肝硬化自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎患者前炎癥細(xì)胞因子的改變

陳玉軍 黃佩杰

肝硬化自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎患者前炎癥細(xì)胞因子的改變

陳玉軍 黃佩杰

目的 探討肝硬化自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎(SBP)患者和肝硬化伴無菌性腹水(SA)患者體內(nèi)前炎癥細(xì)胞因子腫瘤壞死因子-α(TNF-α) 、白細(xì)胞介素-6(IL-6)的水平及改變的臨床意義。方法 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè) 188例肝炎肝硬化腹水患者［其中肝硬化伴有自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎(SBP組)78例, 肝硬化伴有無菌性腹水(SA組)110例］腹水、血液標(biāo)本中TNF-α、IL-6水平, 同時(shí)應(yīng)用鱟試劑三肽顯色基質(zhì)偶氮法檢測(cè)標(biāo)本內(nèi)毒素(LPS)水平。同期20例健康體檢者作為健康對(duì)照組,并對(duì)三組LPS、TNF-α、IL-6水平進(jìn)行比較。結(jié)果 SBP組、SA組血漿LPS、TNF-α、IL-6濃度均顯著高于健康對(duì)照組(P＜0.001)； SBP組腹水LPS、TNF-α、IL-6濃度均顯著高于SA組(P＜0.001)；肝硬化腹水患者血漿內(nèi)毒素與TNF-α、IL-6水平呈正相關(guān)(P＜0.05)。結(jié)論 肝炎肝硬化腹水患者存在內(nèi)毒素血癥, 肝炎肝硬化腹水患者TNF-α、IL-6水平升高與體內(nèi)內(nèi)毒素水平升高有關(guān)。

肝硬化；腹水；內(nèi)毒素；腫瘤壞死因子-α；白細(xì)胞介素-6

細(xì)胞因子(cytokine, CK)水平對(duì)肝硬化患者病情預(yù)后起非常重要的作用［1-3］。本研究對(duì)肝硬化伴有SBP患者和肝硬化伴SA患者TNF-α、IL-6及與LPS的關(guān)系進(jìn)行了試驗(yàn)性探討,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 188例肝炎肝硬化腹水患者, 均為2012年1月～2013年5月本院住院患者, 男104例, 女84例, 平均年齡(50.6±2.5)歲。其中肝硬化伴有自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎(spontaneous bacterial peritonitis , SBP)78例(SBP組), 肝硬化伴有無菌性腹水(sterile ascitic fluid , SA)110例(SA組)。其中肝硬化診斷標(biāo)準(zhǔn)按《2000年西安傳染病與寄生蟲病會(huì)議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)》［4］。其中肝硬化伴自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎、肝硬化伴無菌性腹水診斷標(biāo)準(zhǔn)按2000年歐洲肝病年會(huì)共識(shí)文件制定的標(biāo)準(zhǔn)［5］。選取同期20例健康體檢者作為健康對(duì)照組。三組一般資料比較, 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 生物化學(xué)數(shù)據(jù)的測(cè)定 標(biāo)本的收集及檢測(cè)操作步驟嚴(yán)格按試劑盒說明進(jìn)行。所有入選者于入院當(dāng)日及1周后2次保留血漿標(biāo)本, -85℃冷藏保存待測(cè)。所用檢測(cè)法及試劑為：TNF-α、IL-6測(cè)定采用雙抗體夾心ELISA, 試劑盒為雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒(美國(guó)R&D公司) 。LPS測(cè)定采用鱟試劑三肽顯色基質(zhì)偶氮法, 試劑盒為顯色基質(zhì)偶氮法鱟試劑盒(上海市醫(yī)學(xué)化驗(yàn)所)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 兩組間比較采用t檢驗(yàn), 多組間比較采用方差分析；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

SBP組、SA組血漿中TNF-α、IL-6、LPS濃度均顯著高于健康對(duì)照組(P＜0.001)；且SBP組顯著高于SA組(P＜0.001)； SBP組腹水LPS、TNF-α、IL-6濃度均顯著高于SA組(P＜0.001)。肝硬化腹水患者血漿LPS與TNF-α、IL-6水平呈正相關(guān)(P＜0.05)。見表1。

