PCR檢查法與細(xì)菌培養(yǎng)法在臨床中的用于陰道細(xì)菌檢查的檢驗分析

摘要：目的 研究比較在臨床中應(yīng)用PCR檢查法與細(xì)菌培養(yǎng)法于陰道細(xì)菌檢查的檢驗效果。方法 選擇自2012年2月～2013年9月收治在我院的120例需要做陰道細(xì)菌檢查的患者，在患者的陰道后穹窿處采集其陰道分泌物，然后分別采取PCR檢查法與細(xì)菌培養(yǎng)法進(jìn)行陰道細(xì)菌檢查，對兩組方法的檢驗效果進(jìn)行對比。結(jié)果 細(xì)菌培養(yǎng)法的細(xì)菌檢出率為63.3%，而PCR檢查法的細(xì)菌檢出率為75.8%，兩組效果差異明顯（P>0.05），具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 PCR檢查法對于陰道細(xì)菌的檢出率更高，更準(zhǔn)確，并且應(yīng)用儀器使操作簡單快捷，具有在臨床廣泛推廣的價值。

關(guān)鍵詞：PCR檢查法；細(xì)菌培養(yǎng)法；陰道細(xì)菌檢查；效果

陰道炎癥是臨床常見的婦科疾病之一，基于此病的發(fā)病緩慢，且癥狀不夠明顯，臨床患者對于此病的重視欠缺，但此疾病嚴(yán)重時可以導(dǎo)致腹部以及盆腔疾病等， 在極嚴(yán)重時甚至導(dǎo)致不孕 。因此針對此病及時且有效的檢查診斷，對于致病菌的明確及采取特異性治療至關(guān)重要。本文筆者選擇自2012年2月～2013年9月收治在我院的120例懷疑患有陰道炎的患者，在患者的陰道后穹窿處采集其陰道分泌物，然后分別采取PCR檢查法與細(xì)菌培養(yǎng)法進(jìn)行陰道細(xì)菌檢查，進(jìn)而比較兩種檢查方法的效果?，F(xiàn)匯報研究結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇自2012年2月～2013年9月收治在我院的120例需要做陰道細(xì)菌檢查的患者，進(jìn)入研究的患者全部為育齡期的婦女，年齡25～49歲，平均為（33.29±4.2）歲，且進(jìn)入研究的所有患者均存在外陰異味、瘙癢、白帶分泌增多以及慢性陰道炎等情況。

1.2方法 進(jìn)入研究的120例患者在其陰道后穹窿處采集其陰道分泌物，將分泌物放置于無菌鹽水中，然后分別采取PCR檢查法與細(xì)菌培養(yǎng)法進(jìn)行陰道細(xì)菌檢查，進(jìn)而比較兩種檢查方法的效果。

1.2.1細(xì)菌培養(yǎng)法 將置入生理鹽水中的陰道分泌物取出，后放入相應(yīng)的培養(yǎng)基中，置入含 CO2孵箱中進(jìn)行時長為48h的培養(yǎng)。 待菌落長成后將其培養(yǎng)面上露滴狀、灰色、光滑以及半透明樣的菌落群挑取出來進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化的鑒定，并按照嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行執(zhí)行。

1.2.2PCR檢查法 首先取出1000μL混有無菌生理鹽水的患者陰道分泌物置于離心機(jī)的離心管中進(jìn)行離心，設(shè)置轉(zhuǎn)述為1200r/min，持續(xù)離心15min，離心完畢后將所得到的上清液全部移除。向所得到的陰道分泌物中加入一定量的組織裂解液，后置于60℃的水浴鍋中，于10～15min后取出再次放入離心管中進(jìn)行離心，轉(zhuǎn)數(shù)仍為1200r/min，持續(xù)10min，將所得到的上清液取出少許用來制作DNA模板，后進(jìn)行DNA的體外擴(kuò)增，并在對細(xì)菌進(jìn)行陰陽性對比的時候要選擇制作一個DNA模版作為陰性對照，在此陰性對照里除不加入模板DNA之外，其余操作皆相同。在進(jìn)行擴(kuò)增DNA模版時，向模版中加入緩沖對、雙蒸餾水、引物以及模板等，之后放入PCR儀中進(jìn)行定時循環(huán)。

1.3評價方法 對兩種實驗方法下細(xì)菌檢出的種類及檢出率進(jìn)行統(tǒng)計分析并進(jìn)行對比。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 文中所用資料數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件包對其進(jìn)行分析，有效率對比及計量資料采用χ2檢驗，配對樣本及計數(shù)資料采用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

