實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物的保護(hù)及處理措施

龍子江，陳 明，高華武，王 靚，田麗娜，任振興

(安徽中醫(yī)藥大學(xué)，合肥 230031）

實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物的保護(hù)及處理措施

龍子江，陳 明，高華武，王 靚，田麗娜，任振興

(安徽中醫(yī)藥大學(xué)，合肥 230031）

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是生命科學(xué)研究和發(fā)展的重要基礎(chǔ)材料。隨著生命科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，新技術(shù)、新理念的不斷涌現(xiàn)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)作為科學(xué)理論的論證和理論的探索極為重要，然而實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物的保護(hù)和處理是保障科學(xué)研究的成功、結(jié)果準(zhǔn)確可靠的重要環(huán)節(jié)之一。因此，對(duì)實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物的保護(hù)及處理越來(lái)越被生命科研工作者重視。本文結(jié)合自身在實(shí)驗(yàn)中的一些措施和經(jīng)驗(yàn)，并結(jié)合其他學(xué)者在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的體會(huì)和認(rèn)識(shí)，對(duì)實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物的保護(hù)和處理總結(jié)和歸納。

實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物，生命科學(xué)，保護(hù)措施

生命科學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展日新月異，科研成果層出不窮，盡管實(shí)驗(yàn)方法和材料較廣，但實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生命科學(xué)研究始中越來(lái)越顯得重要。生命科學(xué)研究包含實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、儀器設(shè)備、情報(bào)信息和化學(xué)試劑四個(gè)支撐要素，其中以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物占據(jù)首位。生命科學(xué)研究始終把動(dòng)物實(shí)驗(yàn)作為研究的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的成功與否直接關(guān)系到研究的最終結(jié)果。

但在實(shí)驗(yàn)中，需對(duì)動(dòng)物進(jìn)行各種處理，如動(dòng)物的麻醉、長(zhǎng)期給藥、手術(shù)、動(dòng)物疾病模型的復(fù)制等過(guò)程，不僅會(huì)影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生存，更會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。如何保護(hù)好實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的動(dòng)物，對(duì)實(shí)驗(yàn)的成功與否起到極其重要的作用?，F(xiàn)就我中心在長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)過(guò)程總結(jié)的有關(guān)經(jīng)驗(yàn)，針對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的保護(hù)和處理措施總結(jié)如下。

1 實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物的保護(hù)和處理

1.1 手術(shù)實(shí)驗(yàn)

1.1.1 麻醉藥的選擇和使用：醫(yī)藥學(xué)研究領(lǐng)域中，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的成敗在很大程度上取決于手術(shù)過(guò)程中動(dòng)物麻醉的成功與否。麻醉劑的選擇、用量以及麻醉方式都在很大程度上影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。非揮發(fā)性麻醉藥常選用戊巴比妥鈉、氨基甲酸乙酯、水合氯醛、氯胺酮、苯戊巴比妥等，吸入性麻醉藥則常選用氟烷、異氟烷、乙醚等。氯胺酮、異氟烷等安全度大，適用于手術(shù)后動(dòng)物需立即清醒的實(shí)驗(yàn)；而戊巴比妥鈉、水合氯醛、烏拉坦則適宜用于手術(shù)時(shí)間較長(zhǎng)，手術(shù)過(guò)程中動(dòng)物處于麻醉狀態(tài)的實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物麻醉劑的應(yīng)用一般應(yīng)按千克體重計(jì)算總藥量，見表1.

表1 常用麻醉藥的用量及麻醉方式Tab.1 Doses and methods of commonly used anesthetics in biomedical exPeriments

手術(shù)后由于動(dòng)物的體溫、血壓下降，呼吸減慢，不同的實(shí)驗(yàn)應(yīng)選用不同的麻醉藥。如心肌缺血模型的復(fù)制采用氟烷、異氟烷、乙醚等吸入性麻醉藥較好，蘇醒快、死亡率低；心臟缺血再灌注模型可選氯胺酮或?yàn)趵?，既能保證在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中動(dòng)物處于麻醉狀態(tài)，也能使動(dòng)物在手術(shù)后能很快蘇醒。

