IGF2和IMP3在胃癌組織中的表達(dá)及其意義

陳文芳，徐惠霞,紀(jì)恒勝，李玉軍

(1 青島大學(xué)附屬醫(yī)院病理科，山東 青島 266003； 2 蒙陰縣人民醫(yī)院病理科； 3 青島大學(xué)附屬醫(yī)院病案室； 4 青島大學(xué)附屬醫(yī)院中藥房)

?

IGF2和IMP3在胃癌組織中的表達(dá)及其意義

陳文芳1,2，徐惠霞3,紀(jì)恒勝4，李玉軍1

(1 青島大學(xué)附屬醫(yī)院病理科，山東 青島 266003； 2 蒙陰縣人民醫(yī)院病理科； 3 青島大學(xué)附屬醫(yī)院病案室； 4 青島大學(xué)附屬醫(yī)院中藥房)

目的 探討胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF2)和IGF2 mRNA結(jié)合蛋白3(IMP3)在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法 采用免疫組化SP法檢測(cè)78例胃癌及62例胃切緣組織中IGF2和IMP3蛋白表達(dá)，并分析它們與臨床病理指標(biāo)之間的關(guān)系。結(jié)果 胃癌組織中IGF2和IMP3的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于胃切緣組織(χ2=116.301、122.666，P<0.01)。IGF2的表達(dá)與腫瘤分化程度、TNM分期、脈管癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤的復(fù)發(fā)有關(guān)(χ2=7.742～14.524，P<0.05)，而與病人性別、年齡及包塊長(zhǎng)徑無(wú)關(guān)(P>0.05)。IMP3表達(dá)與腫瘤分化程度、脈管癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤的復(fù)發(fā)有關(guān)(χ2=4.457～6.281，P<0.05)，而與病人年齡、性別、TNM分期、包塊長(zhǎng)徑無(wú)關(guān)(P>0.05)。兩者在胃癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.366，P<0.05)。結(jié)論 IGF2和IMP3的檢測(cè)對(duì)胃癌預(yù)后判斷有一定的價(jià)值，兩者可能成為胃癌預(yù)后判斷新的有用指標(biāo)。

胃腫瘤；胰島素樣生長(zhǎng)因子2；IMP3；預(yù)后

腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與多種癌基因的表達(dá)與調(diào)控有關(guān)。近年研究顯示，胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF2)在細(xì)胞的分化、增殖、胚胎的生長(zhǎng)發(fā)育以及腫瘤細(xì)胞增殖過(guò)程中有重要促進(jìn)作用[1]。IGF2 mRNA結(jié)合蛋白3(IMP3)是一種高度保守的mRNA結(jié)合蛋白，它可通過(guò)與IGF2 Leader3 mRNA的結(jié)合從而調(diào)節(jié)IGF2的水平，進(jìn)而調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖[2]。本研究采用SP法檢測(cè)胃癌組織中IGF2和IMP3表達(dá)，探討其在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及其意義。

1 材料與方法

1.1 材料來(lái)源

選取蒙陰縣人民醫(yī)院病理科2010年1月—2012年12月手術(shù)治療胃癌根治標(biāo)本78例，其中男56例，女22例；年齡41～81歲，平均63.13歲。術(shù)后病理均證實(shí)為原發(fā)性胃腺癌，其中中高分化14例，低分化64例；包塊長(zhǎng)徑≤2 cm者6例，>2 cm者72例；TNM 分期Ⅰ～Ⅱ期7例，Ⅲ～Ⅳ期71例；侵及漿膜58例，未達(dá)漿膜20例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性病例55例，陰性23例。并隨機(jī)選取以上標(biāo)本組織的切緣62例作為對(duì)照。

1.2 試劑

羊抗人IMP3和IGF2多克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Stanta Cruz公司，修復(fù)液及顯色劑購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.3 免疫組化染色及判定標(biāo)準(zhǔn)

免疫組化采用SP法，PBS代替一抗作為空白對(duì)照。結(jié)果判斷：IGF2和IMP3均為胞質(zhì)著色，按染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞的比例并參考MATTHEW等[3]的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行劃分：無(wú)表達(dá)為(-)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<50%或染色較淺為(+)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥50%且染色較深為()，將(+)與()均作為陽(yáng)性。

2 結(jié) 果

2.1 IGF2和IMP3在胃癌和胃癌切緣組織中的表達(dá)情況

IGF2(圖1A)和IMP3(圖1B)在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為73.08%和89.74%，二者均明顯高于胃切緣組織的27.42%、24.19%，差異有顯著意義(χ2=116.301、122.666，P<0.01)。

