青刺尖茶對高血脂癥小鼠降脂的效果

楊 妍,劉 剛,*,張曉喻,胡婷婷,王戰(zhàn)國,黎 霞,李慧敏

(1.四川師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,四川成都 610101;2.四川大學(xué)生命科學(xué)院,四川成都 610041)

青刺尖茶對高血脂癥小鼠降脂的效果

楊 妍1,劉 剛1,*,張曉喻1,胡婷婷1,王戰(zhàn)國2,黎 霞1,李慧敏1

(1.四川師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,四川成都 610101;2.四川大學(xué)生命科學(xué)院,四川成都 610041)

目的:探討青刺尖茶湯對高血脂癥模型小鼠的降血脂作用。方法:高脂飼料喂養(yǎng)小鼠28d,建立高血脂癥模型小鼠后隨機分成5組,即模型組、青刺尖茶湯低、中和高3個劑量處理組(2、6和9g/kg·bw)及血脂康陽性組(3g/kg·bw),以普通飼料喂養(yǎng)的同批小鼠作空白組。實驗期間各組小鼠取食正常,毛潔白具光澤,且無排稀便現(xiàn)象。進行連續(xù)灌胃給藥28d,心臟取血分離血清,檢測總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的含量,同時,計算肝臟指數(shù)及小鼠體重的增長量。結(jié)果:與模型組比較,各處理組的血清TG、LDL-C均顯著降低(p<0.05),血清TC、HDL-C和肝臟指數(shù)均極顯著降低(p<0.01);高劑量組的血清LDL-C與模型組的差異也達到極顯著(p<0.01)。與空白組比較,各處理組體重的增長量均降低,低、中劑量組達極顯著(p<0.01),高劑量組為顯著(p<0.05),同時,模型組的肝臟指數(shù)顯著升高(p<0.05),但各處理組的肝臟指數(shù)無顯著差異。與模型組比較,各處理組體重的增長量、肝臟指數(shù)的降低,均呈現(xiàn)極顯著(p<0.01)。與陽性組比較,各處理組體重的增長量、肝臟指數(shù),均無差異性。結(jié)論:青刺尖茶湯具有控制高血脂癥小鼠體重的增加、降低肝臟指數(shù)的作用,并顯示良好的降低血清4項血脂指標(biāo)的功效,因此,青刺尖茶具有降低高血脂癥小鼠血脂的效果,顯示其降血脂功能。

青刺尖茶湯,高血脂,降血脂

青刺尖PrinsepiautilisRoyle為薔薇科李亞科扁核木屬的落葉灌木,別名扁核木、槍刺果、打油果(曲靖)、雞蛋果(云南)等[1],株高1～5米,生長于海拔1000～3000米的山坡、溪邊或灌木叢中[2],其冬季開花,夏季結(jié)果,雌雄同株,主要分布云南、貴州、四川、西藏等地,巴基斯坦、尼泊爾、不丹和印度北部也有分布[3-4]。青刺尖的根、莖、葉及果實皆可入藥,在云南省的納西族、白族、彝族、摩梭族等少數(shù)民族中已有上千年的應(yīng)用歷史。青刺尖首載于《滇南本草》,在《貴州中草藥》、《中藥大辭典》中也有記載[5]。青刺尖莖葉主治癰疽毒瘡,風(fēng)火牙痛,槍傷,骨折,蛇咬傷[6]。

表1 高脂飼料對小鼠血脂和體重增長量的影響Table 1 Effect of high-fat diet on blood lipid level and weight increase in mice

注:與空白組比較,##p<0.01,差異極顯著。

高血脂是現(xiàn)代社會常見慢性疾病[7],可導(dǎo)致動脈粥樣硬化、冠心病、高血壓和脂肪肝等疾病的發(fā)生[8-9],高血脂與血脂代謝異常有關(guān),是已知誘發(fā)心血管疾病的重要因素之一[10],嚴(yán)重影響人體的健康。目前,治療高血脂應(yīng)用最廣泛的西藥是他汀類藥物,但是有一定的毒副作用[11]。青刺尖是西南地區(qū)多民族習(xí)用植物藥,有多種的功效,使用歷史悠久。近年,我們對青刺尖種籽和莖葉的功能進行了一些研究[12-14],但青刺尖茶的降血脂功能尚未見文獻報道。開發(fā)青刺尖代用茶有一定意義,本實驗研究為開發(fā)青刺尖茶功能食品提供了理論的支撐。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

