醫(yī)院常見致病菌檢測及其耐藥情況分析

吳惠強 杜為強

·論著·

醫(yī)院常見致病菌檢測及其耐藥情況分析

吳惠強 杜為強

目的 了解高明從化地區(qū)臨床常見致病菌的分布, 分析相關(guān)致病菌的耐藥現(xiàn)狀, 為臨床治療提供依據(jù)。方法 1270株細(xì)菌培養(yǎng)陽性標(biāo)本的病原菌, 按美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行藥物敏感試驗, 根據(jù)藥敏結(jié)果進(jìn)行耐藥情況分析。結(jié)果 在檢出的1270例病原菌中, 革蘭陽性菌828株, 占檢出菌株的65.2%, 革蘭陰性菌442株, 占檢出菌株的34.8%。革蘭陽性菌以凝固酶陰性葡萄球菌為主, 其次是金黃色葡萄球菌、糞腸球菌等；革蘭陰性菌以大腸埃希菌為主, 其次是奇異變形桿菌、肺炎克雷伯菌等；非發(fā)酵菌以銅綠假單胞菌為主, 其次是洋蔥假單胞菌等。所有送檢標(biāo)本中, 共檢出真菌280株, 成為生殖道送檢標(biāo)本中檢出的重要病原菌。各種細(xì)菌對相應(yīng)抗生素出現(xiàn)不同程度的耐藥情況。結(jié)論 條件致病菌成為越來越重要的病原菌, 真菌感染有增多的趨勢；掌握細(xì)菌耐藥情況, 合理規(guī)范使用抗生素, 是感染治療成功及延緩細(xì)菌出現(xiàn)耐藥的關(guān)鍵。

微生物；感染；耐藥性

近年來, 細(xì)菌耐藥性的問題越來越被臨床重視, 細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生及耐藥菌株引起治療失敗的情況越來越嚴(yán)重。條件致病菌成為主要致病菌的現(xiàn)象越來越普遍。為了掌握本地區(qū)常見致病菌(把各送檢標(biāo)本中培養(yǎng)陽性出現(xiàn)頻率居前十位的致病菌稱為常見致病菌)的病源學(xué)流行情況及變遷, 掌握常見致病菌的耐藥傾向, 對本地區(qū)2014年細(xì)菌培養(yǎng)陽性標(biāo)本1270株常見病原菌的耐藥性進(jìn)行檢測, 并對其耐藥傾向進(jìn)行分析。現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 收集本院2014年門診及住院患者細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本共3123例, 細(xì)菌培養(yǎng)陽性標(biāo)本共1270株。其中生殖道標(biāo)本(男性生殖道標(biāo)本指尿道分泌物、精液、前列腺液等；女性生殖道標(biāo)本指陰道及宮頸分泌物)培養(yǎng)陽性729株, 占57.4%；大便標(biāo)本培養(yǎng)陽性143株, 占11.3%；呼吸道標(biāo)本培養(yǎng)陽性112株, 占8.8%；靜脈血標(biāo)本培養(yǎng)陽性95株, 占7.5%；尿液標(biāo)本培養(yǎng)陽性95株, 占7.5%；膿液/傷口分泌物標(biāo)本培養(yǎng)陽性46株, 占3.6%；胸/腹水標(biāo)本培養(yǎng)陽性36株, 占2.8%；其他標(biāo)本培養(yǎng)陽性14株, 約占1.1%。

1.2 藥敏紙片 相關(guān)藥敏紙片購于廣東省臨床檢驗中心。依據(jù)不同細(xì)菌選擇相應(yīng)藥敏紙片組合試驗, 采用紙片擴散法結(jié)合法國梅理埃公司生產(chǎn)的藥敏試紙條進(jìn)行試驗, 操作、結(jié)果判斷及質(zhì)量控制均嚴(yán)格按照葉應(yīng)嫵等［1］主編的《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第3版)執(zhí)行。用大腸埃希菌ATCC25922、ATCC35218、金黃色葡萄球菌ATCC25923作為質(zhì)控菌株。質(zhì)控菌株購于廣東省臨床檢驗中心。