為了減少吸入麻醉藥的用量、保證動(dòng)物安全，又便于在氣管內(nèi)插管、開胸時(shí)控制呼吸以及在開腹時(shí)取得滿意的肌肉松弛效果，常配合使用琥珀膽堿、潘可羅寧、三碘季銨酚等肌肉松弛藥。手術(shù)過(guò)程中動(dòng)物麻醉過(guò)量或發(fā)生休克、呼吸減慢甚至停止時(shí)，應(yīng)用小動(dòng)物呼吸機(jī)保持動(dòng)物呼吸的暢通，同時(shí)配合使用腎上腺素、阿托品、利多卡因等，對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中動(dòng)物隨時(shí)出現(xiàn)的意外情況進(jìn)行搶救，避免手術(shù)過(guò)程動(dòng)物的意外死亡影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)程、實(shí)驗(yàn)結(jié)果，甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的失敗。

1.1.2 手術(shù)后感染的防治：除牛羊等大型動(dòng)物和猴等珍貴實(shí)驗(yàn)動(dòng)物外，普通動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究階段均采用嚴(yán)格的飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生防疫制度措施，而不是通過(guò)接種疫苗和使用藥物治療的手段實(shí)現(xiàn)預(yù)防感染的目的。但在實(shí)驗(yàn)手術(shù)后，預(yù)防動(dòng)物感染的防御措施有：(1）購(gòu)買合格的動(dòng)物：購(gòu)買的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)有生產(chǎn)合格證，在實(shí)驗(yàn)前至少密切觀察1～2周，如發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)及時(shí)處理。觀察期間監(jiān)測(cè)動(dòng)物病原微生物，防止實(shí)驗(yàn)動(dòng)物經(jīng)病原微生物途徑感染。(2）實(shí)驗(yàn)環(huán)境消毒處理：實(shí)驗(yàn)室要有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證，對(duì)飼養(yǎng)室、籠具、飼料、墊料、飲用水進(jìn)行定期消毒，降低

實(shí)驗(yàn)環(huán)境途徑病原體感染風(fēng)險(xiǎn)。(3）動(dòng)物感染提前預(yù)防：對(duì)實(shí)驗(yàn)用大動(dòng)物如牛、綿羊、犬等，應(yīng)及時(shí)接種疫苗，預(yù)防牛病毒性腹瀉、綿羊食毛癥和狂犬病等疾病的發(fā)生。(4）及時(shí)捕殺逃出籠外動(dòng)物：在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如大、小鼠逃出籠外，要及時(shí)捕殺，防止互感。(5）手術(shù)器械消毒：在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，所用手術(shù)器械要進(jìn)行常規(guī)消毒處理，包括手術(shù)臺(tái)和環(huán)境等的消毒滅菌。(6）防止術(shù)后感染：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在手術(shù)后，要肌內(nèi)注射或在手術(shù)視野滴入適當(dāng)?shù)目咕幬?，如青霉素G、慶大霉素等，預(yù)防感染，但如果實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖撬幬锟垢腥拘詫?shí)驗(yàn)，則不能用抗菌藥物防治手術(shù)感染。

1.1.3 注意體溫的調(diào)節(jié)：一般實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如鼠、兔等嚙齒類動(dòng)物生存的適宜環(huán)境溫度為18℃ ～25℃，其生理功能在此范圍內(nèi)波動(dòng)不明顯。張振漢等［1］研究昆明小鼠在(-4～40）℃范圍內(nèi)能量代謝特征，結(jié)果表明當(dāng)溫度低于26℃時(shí)隨溫度的降低基礎(chǔ)代謝率逐漸增加；當(dāng)溫度超過(guò)32℃時(shí)，小鼠基礎(chǔ)代謝率顯著增加，在溫度為40℃時(shí)小鼠全部死亡。這表明小鼠的基礎(chǔ)代謝、脈搏、呼吸等生理反應(yīng)受環(huán)境溫度的影響。而手術(shù)后動(dòng)物的基礎(chǔ)代謝率下降，體溫下降，因此維持周圍環(huán)境溫度在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的范圍內(nèi)，能維持實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基礎(chǔ)代謝率，保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的存活率，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