青刺尖茶,用青刺尖當(dāng)年生的莖葉,經(jīng)烘炒、揉捻和干燥等工藝制作而成,原料采至鹽源縣左所鄉(xiāng),成都某公司提供。雄性昆明小鼠,體重18～22g,合格證號0023513,成都達碩實驗動物公司。血脂康,北京北大維信生物科技有限公司。戊巴比妥鈉,北京化學(xué)試劑公司。參考吳娟[13]和文鏡[14]的高脂飼料配方:基礎(chǔ)飼料75%、蛋黃粉15%、豬油10%。

1.2 儀器與設(shè)備

R-1005型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 特康科技有限公司；TC6010L全自動生化分析儀 德國賽多利斯公司；BP211電子天平 上海滬湘儀離心機有限公司；TGL-20M臺式高速冷凍離心機等。

1.3 實驗方法

1.3.1 青刺尖茶的處理和血脂康混懸液的配制 稱取青刺尖茶75g,以料液比1∶20加入1500mL蒸餾水[13],90℃回流提取45min,過濾,濾液減壓濃縮后定容至500mL容量瓶,得濃度為0.15g/mL的青刺尖茶湯,按灌胃劑量0.3mL/20g制備6.0、2.0、1.0g/kg·bw高、中、低劑量的青刺尖茶湯。稱取10g,加500mL蒸餾水配制成濃度為20mg/mL的混懸液,灌胃劑量0.3g/kg·bw。

1.3.2 小鼠高脂血癥模型的建立 小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3d,90只小鼠稱重后隨機分成基礎(chǔ)飼料組和高脂飼料組,兩組小鼠間體重差異無顯著性。高脂飼料組75只小鼠飼喂高脂飼料,其余15只小鼠飼喂普通飼料。28d后,禁食不禁水12h,斷尾取血[15-16],4000r/min離心10min[17],分離血清,測定膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的含量。

1.3.3 實驗設(shè)計與統(tǒng)計分析 根據(jù)造模結(jié)果,取造模成功的小鼠隨機分成5組:青刺尖茶湯高劑量組(6.0g/kg·bw)、中劑量組(2.0g/kg·bw)、低劑量組(1.0 g/kg·bw)、陽性組(0.3 g/kg·bw)與模型組。處理組連續(xù)給藥28d,空白組和模型組給等量的蒸餾水,每3d給小鼠稱一次體重,調(diào)整劑量。末次給藥后禁食不禁水12h,先稱重再心臟取血[18],4000r/min離心10min得血清,測定TC、TG、HDL-C和LDL-C。取血后,剝離小鼠的肝臟后,用生理鹽水洗去污血,再用濾紙吸干、稱重,計算肝臟指數(shù)[19]。

肝臟指數(shù)=臟器質(zhì)量/小鼠質(zhì)量(g/g)

實驗重復(fù)3次,數(shù)據(jù)用SPSS17.0進行處理,組間比較用t檢驗或方差分析,多重比較采用LSD法或SNK法[20]。

2 結(jié)果與討論

2.1 高血脂模型小鼠的建立

小鼠先用不同飼料處理28d,斷尾取血,測得血清4項血脂指標(biāo)和體重增長量,結(jié)果見表1。

從表1可看出:不同飼料處理28d后,與普通飼料組相比,飼喂高脂飼料小鼠的體重增加量稍有增大但不顯著,而血清的TC、TG、HDL-C和LDL-C均升高,且差異極顯著(p<0.01),表明高血脂癥模型小鼠建立成功,將造模成功的小鼠按1.3.3隨機分成5組。

2.2 青刺尖茶湯對高血脂癥小鼠的影響

在灌胃期間,空白組、高脂模型組及青刺尖茶湯各處理組的小鼠,均取食正常,毛潔白而具光澤,無排稀便現(xiàn)象。藥物灌胃處理28d后,測定小鼠血脂,結(jié)果見表2。

從表2可看出:與高脂模型組比較,血清TC、TG、HDL-C和LDL-C均降低,其中,低、中和高劑量處理組的TC均有極顯著差異(p<0.01),中、高劑量組的TG均有顯著差異(p<0.05),而各處理組的HDL-C均具有極顯著的差異(p<0.01),高劑量組的LDL-C有顯著差異(p<0.05),中劑量組的LDL-C有極顯著的差異(p<0.01)。與陽性組比較,青刺尖茶湯各處理組的血清指標(biāo)差異性不顯著。

表2 青刺尖茶湯對小鼠血脂的影響Table 2 Effect of Prinsepia utilis tea on blood lipid level in mice

注:與空白組比較,#p<0.05,差異顯著;##p<0.01,差異極顯著。與模型組比較,*p<0.05,差異顯著;**p<0.01,差異極顯著。與陽性組比較,Δp<0.05,差異顯著;ΔΔp<0.01,差異極顯著,表3同。

