摘 要:為探討肉質(zhì)性狀候選原癌基因(c-FOS)在國內(nèi)外不同豬種群體間的遺傳變異,本研究以大白豬、杜洛克豬、長白豬、寧鄉(xiāng)豬、桃源黑豬、沙子嶺豬和大圍子豬7個豬種為研究對象,以PCR-RFLP方法檢測該基因G2910A位點的遺傳變異。結(jié)果表明,大白豬、長白豬和杜洛克豬3個外來品種的優(yōu)勢基因型均為BB型,A等位基因是寧鄉(xiāng)豬、大圍子豬和沙子嶺豬3個地方品種的優(yōu)勢等位基因,大圍子豬、杜洛克豬和大白豬B是優(yōu)勢等位基因,長白豬全是B等位基因。這與中外不同豬種肉質(zhì)性狀差異較大相一致,本研究為豬肉質(zhì)性狀分子標(biāo)記輔助選擇奠定基礎(chǔ)。
關(guān)鍵詞:豬;c-FOS基因;PCR-RFLP
中圖分類號:S813.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:1001-0769(2015)04-0064-01
豬原癌基因(proto-oncogene,c-FOS)與肉質(zhì)性狀的系水力、肌內(nèi)脂肪含量、pH值等有顯著相關(guān)性,該基因位于豬7號染色體,其cDNA全長1 143 bp。本研究采用PCR-RFLP方法檢測了國內(nèi)外7個豬種c-FOS基因G2910A的基因頻率和基因型頻率。本研究旨在篩選豬肉質(zhì)性狀遺傳標(biāo)記,以期為該標(biāo)記應(yīng)用于豬的育種打下堅實的基礎(chǔ)。
1 材料與方法
1.1 樣品采集
杜洛克豬74頭,長白豬38頭,大白豬781頭,寧鄉(xiāng)豬68頭,桃源黑豬70頭,大圍子豬43頭,沙子嶺豬81頭。剪少量耳組織-20 ℃保存。
1.2 基因組DNA提取及PCR擴(kuò)增引物
基因組DNA提取按常規(guī)酚-氯仿法進(jìn)行,c-FOS基因G2910A位點PCR-RFLP的左引物為5'-TCT GAG GAG GCC TTC ACC CTG C-3',右引物為5'-TCA CGC CCA GAT AAG GTC CT-3'。
2 結(jié)果與分析
2.1 c-FOS基因G2910A位點PCR-RFLP的分型
c-FOS基因G2910A位點擴(kuò)增產(chǎn)物為567 bp,限制性內(nèi)切酶為Tai I,A等位基因為239 bp、204 bp、74 bp、50 bp, B等位基因為313 bp、204 bp和50 bp,AB型為313 bp、239 bp、204 bp、74 bp和50 bp。
2.2 基因頻率和基因型頻率
在4個地方品種豬中,寧鄉(xiāng)豬A等位基因頻率為0.970 6,大圍子豬中全部為A等位基因,沙子嶺豬中A基因頻率為0.963,而桃源黑豬B等位基因為0.628 6;長白豬中全部為B基因,大白豬B基因頻率為0.984 0。經(jīng)Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)x2檢驗,除杜洛克豬此位點處于不平衡狀態(tài)(P>0.05),其余均處于平衡狀態(tài)(P<0.05)(表1)。
3 討論
國內(nèi)外對豬c-FOS基因與其肌纖維性狀的研究已有少量報道,Reiner等對皮特蘭×梅山豬二元雜交豬的研究表明,豬c-FOS基因第4外顯子有1個多態(tài)性位點引起氨基酸的改變。郭云雁等在北京黑豬中發(fā)現(xiàn)c-FOS基因G2910A位點存在多態(tài)性,3種基因型與肌纖維面積、眼肌面積、肌纖維密度存在顯著相關(guān),外來豬種皮特蘭豬無多態(tài)性,基因型全部為BB型,而中國地方豬種梅山豬的基因型全為AA型。本研究發(fā)現(xiàn)大白豬、長白豬和杜洛克豬3個外來品種的優(yōu)勢基因型均為BB型,A基因是寧鄉(xiāng)豬、大圍子豬和沙子嶺豬4個地方品種的優(yōu)勢等位基因,桃源黑豬的B等位基因頻率較高,這是因為在桃源豬的選育過程中導(dǎo)入了杜洛克豬的血液。這為進(jìn)一步研究該位點與豬肉質(zhì)性狀的關(guān)聯(lián)分析及將其應(yīng)用于標(biāo)記輔助選擇打下基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn):(略)