1.3 方法 不同標(biāo)本按照全國臨床檢驗操作規(guī)程規(guī)定的相應(yīng)程序進(jìn)行劃線分離于37℃培養(yǎng)24~48 h得到純培養(yǎng)菌株,腦積液、漿膜腔積液、血液等標(biāo)本需同時在需氧及厭氧條件下增菌培養(yǎng)；大便標(biāo)本用中國藍(lán)瓊脂平板及SS平板各接種1只, 以抑制雜菌生長；生殖道標(biāo)本應(yīng)注意需氧及厭氧培養(yǎng),以免漏檢。所有培養(yǎng)陽性標(biāo)本經(jīng)過革蘭染色、鏡檢, 再轉(zhuǎn)種到相應(yīng)生化反應(yīng)試紙條, 做生化試驗及藥敏試驗。細(xì)菌鑒定用法國梅里埃公司生產(chǎn)的細(xì)菌分析軟件及其相應(yīng)API生化鑒定試紙條, 將細(xì)菌鑒定到種水平。

2 結(jié)果

2.1 常見致病菌分布 2014年全年共接收送檢標(biāo)本3123例, 分離培養(yǎng)出各種病原菌1270株, 培養(yǎng)陽性率40.7%。革蘭陰性菌442株, 占總數(shù)的34.8%(其中革蘭陰性桿菌占34.0%, 革蘭陰性球菌占0.8%), 革蘭陽性菌828株, 占總數(shù)的65.2%(其中革蘭陽性球菌占43.2%, 酵母樣菌占22.0%)；在所有住院患者的送檢標(biāo)本中, 檢出陽性標(biāo)本454株, 其中革蘭陰性菌275株, 占住院陽性標(biāo)本的60.6%, 革蘭陽性菌179株, 占住院陽性標(biāo)本的39.4%。在所有門診患者的送檢標(biāo)本中, 培養(yǎng)陽性816株, 其中革蘭陰性菌167株, 占20.5%, 革蘭陽性菌649株, 占79.5%。在所有培養(yǎng)陽性標(biāo)本中, 占前五位的細(xì)菌依次為：大腸埃希菌占20.4%(259株)；表皮葡萄球菌占16.8%(213株)；金黃色葡萄球菌占15.5%(197株)；銅綠假單胞菌13.3%(169株)；肺炎克雷伯菌11.6%(147株)；奇異變形桿菌、糞腸球菌、假單胞菌屬、陰溝腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌及其他菌屬分列其后。所有送檢標(biāo)本中, 共檢出真菌280株。

2.2 送檢標(biāo)本的病區(qū)分布 門診病區(qū)740株(58.3%)；ICU病區(qū)128株(10.1%)；外科病區(qū)108株(8.5%)；內(nèi)科病區(qū)97株(7.6%)；急診科76株(6.0%)；其他病區(qū)48株(3.8%)；婦產(chǎn)科病區(qū)37株(2.9%)；兒科病區(qū)36株(2.8%)。

2.3 常見病原菌的藥敏結(jié)果 常見革蘭陽性菌［把培養(yǎng)陽性居前四位具有代表性的凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)、耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)及腸球菌］的藥敏情況見表1。常見革蘭陰性菌(有代表性的大腸埃希菌、奇異變形桿菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌)的耐藥情況見表2。

表1 常見革蘭陽性菌對16種抗生素的耐藥率(%)

表2 常見革蘭陰性菌對19種抗生素的耐藥率(%)

3 討論

隨著新型抗生素不斷的應(yīng)用于臨床, 引起病原菌譜的改變及新的耐藥菌株的出現(xiàn), 從而導(dǎo)致臨床治療失敗的現(xiàn)象逐年增多, 經(jīng)常性的監(jiān)測本地區(qū)常見致病菌的情況及其變遷,掌握本地區(qū)常見致病菌的耐藥傾向, 有助于臨床治療, 對減少新型細(xì)菌耐藥株的出現(xiàn), 具有積極意義。

由于使用抗生素的情況差異導(dǎo)致各地區(qū)在致病菌的分布上不盡相同［2-4］, 但是, 總體看來, 最重要致病菌仍然以大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌等最為常見。就本文統(tǒng)計資料來看, 本地區(qū)致病菌譜, 住院患者仍然以革蘭陰性菌為主(占所有住院標(biāo)本培養(yǎng)陽性的60.6%)；而門診標(biāo)本卻以革蘭陽性菌為主要病原菌(占門診標(biāo)本培養(yǎng)陽性的79.5%), 這表明, 即使是同一地區(qū),病區(qū)不同, 病原菌譜就截然不同。分析其原因, 除了病區(qū)不同送檢標(biāo)本不同以外, 還與抗生素的不當(dāng)使用促進(jìn)了耐藥菌在機體和醫(yī)院環(huán)境內(nèi)定植繁育有關(guān), 這樣就造成了條件致病菌或致病力較弱的細(xì)菌, 加入到致病菌譜系中, 成為重要的病原菌。直接的后果就是院內(nèi)交叉感染及內(nèi)源性感染現(xiàn)象增多, 引起治療失敗和出現(xiàn)新的耐藥菌株。