2.3 青刺尖茶湯對小鼠體重及肝臟指數(shù)的影響

灌胃處理28d后,青刺尖茶湯對小鼠體重及肝臟指數(shù)的影響,結(jié)果見表3。

由表3可知:與空白組比較,模型組體重有一定的增長量但差異不顯著,各處理組體重的增長量均有降低,低、中劑量處理組均達到極顯著(p<0.01),高劑量組差異顯著(p<0.05)。與空白組比較,模型組的肝臟指數(shù)顯著升高(p<0.05),青刺尖茶湯各處理組的肝臟指數(shù)差異不顯著。與模型組比較,青刺尖茶湯處理組的體重增長量、肝臟指數(shù)兩項指標(biāo)均降低,且差異極顯著(p<0.01)。而與陽性組比較,各處理組的體重增長量和肝臟指數(shù)差異均不顯著。

表3 青刺尖茶湯對小鼠體重及肝臟指數(shù)的影響Table 3 Effect of Prinsepia utilis tea on body weight and liver index in mice

3 結(jié)論

青刺尖是云南、貴州和四川等地少數(shù)民族習(xí)用的藥用植物之一,在民間有悠久的使用歷史,在納西族、白族、彝族、摩梭人等少數(shù)民族中,青刺尖莖葉用于預(yù)防和治療痔瘡、便秘等疾病。本研究的結(jié)果顯示,青刺尖莖葉茶湯具有明顯的降血脂效果。青刺尖莖葉具有很好的利用價值,開展進一步的研究開發(fā),可將其制成代茶飲料或保健飲品。

3.1 實驗結(jié)果表明,青刺尖茶湯能有效降低高脂血癥小鼠血清TC含量;中,高劑量青刺尖茶湯對降低血清TG和LDL-C有顯著效果,且中劑量優(yōu)于高劑量。因此,青刺尖茶湯可降低高脂血癥小鼠血清中TC、TG和LDL-C的濃度,同時可控制HDL-C過度增高。青刺尖茶湯處理組的體重增長量明顯低于空白組和模型組,呈一定的劑量依賴性,低、中劑量控制體重增長的效果優(yōu)于高劑量。青刺尖茶湯處理組的肝臟指數(shù)明顯低于模型組,而與陽性組和空白組比較,青刺尖茶湯處理組肝臟指數(shù)均無顯著差異。因此,青刺尖茶具有控制體重、降低血脂的效果。

3.2 與陽性組比較,青刺尖茶湯處理組的體重增長、肝臟指數(shù)、血清中TC、TG、HDL-C和LDL-C含量均無顯著差異,實驗表明青刺尖茶湯的降血脂效果與陽性組相當(dāng)。本實驗中陽性組使用的血脂康是血脂康是北大維信研制的一種具有降血脂功能的生物制品,血脂康的降脂功效已得到充分肯定,血脂康與洛伐他汀、辛伐他汀或普伐他汀相比,其也有一定的優(yōu)勢[21]。青刺尖茶湯的降血脂效果與血脂康相當(dāng),而其降脂的成分與機理有待進一步的研究。

[1]中國科學(xué)院《中國植物志》編寫委員會.中國植物志(第三十八卷)[M].北京:科學(xué)出版社,1986:4.

[2]全國《中草藥匯編》編寫組. 全國中草藥匯編(上冊)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1975:349.

[3]Kilidhar SB,Parthasarathy M R,Sharma P,et al. Prinsepiol,A lignan from stems ofPrinsepiautilis[J]. Phytochemistry,1982,21(3):796-802.

[4]Baranov AI. Taxonomic studies in the genusPrinsepia(Rosaceae)[J]. Taiwania,1965,3(11):99-112.

[5]左愛華,韋群輝. 民族藥青刺尖的研究進展[J].中國民族醫(yī)藥雜志,2007,7(7):40-41.

[6]江蘇植物研究所等. 新華本草綱要(第3冊)[M]. 上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1990.

[7]Mi Kyung Moon,Jiyun Ahn,Hyunyu Lee. Anti-obesity and Hypolipidemic Effects of Chufa(CyperusesculentusL.)in Mice Fed a High-fat Diet[J]. Food Sci Biotechnol,2012,21(2):317-322.

[8]姜保平,許利嘉,彭勇,等. 別樣茶降血脂研究進展[J]. 中國現(xiàn)代中藥,2013,15(4):342.

[9]Yang Y,Piao Y,ZHANG M,et al. Bioactivity-guided fractionation of the triglyceride-lowering component and in vivo and in vitro evaluation of hypolipidemic effects ofCalyxseuFructusPhysalis[J]. Lipids in Health and Disease,2012,11(1):38.