1.1.4 保證呼吸的暢通：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物經(jīng)手術(shù)處理，特別是大規(guī)模的創(chuàng)傷手術(shù)，如進(jìn)行心肌缺血再灌注損傷模型手術(shù)，大鼠在手術(shù)過(guò)程中需借助動(dòng)物呼吸機(jī)進(jìn)行輔助呼吸。手術(shù)后動(dòng)物體質(zhì)較弱，呼吸也比較微弱，為保證動(dòng)物的呼吸應(yīng)做到：(1）保持實(shí)驗(yàn)室良好的通風(fēng)，(2）將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的舌頭拉出，防止由于麻醉劑導(dǎo)致的松弛舌根而堵塞氣道，(3）盡量減少籠內(nèi)飼養(yǎng)密度，留有充足的活動(dòng)空間，最好每籠一只，防止蘇醒的動(dòng)物擠壓處于麻醉狀態(tài)的動(dòng)物造成麻醉動(dòng)物窒息死亡。

1.2 長(zhǎng)期給藥實(shí)驗(yàn)

在長(zhǎng)期給藥的實(shí)驗(yàn)中，各給藥途徑的規(guī)范與否，不僅與動(dòng)物身體健康有關(guān)，還與實(shí)驗(yàn)操作人員的熟練程度密切相關(guān)，也關(guān)系到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和實(shí)驗(yàn)的成功與否。因此在長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)過(guò)程中為減少實(shí)驗(yàn)誤差，應(yīng)盡量由同一操作技術(shù)嫻熟的實(shí)驗(yàn)人員完成。

1.2.1 口服給藥：口服給藥是最常見的動(dòng)物給藥方式，但在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中動(dòng)物的捉持和灌胃的手法極為重要。如大、小鼠灌胃應(yīng)注意：(1）首先用左手抓住大鼠頭頸部及背部皮膚，使頭、頸、軀干在一條直線上，(2）右手握住灌胃注射器從大鼠一側(cè)嘴角進(jìn)針后再把針挪到中間，使注射器、頸、軀干保持在一條直線上，(3）灌胃針往食管進(jìn)針過(guò)程如遇到阻力時(shí)，將針頭回縮后再進(jìn)針，切不可使用粗暴蠻力，以免刺破食道，造成動(dòng)物的損傷或死亡，(4）大鼠的灌胃進(jìn)針深度一般為灌胃針長(zhǎng)的三分之二，約4～6 cm。

家兔灌胃給藥時(shí)應(yīng)注意：(1）要將家兔固定好，(2）開口器一定要從嘴角插入，同時(shí)壓住兔舌，使開口器的上的洞口對(duì)準(zhǔn)食道，(3）將導(dǎo)管從開口器洞口延食道向胃內(nèi)插入，如果遇到阻力，應(yīng)適當(dāng)回縮再繼續(xù)插入，導(dǎo)管插入的深度約15～20 cm，(4）為防止導(dǎo)管插入氣管，在導(dǎo)管插好后，將外端放入事先準(zhǔn)備好的清水中，看是否有氣泡產(chǎn)生，如有氣泡，說(shuō)明導(dǎo)管不在食管內(nèi)，應(yīng)拔出重新插入。

豚鼠灌胃給藥較為困難，可采用喂藥的辦法，減少死亡率。即將灌胃注射器的針頭拔去，將注射器插入動(dòng)物的口中，按豚鼠的吞咽的速度推注藥液達(dá)到給藥的目的。

1.2.2 靜脈給藥：靜脈注射時(shí)應(yīng)根據(jù)動(dòng)物選擇合適的血管，如家兔常選耳緣靜脈，大鼠選用尾靜脈和舌下靜脈，犬選用前肢內(nèi)側(cè)通經(jīng)脈等，應(yīng)保證注射之前血管充分?jǐn)U張，所選針頭直徑應(yīng)略小于血管。注射過(guò)程應(yīng)采先快后慢的方式，同時(shí)根據(jù)動(dòng)物的呼吸頻率、肌肉松弛度、角膜反射以及皮膚夾捏反應(yīng)來(lái)調(diào)整注射速度，當(dāng)這些反應(yīng)明顯減弱或消失時(shí)，應(yīng)立即停止注射。