2.2 IGF2和IMP3的表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系

胃癌組織中IGF2的表達(dá)與腫瘤分化程度、臨床分期、脈管中癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤復(fù)發(fā)有關(guān)(χ2=7.742～14.524，P<0.05)，而與病人年齡、性別及包塊長(zhǎng)徑無(wú)關(guān)(P>0.05)。胃癌組織中IMP3的表達(dá)分別與腫瘤分化程度、脈管中癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤的復(fù)發(fā)有關(guān)(χ2=4.457～6.281，P<0.05)，而與病人的年齡、性別、TNM分期、包塊長(zhǎng)徑等均無(wú)關(guān)(P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.3 IGF2和IMP3在胃癌組織中表達(dá)的相關(guān)性

Spearman等級(jí)相關(guān)分析研究顯示，胃癌組織中IGF2和IMP3的表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.366，P<0.001)。

3 討 論

IGF2屬于IGFs家族成員，是一類(lèi)小分子單鏈多肽，能夠促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂，刺激細(xì)胞增殖以及DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，刺激組織器官的生長(zhǎng)和分化，抑制細(xì)胞凋亡[4]。生理?xiàng)l件下具有促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂、胚胎形成及產(chǎn)后生長(zhǎng)發(fā)育等作用，而在病理?xiàng)l件下，可促進(jìn)細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)化、抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡，在多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移等方面具有重要意義[5]。本研究結(jié)果顯示，IGF2在胃癌組織中高表達(dá)。覃江等[6]研究也顯示，在正常胃黏膜、癌前病變、胃癌組織中IGF2的表達(dá)呈逐漸遞增的趨勢(shì)，提示IGF2過(guò)表達(dá)可能促使細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果還顯示，IGF2的陽(yáng)性表達(dá)與組織分級(jí)、臨床分期、脈管癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤的復(fù)發(fā)呈正相關(guān)，且隨著臨床分期增加及分化程度的降低，IGF2的陽(yáng)性表達(dá)率升高。研究表明，IGF2可直接激活尿激酶纖溶酶原活化因子(u-PA)啟動(dòng)子，上調(diào)u-PA的表達(dá)水平，引起細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)降解，影響腫瘤的侵襲能力[7]，同時(shí)IGF2還有促進(jìn)腫瘤血管形成的能力。IGF2高表達(dá)可能通過(guò)上述機(jī)制影響胃癌的分化、進(jìn)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等惡性特征。腫瘤生長(zhǎng)分化和侵襲轉(zhuǎn)移是影響預(yù)后的主要因素[8]，IGF2陽(yáng)性病人預(yù)后差，PETERS等[9]也認(rèn)為IGF2和乳癌分期之間存在相關(guān)性，且IGF2陽(yáng)性率越高的病人預(yù)后越差。

表1 胃癌組織中IGF2和IMP3表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系(例(χ/%))

IMP3在正常成年人體組織內(nèi)幾乎檢測(cè)不到，但是在胚胎早期可以在上皮組織、肌肉組織、肝組織和胎盤(pán)組織等檢測(cè)到[10]。IMP3在胚胎期通過(guò)與IGF2的leader-3 mRAN的5非翻譯區(qū)(5-UTR)相結(jié)合從而抑制其翻譯。但LIAO等[11]對(duì)人白血病細(xì)胞的研究顯示，IMP3通過(guò)與IGF2的mRNA相結(jié)合增加IGF2的表達(dá)，從而通過(guò)IGF2途徑促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖。IMP3還可能影響細(xì)胞的黏附和侵襲，降低細(xì)胞之間的黏附性，增加細(xì)胞的侵襲性，促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移。YUAN等[12]對(duì)直腸癌研究結(jié)果顯示，IMP3陽(yáng)性表達(dá)提示病人預(yù)后差和較短生存期，IMP3是促進(jìn)腫瘤惡性行為的重要因子，其具體機(jī)制尚未完全闡明，但其與腫瘤惡性增殖與轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示，IMP3在胃癌組織中高表達(dá)且其表達(dá)與腫瘤分化差、存在脈管癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的惡性行為特征有關(guān)，推測(cè)胃癌組織中IMP3高表達(dá)病人預(yù)后差，IMP3是促發(fā)胃癌侵襲性的重要因子，它可能成為一個(gè)預(yù)后觀察指標(biāo)。

A：IGF2在胃癌組織陽(yáng)性表達(dá)；B：IMP3在胃癌組織陽(yáng)性表達(dá)。SP法。

IGF2的基因表達(dá)受多種因素共同調(diào)控，其轉(zhuǎn)錄物包括6種mRNA。IMP3主要與IGF2 Leader3 mRNA結(jié)合，通過(guò)促進(jìn)Leader3 mRNA的翻譯進(jìn)而上調(diào)IGF2蛋白的表達(dá)水平[13]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，IGF2和IMP3在胃癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)。林黎娟等[14]研究證實(shí)，IMP3-IGF2路徑推動(dòng)肝癌的發(fā)生、發(fā)展，二者聯(lián)合檢測(cè)可能為肝癌檢測(cè)及預(yù)后的新指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，在胃癌組織中IGF2和IMP3呈現(xiàn)高表達(dá)，IGF2和IMP3均陽(yáng)性的病人預(yù)后差，二者聯(lián)合檢測(cè)可能是胃癌診斷及判斷預(yù)后的有用指標(biāo)。

[1] 朱嬋,徐勇飛,渠利利,等. IGF2的生物學(xué)特性及其與疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2010,31(9):966-969.

