗體AMA、Sp100抗體、抗gp210抗體分別對(duì)其確診和預(yù)后有重要意義，而SLA/LP是自身免疫性肝炎最特異的指標(biāo)，這與筆者所得結(jié)果大致一致，但是也有不同的地方，比如作者在自身免疫性肝炎中未檢出LKM-1抗體，而在病毒性肝炎患者中檢出陽(yáng)性，筆者卻認(rèn)為L(zhǎng)KM-1抗體是自身免疫性肝炎較為特異的一個(gè)抗體。黃加權(quán)等[14]在自身免疫性肝炎患者中LC-1與LKM-1抗體檢出率普遍較低，與筆者的結(jié)果又有出入，而AMA-M2抗體對(duì)原發(fā)性膽汁性肝硬化診斷最具特異性這點(diǎn)筆者也有驗(yàn)證。還有的學(xué)者除了應(yīng)用自身抗體檢測(cè)，還加用了生化檢測(cè)，對(duì)疾病的診斷與鑒別的分析將更加全面[15]。

綜上所述，自身免疫性肝病是一種發(fā)病機(jī)制尚不清楚、臨床表現(xiàn)復(fù)雜多變、診斷治療比較困難的一種疾病。有些患者救治時(shí)已發(fā)展為肝硬化，因此，對(duì)其早期診斷與鑒別對(duì)提高患者的生存率有很大幫助。每種類型疾病的自身抗體譜不一樣，找出其特征對(duì)于疾病的鑒別與診斷十分有意義。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，自身免疫性肝炎較為特異的抗體是SLA/LP抗體、LKM-1抗體、LC-1抗體，而原發(fā)性膽汁性肝硬化較為特異的抗體是AMA-M2抗體、gp210抗體、Sp100抗體，而對(duì)于原發(fā)性硬化性膽管炎沒有檢測(cè)到其抗體譜，這方面還有待遇進(jìn)一步研究。

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