1.2.3 皮下給藥：一般選取組織疏松的部位進(jìn)行皮下給藥。大、小鼠常用給藥部位為下腹部?jī)蓚?cè)，兔常用給藥部位為背部脊柱兩側(cè)，豚鼠常用后大腿內(nèi)側(cè)，而犬、貓則選為大腿外側(cè)。進(jìn)針時(shí)針頭刺入角度以30°適合，角度太大容易刺入肌肉層，角度太小則易刺入皮內(nèi)。皮下給藥一般選用易溶解、刺激性小及疫苗等生物藥品，因注射部位有較厚的脂肪層，藥物吸收較慢，給藥后5～10 min效果才會(huì)明顯。長(zhǎng)期給藥應(yīng)采用輪流交替注射方式，及時(shí)更換注射部位，防止注射部位出現(xiàn)腫塊、炎癥或破潰等現(xiàn)象。

1.2.4 腹腔給藥：腹腔注射多選擇下腹部腹白線兩側(cè)進(jìn)針，進(jìn)針角度以45°最好。為了避免注射器針頭碰到內(nèi)臟，在注射時(shí)，將針頭向上挑起后進(jìn)針，如大、小鼠可將頭向下傾斜，使內(nèi)臟向下移動(dòng)，可防止進(jìn)針后傷及內(nèi)臟，出現(xiàn)不必要的損傷或死亡。

1.3 動(dòng)物病理模型復(fù)制

在大多數(shù)藥物研究實(shí)驗(yàn)中，為驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)藥物對(duì)疾病的防治效果，常利用各種手段復(fù)制與臨床疾病相類似的模型動(dòng)物，因此動(dòng)物模型的成功與否，直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。以幾個(gè)常見實(shí)驗(yàn)為例，介紹動(dòng)物模型復(fù)制過(guò)程中應(yīng)注意事項(xiàng)，為實(shí)驗(yàn)者在進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)中提供借鑒。

1.3.1 心肌缺血模型的復(fù)制：心肌缺血的模型可分為以下四類：急性心肌缺血模型、慢性心肌缺血模型、可控性心肌缺血模型和離體心肌缺血模型?，F(xiàn)以大鼠冠狀動(dòng)脈結(jié)扎致急性心肌缺血模型為例，分析造模過(guò)程中應(yīng)注意的事項(xiàng)。(1）實(shí)驗(yàn)前對(duì)手術(shù)器械消毒，大鼠麻醉后固定好，(2）剪去胸腔術(shù)野毛發(fā)，采用酒精配合碘酒消毒，(3）于左第4肋骨間開胸?cái)D出心臟，距左冠狀動(dòng)脈起點(diǎn)2～3 mm處穿5-0號(hào)手術(shù)線穿線結(jié)扎［2］。結(jié)扎部位太上容易損傷心耳，也不便打結(jié)。穿線時(shí)進(jìn)針深度應(yīng)適宜，既要避免過(guò)于表淺未結(jié)扎到左冠狀動(dòng)脈，也要避免進(jìn)針過(guò)深刺傷心肌，(4）結(jié)扎后送回心臟，閉合胸腔，依次縫合肌肉和皮膚，(5）傷口處噴灑青霉素注射液粉末，肌內(nèi)注射20 U青霉素注射液，預(yù)防感染，連續(xù)3 d。并應(yīng)注意保暖，最好在術(shù)后3 d內(nèi)單籠飼養(yǎng)［3，4］。

1.3.2 糖尿病模型的復(fù)制：糖尿病模型復(fù)雜，有I型和II型之分?，F(xiàn)以小鼠腹腔注射四氧嘧啶復(fù)制糖尿病模型為例，對(duì)造模過(guò)程中應(yīng)注意的問(wèn)題加以分析。糖尿病造模采用少量多次注射四氧嘧啶的方法造模，即小鼠禁食12 h后以200 mg/kg劑量腹腔注射四氧嘧啶，24 h后再以100 mg/kg劑量腹腔注射給藥，恢復(fù)進(jìn)食［5］。糖尿病模型小鼠造模后使用斷尾法采血測(cè)血糖，小鼠于尾尖減去約5 mm，取血后棉球壓迫止血，放回籠內(nèi)飼養(yǎng)，待再次尾尖部取血。糖尿病小鼠飼養(yǎng)應(yīng)注意：(1）由于體質(zhì)差，應(yīng)在SPF的環(huán)境下進(jìn)行喂養(yǎng)，并控制每籠小鼠的數(shù)量，密度不宜過(guò)大，(2）糖尿病小鼠的尿量大，帶糖，且小鼠的體重減輕，活動(dòng)減弱，應(yīng)當(dāng)每天更換籠內(nèi)的墊料，添加食物和飲水，以免滋生大量病菌，造成小鼠不必要的死亡。

