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    丹紅注射液對腎性高血壓大鼠離體心臟心功能的影響

    2015-05-14 02:42:58陳德森鄒佩霞
    世界中醫(yī)藥 2015年7期
    關鍵詞:帕米維拉離體

    祁 濤 陳德森 鄒佩霞 姚 遠 李 莉

    (1河南省平煤神馬醫(yī)療集團總醫(yī)院神經(jīng)內科,平頂山,467099;2湖北醫(yī)藥學院機能實驗室,十堰,442000;3湖北醫(yī)藥學院附屬太和醫(yī)院兒科,十堰,442000)

    腎性高血壓(Renal Hypertension,RH)是由于腎實質性病變而導致的血壓升高,是繼發(fā)性高血壓的一種[1]。本病的發(fā)生主要是由于腎細小動脈狹窄、間質組織和結締組織增生、腎小管萎縮、腎臟血流灌注不足造成的腎臟既有實質性損害最終導致高血壓的發(fā)生。而高血壓又會造成心臟的損害,主要導致左心室肥厚,二者相互促進,會使疾病進一步發(fā)展,因此,對于RH需積極治療。由于丹紅注射液對于RH心功能的影響及其機制鮮有報道,本實驗通過建立大鼠RH模型,通過Langendorff離體心臟灌流離體大鼠心臟[2],測定丹紅注射液對離體RH大鼠心功能作用進行了系統(tǒng)觀察,初步分析其對離體大鼠心功能的影響及其可能作用機制,為其用于RH的治療提供可靠的實驗依據(jù),以期增加其臨床適應證,并為預防其在治療心血管及其他系統(tǒng)疾病中可能出現(xiàn)的不良反應提供實驗和理論依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1 實驗動物 SD大鼠50只,體重180~220 g,雌雄不拘,湖北醫(yī)藥學院實驗動物中心提供,實驗動物生產(chǎn)許可證SCXK(鄂)2011-0008,實驗動物設施使用許可證SYXK(鄂)2011-0031。

    1.2 儀器及藥品 BL-420F生物功能實驗系統(tǒng)(成都泰盟電子有限公司);BP-6無創(chuàng)動物血壓測試儀(成都泰盟電子有限公司);Langendorff-Perfused離體心臟模型監(jiān)測儀;丹紅注射液(北京第四制藥廠,批號961048);維拉帕米(江蘇方強制藥廠生產(chǎn),批號:20081008)。

    1.3 RH模型大鼠制備方法 參照文獻[3]行雙腎雙狹方法制備RH模型大鼠。大鼠按戊巴比妥鈉(0.05 g/kg,ip)腹腔注射麻醉,俯臥位固定于手術臺,碘伏消毒備皮,于第3腰椎棘突處沿背部后正中線切開皮膚,用玻璃分針鈍性分離皮下筋膜,打開腹腔,找到腎臟及腎門。分別分離出左右兩側腎動脈約0.5 cm,腎動脈下穿入無菌手術線,用5號針頭與腎動脈血管長軸平行放置,扎緊腎動脈和針頭,觀察腎臟顏色變深以確定狹閉程度后抽出針灸針;觀察30 min確認雙腎無明顯的瘀血、壞死或蒼白后,縫合傷口并消毒處理。術后肌肉注射青霉素G 8萬U,共5 d,1次/d。術后自由進食飲水,1周后拆去皮膚縫線。術后第6周有35只大鼠存活,采用BP-6無創(chuàng)動物血壓測試儀測定其尾動脈血壓,以血壓上升大于30 mmHg為RH模型造模成功大鼠,經(jīng)測定有30只大鼠符合RH模型入選標準,本模型造模成功率達60%。將篩選出的30只RH造模成功大鼠,采用隨機數(shù)字表隨機分為模型組、維拉帕米組、丹紅組3組。

    1.4 離體大鼠心臟灌流方法及記錄指標 3組RH模型大鼠分別經(jīng)尾靜脈注入肝素(0.3 mL/100 g),10 min后斷頭處死,打開胸腔,用鑷子提起心臟根部,用剪刀盡量靠近頭端(即遠離心臟)剪斷血管,保留0.5 cm主動脈。迅速取出尚在搏動的心臟,置95%O2和5%CO2混合氣體飽和的KH營養(yǎng)液(4℃)中,去除主動脈血管周圍的結締組織,經(jīng)主動脈把心臟固定在Langendorff灌流裝置上。打開灌流液行逆向灌流,灌流壓力6.68 kPa[4],使心臟恢復自主搏動。此時關閉灌流液,剪去一部分左心耳,將球囊通過左心耳、房室瓣插到左心室內。向球囊內注入生理鹽水,并使左室的舒張末期壓調整在0~10 mmHg之間,再次打開灌流液行逆向灌流,通過BL-420F生物實驗系統(tǒng)記錄離體心臟±LV dp/dt max、LVEDD(%)、LVEDP(%)及 LVSP、LVEF 等指標[5]。預灌流10 min后經(jīng)灌流液分別中給藥灌注離體大鼠心臟。維拉帕米組按5×10-6mol/L維拉帕米的濃度配制KH營養(yǎng)液1 000 mL,丹紅注射液組按 (0.2 g/kg)丹紅注射液稀釋到1 000 mLKH營養(yǎng)液中,模型組僅灌流KH營養(yǎng)液,3組均連續(xù)記錄給藥前10 min及灌流后0.5 h,1 h,2 h上述指標。