就本地區(qū)目前情況看來, 革蘭陽性致病菌仍然以MRSA、MRCNS、CNS及腸球菌為主要病原菌, 這與其他研究結(jié)論相近［5-8］, 其中門診部送檢標(biāo)本中, MRSA有較高檢出率, 藥敏結(jié)果顯示該類病原菌具有多重耐藥性, 對大多數(shù)頭孢類抗生素敏感性較低, 這與近年來臨床上大量使用頭孢類抗生素不無關(guān)系。但未檢出耐萬古霉素的葡萄球菌, 說明葡萄球菌雖然總體耐藥情況還未發(fā)生根本性改變, 為醫(yī)學(xué)界對抗葡萄球菌感染留下了最后的一道保障。但在美國, 已經(jīng)檢出11例部分或完全耐萬古霉素的金黃色葡萄球菌, 這給醫(yī)學(xué)界敲響了警鐘。腸球菌一貫被認(rèn)為致病力較弱, 但近年來發(fā)現(xiàn)不斷檢出對青霉素類及氨基糖苷類抗生素呈現(xiàn)高度耐藥性的菌株來, 并且出現(xiàn)了耐萬古霉素的腸球菌(VRE), 值得臨床重視。

在腸桿菌科中, 常見致病菌對亞胺培南呈現(xiàn)出較低耐藥率, 對第三代頭孢類抗生素也有較低耐藥率, 非發(fā)酵菌對頭孢他啶、阿米卡星敏感性較好, 對其他抗生素耐藥率均接近或超過50%, 值得高度關(guān)注。多種β-內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生, 導(dǎo)致該類病原菌的抗藥性明顯增強, 由于β-內(nèi)酰胺酶可以水解廣譜青霉素類及頭孢菌素類抗生素, 臨床醫(yī)生在治療該類細(xì)菌感染的患者時, 應(yīng)該充分關(guān)注細(xì)菌培養(yǎng)的藥敏結(jié)果, 以此作為用藥依據(jù), 方可避免治療失敗。

值得注意的是：本文中部分內(nèi)科患者、外科患者、ICU患者, 在入院后10~15 d才檢出病原菌, 且培養(yǎng)出來的病菌呈現(xiàn)多重耐藥現(xiàn)象, 表皮葡萄球菌、腸球菌等致病力較弱的細(xì)菌成為導(dǎo)致該類患者感染的主要病原菌, 提示有院內(nèi)感染的可能；生殖道標(biāo)本培養(yǎng)陽性729株, 占陽性標(biāo)本的57.4%,真菌成為該類患者的重要病原菌, 且該類患者多為20~45歲的成年人, 提示這個年齡段的人群生殖道健康狀況令人擔(dān)憂。

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Detection of common pathogenic bacteria in hospital and analysis of its drug resistance

WU Hui-qiang, DU Wei-qiang.Foshan City Gaoming District People’s Hospital, Foshan 528500, China

Objective To understand distribution of common clinical pathogenic bacteria in Conghua district of Gaoming city, and to analyze its drug resistance, in order to provide reference for clinical treatment.Methods Drug sensitivity test was applied under national committee for clinical laboratory standards (NCCLS) criterion for 1270 strains of pathogenic bacteria as positive samples.Analysis of drug resistance was made according to drug sensitivity test outcomes.Results Among 1270 detected strains of pathogenic bacteria, there were 828 strains of gram-positive bacterium, accounting for 65.2%, and 442 strains of gram-negative bacterium, accounting for 34.8%.Gram-positive bacterium mainly included coagulase negative staphylococcus, followed by staphylococcus aureus and enterococcus faecalis.Gram-negative bacterium mainly included escherichia coli, followed by proteus mirabilis and Klebsiella pneumonia.Non-fermentative bacterial mainly included pseudomonas aeruginosa, followed by pseudomonas cepacia.There were totally 280 strains of fungus among the detection samples, and those funguses were the main pathogenic bacteria.Different bacteria had various drug resistance levels for corresponding antibiotics.Conclusion Conditioned pathogen has become more and more important as pathogenic bacteria, while fungus also has increasing trend.Control of drug resistance and rational antibiotics usage are the keys for successful infection treatment and drug resistance suspension.

Microorganism; Infection; Drug resistance

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.17.001

2015-01-15］

528500 佛山市高明區(qū)人民醫(yī)院