1.3.3 胃潰瘍模型的復(fù)制：胃潰瘍模型的復(fù)制方法很多。如使用冰醋酸復(fù)制大鼠慢性胃潰瘍模型，在操作過(guò)程應(yīng)注意：(1）手術(shù)前要禁食12 h，(2）手術(shù)前手術(shù)器械應(yīng)消毒滅菌，術(shù)野應(yīng)進(jìn)行被毛消毒，手術(shù)過(guò)程中應(yīng)保持無(wú)菌，避免鼠毛進(jìn)入腹腔造成腹腔內(nèi)感染，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)鼠死亡，(3）打開腹腔，小心將胃從腹腔移出，操作要輕柔快捷，以減少粘連，避免內(nèi)臟移位傷及胃和其他臟器，(4）注入冰醋酸時(shí)進(jìn)針一定要到胃內(nèi)才推注，防止外漏，減少其他組織臟器的損傷，(5）縫合時(shí)應(yīng)肌肉和皮膚分層縫合，保證傷口愈合，(6）手術(shù)結(jié)束后在傷口處消毒，以減少感染，(7）術(shù)后大鼠因饑餓或疼痛因素，進(jìn)食量會(huì)大增，過(guò)量進(jìn)食則會(huì)導(dǎo)致胃過(guò)度擴(kuò)張，大量食物蓄積胃內(nèi)，引起腹脹，因此胃部造模實(shí)驗(yàn)術(shù)后12 h，應(yīng)節(jié)制實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲食，以免出現(xiàn)術(shù)后腹脹的現(xiàn)象［6］，在節(jié)食時(shí)應(yīng)適當(dāng)?shù)慕o予糖鹽水，以維持其血糖和電解質(zhì)處于正常水平。

1.3.4 腎衰模型的復(fù)制：腎衰模型的復(fù)制主要有藥物法和腎大部切除法兩種。藥物法是由腺嘌呤或者高濃度甘油誘導(dǎo)，而腎大部切除法則是切除5/6腎臟復(fù)制慢性腎衰模型?，F(xiàn)以腎切除法為例介紹腎衰模型。傳統(tǒng)方法分兩次手術(shù)，一期手術(shù)結(jié)扎左腎上下極后切除結(jié)扎部分約2/3腎組織，二期手術(shù)將右側(cè)腎臟全切除。另一方法為改良后的一次手術(shù)方法，即在切除左腎2/3腎組織同時(shí)將右側(cè)腎臟全切除［7］。腎切除法是在保存殘留腎組織相對(duì)正常的前提下形成腎超負(fù)荷工作模式，符合腎小球高度濾過(guò)導(dǎo)致腎衰竭病理機(jī)制。模型制備過(guò)程對(duì)動(dòng)物的創(chuàng)傷較大，因此需要操作技術(shù)嫻熟，開口定位準(zhǔn)確，臟器切除體積要一致，手術(shù)過(guò)程要注意止血，術(shù)后縫合采用逐層縫合方式防止手術(shù)口裂開，要防止術(shù)后感染。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物要在手術(shù)后4周才開始進(jìn)入慢性腎衰期，實(shí)驗(yàn)周期較長(zhǎng)，在做好防感染的同時(shí)，藥按期觀察動(dòng)物尿量，檢測(cè)尿蛋白的含量，確定模型是否成功。