    1.5 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 15.0軟件進行統(tǒng)計處理[6],實驗數(shù)據(jù)均以(ˉx±s)表示,指標的比較采用單因素方差分析,組間差異則采用Dunnett檢驗。

    2 結果

    2.1 丹紅注射液對大鼠±LV dp/dt max的影響 在整個實驗期間,模型組用藥前10 min及灌流后0.5 h,1 h,2 h4 個時點 ± LV dp/dt max較為穩(wěn)定。維拉帕米組在灌流后0.5 h,1 h,2 h 3個時點,±LV dp/dt max明顯降低,與模型組及藥前10 min比較,P<0.05,差異均有統(tǒng)計學意義。丹紅組在灌流后2 h對±LV dp/dt max有一定降低作用,但沒有陽性藥維拉帕米組降低幅度大,但與模型組比較,P<0.05,差異有統(tǒng)計學意義,表明丹紅注射液有與維拉帕米相似的降低±LV dp/dt max作用,說明其有一定的降低心臟作功效應,見表1。

    2.2 對大鼠LVEDD及LVESD的影響 模型組大鼠在用藥前10 min及灌流后0.5 h,1 h,2 h 4個時點LVEDD及LVESD無變化。維拉帕米組在灌流后0.5 h,1 h,2 h 3個時點LVEDD及LVESD都明顯降低。丹紅組在給藥后2 h內也有一定的降低LVEDD及LVESD作用,但與模型組比較,P>0.05,差異無統(tǒng)計學意義,如表2所示。

    表1 丹紅注射液對大鼠離體心臟±LVdp/dt max的影響(mmHg/s)

    表2 丹紅注射液對大鼠離體心臟LVEDD及LVESD的影響(%)

    表3 丹紅注射液對大鼠離體心臟LVSP及LVEF的影響

    2.3 丹紅注射液對大鼠LVSP及LVEF的影響 模型組大鼠用藥前10 min及灌流后0.5 h,1 h,2 h 4個時點LVSP及LVEF無變化。維拉帕米組在灌流后0.5 h,1 h,2 h 3個時點LVSP及LVEF均明顯降低。丹紅組在灌流后2 h也可降低LVSP及LVEF,與模型組比較,P<0.05,差異有統(tǒng)計學意義,如表3所示。

    3 討論

    丹紅注射液是由丹參和紅花經(jīng)科學提取而成的復方制劑,其主要的藥理作用是對心血管系統(tǒng)。其主要有效成分包括丹參酮、丹參酚酸、紅花黃色素等[7-8],其有效成分為脂溶性丹參酮及水溶性酚類物質[9],能擴張血管,活血化瘀,增加心肌毛細血管密度[10]??捎行Ц纳莆⒀h(huán)、擴張冠狀動脈、增加冠脈流量、清除氧自由基[11]及降低心肌耗氧量等作用[12]。本研究重點觀察了丹紅注射液對RH大鼠心功能影響,旨在探索丹紅注射液更多活性成分及新的適應證,為臨床用藥提供實驗依據(jù)。

    在心功能指標中,LVSP主要反映心臟前負荷及心肌收縮能力,LVSP的改變與心室容積、舒張功能和心室順應性相關,而±LVdp/dt max反映心肌收縮增加及縮短速度,是心肌收縮力的重要評價指標,與心肌收縮力呈正相關。LVEF則反應心臟泵血功能,LVEF降低則說明心臟作功及耗能降低。故±LVdp/dt max及LVSP的降低均說明心肌收縮力減弱、心肌作功及耗氧降低。本研究發(fā)現(xiàn)丹紅注射液對RH大鼠離體心功能具有一定的影響,可降低RH大鼠離體心臟LVSP、LVEF及±LVdp/dt max作用,在一定程度上提高心肌組織耐缺氧能力并使心臟順應性增加[14],其實際意義是使心臟得到有效的休息及保護。這種使大鼠離體心臟正性變力及降低LVSP的作用與王炳章的相關研究一致[13],亦有研究證實丹參丹參酮能夠減少心肌酶合成、抑制心肌損傷并有效降低心肌收縮力而起到保護心肌細胞膜的作用[15]。綜上所述,丹紅注射液對RH大鼠離體心臟具有降低心肌收縮力,減輕心臟負荷進而改善心功能的作用,在臨床上治療RH應有一定的治療意義。

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