進(jìn)入研究的120例患者經(jīng)過細(xì)菌培養(yǎng)法和PCR 檢驗法兩種方法檢驗后，實驗結(jié)果得出數(shù)據(jù)顯示，PCR的方法得出的檢驗結(jié)果中陽性者共 91 例 ，其中包括戛納桿菌62例，棒狀桿菌16例， 腸球菌 13例，另外， 陰性者共 19 例， 細(xì)菌檢出率總體為75.8%；應(yīng)用細(xì)菌培養(yǎng)法得出的檢驗結(jié)果中包括陽性者 76例 ， 其中有戛納桿菌 49 例，棒狀桿菌 16例，腸球菌 11 例，另外， 陰性者共44 例， 細(xì)菌的檢出率為 63.3%。 由此可以得出結(jié)論 ，在臨床中應(yīng)用PCR 檢查法較細(xì)菌培養(yǎng)法的檢出療效更好，其細(xì)菌檢出率更高且更加精確， 并且此法的臨床操作簡單易行，操作方法容易理解及實施，因此無論是在大中型醫(yī)院還是小型的社區(qū)醫(yī)院均可以投入實行，與之相反，細(xì)菌培養(yǎng)法的操作要求則較高且標(biāo)準(zhǔn)復(fù)雜， 難以在各類型醫(yī)院中廣泛開展。 經(jīng)過全面對比后， PCR 檢驗法和細(xì)菌培養(yǎng)法兩種方法的細(xì)菌檢出率差異明（P<0.05），具有統(tǒng)計學(xué)的意義，見表1。

3 討論

在日常健康中，白帶的量及性狀能在一定程度上反映婦女的婦科健康情況，因此婦女的日常白帶分泌物增多時應(yīng)引起重視， 及時到醫(yī)院進(jìn)行婦科檢查。近年來，由于各種生活因素及生活習(xí)慣的影響，婦女的陰道類疾病呈逐年增長的趨勢[1]。諸如常見的陰道炎等疾病其致病因素主要為陰道內(nèi)的寄生菌群的失衡，破壞了正常情況下的菌群平衡狀態(tài)，而各菌群平衡狀態(tài)的維持主要依靠陰道的各種分泌物，尤其是陰道上皮細(xì)胞以及陰道桿菌。當(dāng)各種因素導(dǎo)致陰道桿菌的大量死亡，陰道菌群的平衡狀態(tài)被打破，其中致病菌群在婦女的陰道內(nèi)大量的繁殖，在消耗大量糖原等營養(yǎng)物質(zhì)的同時，使陰道上皮細(xì)胞失去原有的代謝能力從而使陰道內(nèi)發(fā)生酸堿平衡紊亂 ，隨之陰道上皮細(xì)胞的正常的屏障功能失去發(fā)生炎癥，導(dǎo)致陰道炎的發(fā)生。由于此疾病的起病緩慢，且最初的癥狀明顯，因此不易引起婦女們的重視，嚴(yán)重時會引起腹部及盆腔的相關(guān)疾病，甚至導(dǎo)致不孕的發(fā)生，因此目前臨床強(qiáng)調(diào)對于此疾病的有效及時的檢驗與診斷顯得至關(guān)重要[2]。細(xì)菌培養(yǎng)法一直以來是臨床中被公認(rèn)的檢查婦女陰道菌群的黃金標(biāo)準(zhǔn)，但由于此種方法的操作步驟相對于 PCR的檢驗法較繁瑣，且不容易操作及實驗室的相對要求較高，難以在大中小型醫(yī)院進(jìn)行全面的大范圍推廣。PCR 的檢驗法是目前臨床中新出現(xiàn)的一種簡便便捷的檢驗技術(shù)，其菌體的檢出率較高，精準(zhǔn)度好且較易展開操作，因此近幾年在臨床中得到了較為廣泛的應(yīng)用。在本研究中，筆者選擇收治在我院的120例需要做陰道細(xì)菌檢查的患者，在患者的陰道后穹窿處采集其陰道分泌物，然后分別采取PCR檢查法與細(xì)菌培養(yǎng)法進(jìn)行陰道細(xì)菌檢查，對兩組方法的檢驗效果進(jìn)行了對比，結(jié)果對上述說法進(jìn)行了進(jìn)一步的證實。

綜上所述，PCR檢查法對于陰道細(xì)菌的檢出率更高，更準(zhǔn)確，并且應(yīng)用儀器使操作簡單快捷，具有在臨床廣泛推廣的價值。

參考文獻(xiàn)：

[1]王一葉.比較PCR檢驗法和細(xì)菌培養(yǎng)法用于陰道細(xì)菌檢驗的效果[J].中外醫(yī)療，2013，32（24）：192-193.

[2]李華鋒，陳英姿.應(yīng)用PCR法與細(xì)菌培養(yǎng)法檢測陰道細(xì)菌的比較分析[J].中國保健營養(yǎng)（中旬刊），2012，（6）：41-42.

編輯/成森