1.3.5 腦出血和栓塞模型的復(fù)制：以腦微栓塞大鼠模型為例。手術(shù)操作過(guò)程應(yīng)盡量避免過(guò)度麻醉、擠壓頸動(dòng)脈竇、壓迫氣管和大量出血等意外情況發(fā)生，減少動(dòng)物死亡。手術(shù)中要保證手術(shù)視野清晰干凈，血管周圍神經(jīng)叢應(yīng)鈍性分離且動(dòng)作輕柔，以免影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成大鼠呼吸或心跳驟停。在注射微栓子時(shí)，速度不宜過(guò)快，拔出導(dǎo)管時(shí)可先用動(dòng)脈夾夾住破口近端，然后結(jié)扎頸外動(dòng)脈，避免造成回血過(guò)多，栓子隨血流溢出。手術(shù)過(guò)程中應(yīng)注意觀察呼吸、心率變化及動(dòng)物反應(yīng)，及時(shí)追加麻藥，避免動(dòng)物掙扎造成的實(shí)驗(yàn)意外［8］。

又如在制備大鼠硬膜下血腫模型時(shí)，將大鼠麻醉后固定于腦立體定位儀上，在手術(shù)過(guò)程中要密切觀察大鼠呼吸節(jié)律、心率變化等情況，而且在縫合頭部傷口之前要用快速凝固膠水及牙科用粘固粉封閉鉆孔，傷口消毒后，將大鼠取俯臥位放在保溫鼠籠內(nèi)［9，10］。

1.4 手術(shù)后飼養(yǎng)

1.4.1 食物的選擇與投放：促使手術(shù)后動(dòng)物生理機(jī)能快速恢復(fù)的重要因素是提供充足的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)。不同實(shí)驗(yàn)手術(shù)后的動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)需求不相同。因此，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)的類型、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類、動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)需求選擇科學(xué)合理的飼料配方，給予適宜的飼料。如制備高血脂模型動(dòng)物就應(yīng)該選擇含高脂配比的飼料，增加實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷某晒β省?/p>

動(dòng)物模型制備過(guò)程中，常會(huì)由于手術(shù)創(chuàng)傷、失血過(guò)多、饑餓或者藥物因素導(dǎo)致動(dòng)物的免疫功能低下。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中觀察動(dòng)物出現(xiàn)這種情況時(shí)，應(yīng)給予高蛋白飼料為動(dòng)物提供營(yíng)養(yǎng)提高免疫功能，保證實(shí)驗(yàn)?zāi)苡行蜻M(jìn)行［11］。應(yīng)選擇新鮮的飼料喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，防止受潮、變質(zhì)、發(fā)霉、蟲蛀以及重金屬污染的飼料進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。另外，對(duì)一些特殊動(dòng)物的飲水也應(yīng)注意，如豚鼠每日的飲水中要加入適量的Vc，每日要按時(shí)給動(dòng)物加食換水。

1.4.2 墊料的選擇與更換：手術(shù)后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物由于有傷口，放回籠內(nèi)飼養(yǎng)時(shí)一定要避免傷口與墊料直接接觸，如去勢(shì)法復(fù)制大鼠骨質(zhì)疏松模型，手術(shù)后為防止縫合傷口感染，應(yīng)取仰臥位將其放入籠內(nèi)，觀察其活動(dòng)狀態(tài)和傷口愈合情況?；\內(nèi)墊料應(yīng)選擇松軟、吸濕性強(qiáng)、無(wú)異味、不含重金屬及揮發(fā)性物質(zhì)的木屑，其原材料應(yīng)未被有毒有害物質(zhì)、微生物、寄生蟲污染，保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有個(gè)舒適的生活環(huán)境。

1.4.3 其他：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在飼養(yǎng)過(guò)程中除了溫度、濕度、食物、墊料等因素外，還應(yīng)注意適宜的飼養(yǎng)密度、保持良好的通風(fēng)、換氣和光照等飼養(yǎng)條件，并嚴(yán)格做好廢棄物的清理，手術(shù)后的動(dòng)物對(duì)環(huán)境中致病菌的敏感性較高，因此要對(duì)換去的墊料、動(dòng)物尸體及排泄物及時(shí)清理，保持實(shí)驗(yàn)室清潔，防止蚊蟲孳生。此外還要對(duì)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行嚴(yán)格要求，對(duì)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行崗前培訓(xùn)，充分理解和掌握各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生活習(xí)性、生理、生態(tài)等。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的動(dòng)物處理