[10]Gupta U C,Jain G C. Hypolipidemic effect ofGinkgobilobaextract in hyperchlesterolemic rats[J]. Asian Journal of Experimental Science,2006,20(1):69-76.

[11]楊永革,王占慶,姜楠,等.他汀類藥物的不良反應(yīng)[J].食品工業(yè)科技,2011,30(6):817-820.

[12]劉剛,楊立成,張曉喻,等.青刺尖種籽油抗缺氧生理活性的研究[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2002,24(6):548-550.

[13]吳娟,柳冬月,顧施健,等.小鼠高脂血癥造模方法的比較及優(yōu)化[J].中國藥師,2010,(2):165.

[14]文鏡,張靜,桑婷婷,等.用高血脂小鼠模型評價降血脂保健食品可行性的探討[J].食品科學(xué),2006,27(11):479-482.

[15]夏英,吳丹,謝云鵬.小鼠實驗室簡易斷尾取血技術(shù)[J].中國科技信息,2008,12(8):204.

[16]田順亮,錢學(xué)華.大鼠斷尾取血固定裝置的設(shè)計及取血的方法[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志,2006,16(7):420-421.

[17]張澤生,王俊輝,李健,等.四株益生菌對高脂血癥倉鼠降血脂作用的研究[J].食品工業(yè)科技,2012,33(12):366.

[18]大田何一雄.小鼠心臟取血法的改良[J].上海實驗動物科學(xué),1987,7(1):59.

[19]潘雪刁,王惠好,何冰,等.苦瓜水提取物對高脂血癥小鼠的降血脂作用研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2013,19(14):266.

[20]謝龍漢,尚濤,蔡明京. SPSS統(tǒng)計分析與數(shù)據(jù)挖掘(第二版)[M].北京:電子工業(yè)出版社,2014.

[21]劉麗娟,馬世堯,劉斯春.血脂康的藥理作用及臨床評價[J].中國藥房,2003,14(3):184-185.

Effect ofPrinsepiautilistea on blood lipids in hyperlipidemic mice

YANG Yan1,LIU Gang1,*,ZHANG Xiao-yu1,HU Ting-ting1,WANG Zhan-guo2,LI Xia1,LI Hui-min1

(1.College of Life Sciences,Sichuan Normal University,Chengdu 610101,China;2.College of Life Science,Sichuan University,Chengdu 610041,China)

Objective:To study the effect ofPrinsepiautilistea on blood lipid in mouse model of hyperlipidemia. Method:The hyperlipidemia mouse model was induced by high fat diet successfully and the mice were randomly divided into blank group,model group,low(2g/kg·bw),middle(6g/kg·bw),high(9g/kg·bw)dose group ofPrinsepiautilistea and positive in group. After treatment of 28d by gastric gavage,serum total cholesefol(TC),riglyceride(TG),high density lipoprotein cholesterol(HDL-C)and low density lipoprotein cholesterol(LDL-C)levels were measured by automatic biochemical analyzer,liver index was calculated. Result:Serum TG and LDL-C inPrinsepiautilistea groups were notably lower than model group(p<0.05);serum TC,HDL-C,weight increase and liver index were significantly lower than model group(p<0.01),LDL-C in high dose group was significantly lower than model group(p<0.01). Weight increase inPrinsepiautilistea groups were lower than blank group,low and middle dose group was significantly lower than blank group(p<0.01),high dose group were notably lower than blank group(p<0.05),liver index in model group was notably higher than blank group(p<0.05). Compared eachPrinsepiautilistea group with model group,TC,TG,LDL-C,HDL-C,weight increase and liver index were not significantly different. Conclusion:Prinsepiautilistea has weight relief and evident hypolipemia effect.

Prinsepiautilistea;hyperlipemia;antilipemic effect

2014-09-09

楊妍(1991-)，女，碩士，研究方向：植物學(xué)。

*通訊作者:劉剛(1968-)，男，碩士，副教授，主要從事天然植物成分分離、功能的研究。

四川師范大學(xué)大精設(shè)備開放基金項目(DJ2014-07)；四川師范大學(xué)項目(14yb29)；四川師范大學(xué)“土壤污染原位修復(fù)與綠色食品藥品開發(fā)”創(chuàng)新團隊項目；攀枝花市科技局項目(2014CY-C-1) ；西昌市教育和科學(xué)計劃局2014年度科技項目。

TS272.5

A

1002-0306(2015)13-0361-04

10.13386/j.issn1002-0306.2015.13.067