表1 三組血漿、腹水中LPS、TNF-α、IL-6水平的變化( x-±s)

3 討論

細(xì)胞因子參與機(jī)體免疫反應(yīng)進(jìn)程, 明顯影響疾病的轉(zhuǎn)歸。TNF-α、IL-6作為非常重要的前炎癥細(xì)胞因子, 在推動(dòng)疾病發(fā)生發(fā)展中起重要作用, 具體機(jī)制可能與其可觸發(fā)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的級(jí)聯(lián)反應(yīng), 并與其他炎癥介質(zhì)：如氧自由基、白三烯(LTs)、一氧化氮(NO)、血小板激活因子(PAF)等共同作用有關(guān)［6］。

本研究結(jié)果表明, 肝炎肝硬化腹水患者中：SBP患者血漿和腹水中TNF-α、IL-6水平最高, 高于SA患者；SA患者又高于健康人。與此前大多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道符合［7-9］。

Tiggelman等［10］體外實(shí)驗(yàn)研究證明：血漿內(nèi)毒素升高可導(dǎo)致血漿TNF-α、IL-6升高。Claudio等［2］研究證明：TNF-α、IL-6在肝硬化腹水嚴(yán)重并發(fā)癥形成過程中起主要作用。Bradham等［9］研究表明：TNF-α、IL-6在慢性肝病患者中顯著升高, TNF-α、IL-6升高可導(dǎo)致感染性休克等重癥并發(fā)癥, 顯著影響患者的預(yù)后。肝硬化腹水患者血漿及腹水中TNF-α、IL-6水平顯著升高的原因, 目前研究認(rèn)為與內(nèi)毒素血癥激活免疫細(xì)胞和肝臟功能下降對(duì)CK清除能力下降有關(guān)。監(jiān)測(cè)肝炎肝硬化患者血漿和腹水TNF-α、IL-6水平, 有助于早期發(fā)現(xiàn)高危肝硬化腹水患者, 改善患者治療及預(yù)后。

本研究結(jié)果顯示患者血漿及腹水內(nèi)毒素水平與血漿及腹水TNF-α、IL-6水平呈正相關(guān), 與以上研究相符。盡可能地早期防治肝硬化腹水患者內(nèi)毒素血癥可能明顯影響肝硬化腹水患者轉(zhuǎn)歸。

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Changes of pro-inflammatory cytokines in hepatic sclerosis complicated with spontaneous bacterial peritonitis patients

CHEN Yu-jun, HUNAG Pei-jie.Department of Gastroenterology, Henan Anyang City People’s Hosptial, Anyang 455000, China

Objective To investigate clinical significance of level changes of pro-inflammatory cytokines tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) in hepatic sclerosis complicated with spontaneous bacterial peritonitis (SBP) patients and hepatic sclerosis complicated with sterile ascites (SA) patients.Methods Double antibody enzyme-linked immune sorbent assays (ELISA) was applied to detect levels of ascites, TNF-α and IL-6 in blood samples of 188 hepatic sclerosis patients.Among them there were 78 cases of hepatic sclerosis complicated with spontaneous bacterial peritonitis (SBP group) and 110 cases of hepatic sclerosis complicated with sterile ascites (SA group).Tachypleus amebocyte lysate tripeptide chromogenic substrate azo method was applied to detect endotoxin (LPS) levels.There were another healthy people at the same period as health control group.Comparisons were made on LPS, TNF-α, and IL-6 levels in the three groups.Results SBP group and SA group both had obviously higher levels of plasma LPS, TNF-α and IL-6 than the health control group (P＜0.001).SBP group had much higher levels of ascites LPS, TNF-α and IL-6 than SA group (P＜0.001).Plasma LPS in hepatic sclerosis ascites patients had positive correlation with TNF-α and IL-6 (P＜0.05).Conclusion Endotoxemia exists in hepatitis cirrhotic ascites patients.Increased TNF-α and IL-6 are related with increased endotoxin in hepatitis cirrhotic ascites patients.

Hepatic sclerosis; Ascites; Endotoxin; Tumor necrosis factor-α; Interleukin-6

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.24.010

2015-03-25］

455000 河南省安陽(yáng)市人民醫(yī)院消化內(nèi)科