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為生命科學(xué)研究做出了貢獻(xiàn)，應(yīng)該享受到相應(yīng)的動(dòng)物福利。實(shí)驗(yàn)后的動(dòng)物應(yīng)妥善處死，常用的處死方法有：折頸法、電擊法、藥物法、CO法和注射空氣法等，研究者應(yīng)根據(jù)不同動(dòng)物種類，盡可能選擇給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物帶來(lái)最小痛苦的處死方法，可選擇安樂死，減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡時(shí)疼痛的折磨［12］。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在被處死并確認(rèn)死亡后，其尸體應(yīng)該集中送至焚燒爐燒毀處理，不得將尸體就地深埋或者拋入江河湖海污染環(huán)境，更不能隨意扔棄或者出售。

3 小結(jié)與展望

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是生命科學(xué)的重要環(huán)節(jié)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的動(dòng)物保護(hù)直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性、可靠性和實(shí)驗(yàn)的成功與否。因此，作為實(shí)驗(yàn)人員，應(yīng)該將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的保護(hù)貫穿整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，包括實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的購(gòu)買，飼養(yǎng)管理、動(dòng)物手術(shù)前后的護(hù)理、給藥以及實(shí)驗(yàn)結(jié)束之后動(dòng)物的處理等各個(gè)環(huán)節(jié)，要達(dá)此目的需要做到。

3.1 提高實(shí)驗(yàn)人員對(duì)動(dòng)物的保護(hù)意識(shí)

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中善待動(dòng)物 所有實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)過(guò)程的每個(gè)環(huán)節(jié)要牢記只有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康，才能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠和實(shí)驗(yàn)的成功，故在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中動(dòng)物的飼養(yǎng)、手術(shù)、給藥等環(huán)節(jié)要善待動(dòng)物，盡可能滿足實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生理和精神需求，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物舒適，保證實(shí)驗(yàn)過(guò)程順利進(jìn)行。

3.2 提高實(shí)驗(yàn)人員的技能，減輕對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物傷害

實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)之前要做好詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)規(guī)劃和預(yù)實(shí)驗(yàn)，提高實(shí)驗(yàn)技能，防止正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中由于實(shí)驗(yàn)者實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)不嫻熟對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物帶來(lái)不必要的疼痛和創(chuàng)傷，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3.3 建立標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)室，提高生物安全

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)應(yīng)在相應(yīng)的生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，一方面能保證實(shí)驗(yàn)過(guò)程中動(dòng)物不受感染，保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。另一方面，防止有害生物因素污染，避免實(shí)驗(yàn)室生物安全事件的發(fā)生，降低實(shí)驗(yàn)人員感染疾病的風(fēng)險(xiǎn)。

3.4 科學(xué)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的痛苦

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，在保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的前提下，盡量縮短實(shí)驗(yàn)周期，盡量減少手術(shù)的傷害等，減少動(dòng)物意外死亡數(shù)和降低患病率，提高實(shí)驗(yàn)室資源利用率和設(shè)備周轉(zhuǎn)率，保證動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)茼樌M(jìn)行。

總之，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為人類健康研究做出了巨大貢獻(xiàn)，作為進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究人員，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要保證動(dòng)物的基本福利，善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，科學(xué)的保護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，確保實(shí)驗(yàn)研究獲得可靠的實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，圓滿完成科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究

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Animal treatment and protection measures during experiments

LONG Zi-jiang，CHEN Ming，GAO Hua-wu，WANG Liang，TIAN Li-na，REN Zhen-xing
(Anhui University of Chinese Medicine，Hefei 230031，China）

ExPerimental animals are imPortant basis for life science research and develoPment.Along with the continuous develoPment of science and technology，new technology and new ideas emerging，treatment and Protection of animals during exPeriments are imPortant condition to ensure the scientific results accurate and reliable，so scientists have Paid more attention to the issues of animal welfare and Protection.This article summarizes the animal treatment and Protection measures during exPeriments based on both own work and exPerience and knowledge of other scientists.

ExPerimental animals；Life sciences；Protection measures

R-33 < class="emphasis_bold">【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

A

1671-7856（2015）09-0081-05

10.3969.j.issn.1671.7856.2015.009.016

龍子江(1956-），男，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：中藥對(duì)心腦血管疾病的防治作用研究。

2015-08-20

教育與科普