抗凝劑EDTA導(dǎo)致血小板假性減少現(xiàn)象的分析

仝德勝，楊靜，沈國(guó)強(qiáng)

(1、江蘇省血吸蟲病防治研究所，江蘇 無 錫214064；2、無錫市第九人民醫(yī)院，江蘇 無 錫214062)

血小板計(jì)數(shù)是臨床上最常規(guī)的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，是血常規(guī)的檢測(cè)指標(biāo)之一，其結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響到對(duì)患者的診斷和治療。隨著血細(xì)胞分析儀的廣泛推廣和使用，EDTA-K2作為血細(xì)胞分析的較為理想的抗凝劑已被廣泛使用，但EDTA可導(dǎo)致個(gè)別人血液中血小板發(fā)生聚集引起假性血小板減少(EDTA-PTCP)，因此引起誤診的病例，這種現(xiàn)象現(xiàn)在有越來越多的報(bào)道[1-3]。近年來我們?cè)诠ぷ髦邪l(fā)現(xiàn)幾例EDTA依賴性血小板減少的患者，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 選取2012年8月-2014年5月在無錫市第九人民醫(yī)院住院患者8例和2014年6月在江蘇省血吸蟲病防治研究所健康體檢人員1例，其臨床癥狀均無皮膚紫癜、牙齦出血、鼻出血等癥狀。其中最早1例住院患者經(jīng)輸注10單位機(jī)采血小板后，隔日檢測(cè)血小板，數(shù)量沒有明顯改變。

1.2 儀器和試劑 Sysmex XE-1800血液分析儀及原裝試劑，貝克曼-庫(kù)爾特Ac.T5diff AL血細(xì)胞分析儀及原裝試劑；OLYMPUS顯微鏡，改良牛鮑氏(Neubauer)計(jì)數(shù)板，自配人工計(jì)數(shù)血小板草酸銨稀釋液，BD公司生產(chǎn)的EDTA-K2真空采血管。

1.3 方法 第1例患者經(jīng)專家會(huì)診后重新抽取4ml靜脈血分別由EDTA-K2抗凝2ml和肝素鈉抗凝2ml，兩份樣本在Sysmex XE-1800血液分析儀分別于10min和60min各檢測(cè)三次取均值，同時(shí)制備EDTA-K2抗凝血的涂片經(jīng)瑞氏染色后鏡檢，觀察血小板的形態(tài)和聚集情況。另外取患者末梢血加入草酸銨稀釋液按全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程操作計(jì)數(shù)血小板并制作血涂片經(jīng)瑞氏染色后鏡檢，觀察血小板的形態(tài)和聚集情況[4]。后8例都由第二日清晨抽血按上述方法檢測(cè)，其中江蘇省血吸蟲病防治研究所體檢人員1例在貝克曼-庫(kù)爾特Ac.T5diff AL血細(xì)胞分析儀上檢測(cè)

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采 用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2008年8月第一例患者在無錫第九人民醫(yī)院住院，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)血小板結(jié)果25×109/L,病人沒有皮膚紫癜、牙齦出血、鼻出血等癥狀，后輸入10單位機(jī)采血小板后，隔日檢測(cè)血小板結(jié)果27×109/L，經(jīng)會(huì)診，手工檢測(cè)血小板結(jié)果188×109/L，經(jīng)EDTAK2抗凝血的血涂片由瑞氏染色鏡檢發(fā)現(xiàn)大量血小板聚集，末梢血涂片血小板散在無聚集。另外8例檢測(cè)結(jié)果見表1。

使用EDTA-K2抗凝劑兩次血小板計(jì)數(shù)(10min和60min)明顯低于使用抗凝劑肝素鈉和手工血小板計(jì)數(shù)，與后兩種方法計(jì)數(shù)均存在明顯差異 (P<0.05)；使用抗凝劑肝素鈉檢測(cè)的血小板數(shù)和手工檢測(cè)血小板數(shù)之間沒有明顯差異(P>0.05)。

3 討論

乙二胺四乙酸(EDTA)鹽對(duì)白細(xì)胞、紅細(xì)胞形態(tài)影響很小，因此國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(ICSH)推薦將EDTA-K2作為血細(xì)胞計(jì)數(shù)的首選抗凝劑。但EDTA-K2有時(shí)會(huì)引起血小板聚集，從而在血細(xì)胞分析儀上檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)血小板假性減少，文獻(xiàn)報(bào)道發(fā)生率0.09%~0.21%[5-7]。其發(fā)生機(jī)制是由于EDTA-K2作為抗凝劑的前提下出現(xiàn)的免疫介導(dǎo)血液中的冷抗血小板自身抗體，使血小板發(fā)生凝聚。盡管臨床發(fā)生率低，但極易延誤診斷，造成不必要的治療，增加病人的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，我們遇到的第一例患者就因此為患者輸入10單位機(jī)采血小板。

表1 3種檢測(cè)方法測(cè)定血小板結(jié)果比較

EDTA-PTCP患者一般除原發(fā)疾病臨床表現(xiàn)外，無皮膚黏膜紫癜、牙齦出血、鼻出血、胃腸道和泌尿系統(tǒng)出血和臨床表現(xiàn)。因此為排除EDTA-K2致血小板假性減少，有文獻(xiàn)報(bào)道，應(yīng)重新采樣在EDTA-K2抗凝管中加入丁胺卡那霉素或使用枸櫞酸鈉抗凝管來解決，另外肝素鈉也可以作為解決血小板假性減少的抗凝劑使用，我們?cè)趯?shí)際工作中就是采用此方法，從結(jié)果上看，基本可以解決這個(gè)問題[8，9]。當(dāng)然，為排除因血小板假性減少而發(fā)生誤診，檢驗(yàn)醫(yī)生與臨床醫(yī)生應(yīng)及時(shí)溝通，及時(shí)詢問病史。EDTA-K2致血小板假性減少的血小板計(jì)數(shù)和實(shí)際值相差很大，因此對(duì)臨床上無出血表現(xiàn)而血小板計(jì)數(shù)明顯減少患者，應(yīng)引起臨床和檢驗(yàn)醫(yī)生注意，要考慮EDTA-K2致血小板假性減少可能性，及時(shí)手工計(jì)數(shù)血小板或更換抗凝劑使用儀器分析并制作血涂片進(jìn)行檢測(cè)[10]，避免誤診。

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