[2] BEJAN P R, DURDOV M G, CAPKUN V, et al. IMP3 can predict aggressive behavior of lung adenocinoma[J]. Diagn Pathol, 2012,7(11): e50621.

[3] MATHEW J, HINES J E, OBAFUNWA J O, et al. CD44 is expressed in hepatocellular carcinomas showing vascular invasion[J]. J Pathol, 1996,179(1):74-79.

[4] 張清華,王言奎. 宮頸癌組織HIF-1α和IGF-2表達(dá)及意義[J]. 齊魯醫(yī)學(xué)雜志, 2011,26(1):8-10.

[5] CUI H, CRUZ-CORREA M, GIARDIELLO F M, et al. Loss of IGF2 imprinting: a potential marker of colorectal cancer risk[J]. Science, 2003,299(5613):1753-1755.

[6] 覃江,梁增文,黃振錄. 胃癌及癌前病變組織中IGF2的表達(dá)及意義[J]. 廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2007,24(5):700-701.

[7] DUNN S E, TORRES J V, OH J S, et al. Up-regulation ofurokinase-type plasminogen activator by insulin-like growth factor-Ⅰ depends upon phosphatidylinositol-3 kinase and mito-gen-activated protein kinase kinase[J]. Cancer Res, 2001,61(4):1367-1374.

[8] 宋培鐸,洪光晨. 胃癌病人血清與癌組織nm23H1蛋白表達(dá)及臨床病理意義[J]. 齊魯醫(yī)學(xué)雜志, 2014,29(1):6-7,10.

[9] PETERS M G, FARIAS E, COLOMBO L, et al. Inhibition of invasion and metastasis by glypican-3 in a syngeneic breast cancer model[J]. Breast Cancer Res Treat, 2003,80(2):221-232.

[10]MUELLER-PILLASCH F, POHL B, WILDA M, et al. Expression of the highly conserved RNA binding protein KOC in embryogenesis[J]. Mech Dev, 1999,88(1):95-99.

[11]LIAO B, HU Y, HERRICK D J, et al. The RNA-binding protein IMP-3 is a translational activator of insulin-like growth factor Ⅱ leader-3 mRNA during proliferation of human K562 leukemia cells[J]. J Biol Chem, 2005,280(18):18517-18524.

[12]YUAN R H, WANG C C, CHOU C C, et al. Diffuse expression of RNA-Binding protein IMP3 predicts high-stage lymph node metastasis and poor prognosis in colorectal adenocarcinoma[J]. Ann Surg Oncol, 2009,16(6):1711-1719.

[13]林黎娟,張錦輝,王研,等. 肝細(xì)胞癌組織中IGF2和IMP3表達(dá)對(duì)預(yù)后評(píng)估的臨床病理學(xué)意義[J]. 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 2013,29(4):361-364.

(本文編輯 厲建強(qiáng))

EXPRESSIONS OF IGF2 AND IMP3 AND THEIR CLINICAL SIGNIFICANCE IN GASTRIC CARCINOMA

CHENWenfang,XUHuixia,JIHengsheng,LIYujun

(Department of Pathology, The Affiliated Hospital of Qingdao University, Qingdao 266003, China)

ObjectiveTo explore the expressions of IGF2 and IMP3 protein and their clinical significance in gastric carcinoma.MethodsEmploying immunohistochemical method, the expressions of IGF2 and IMP3 in the cancer tissue and in its cutting edge were detected, the correlation between the expressions and clinicopathological features was analyzed.ResultsThe positive expression rate of IGF2 and IMP3 in the cancer tissue was significantly higher than that in the cutting-edge gastric tissue (χ2=116.301,122.666;P<0.01). The expression of IGF2 was closely related with the degree of cell differentiation, TNM sta-ging, vessel cancer embolus, lymph node metastasis and recurrence (χ2=7.742-14.524,P<0.05), but not with the gender, age of the patient and long diameter of the mass (P>0.05). The expression of IMP3 was related with the degree of cell differentiation, vessel cancer embolus, lymph node metastasis, and recurrence (χ2=4.457-6.281,P<0.05), but not with the age and gender of the patient, TNM staging and long diameter of the mass (P>0.05). The two biomarkers were positively correlated in tissue of gastric cancer (rs=0.366,P<0.05).ConclusionThe detection of IGF2 and IMP3 has a certain value, and both of them are likely to become a new marker, in predicting the prognosis of gastric cancer.

stomach neoplasms; insulin-like growth factor 2; IMP3; prognosis

2014-10-18;

2015-05-18

陳文芳(1979-)，女，碩士，主治醫(yī)師。

李玉軍(1966-)，男，碩士，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師。

R735.2

A

1008-0341(2015)04-0412-03