摘 要:本研究對(duì)合黎山區(qū)半放養(yǎng)合作豬的生長(zhǎng)性能和肉質(zhì)風(fēng)味進(jìn)行了研究,并采用頂空固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜法測(cè)定分析在添加不同水平的中草藥飼料添加劑對(duì)合作豬豬肉和風(fēng)味的影響。Ⅰ組為對(duì)照組、Ⅱ組添加0.4 %中草藥飼料添加劑、Ⅲ組添加0.6 %中草藥飼料添加劑。結(jié)果表明,添加中草藥飼料添加劑能改善合作豬的日增重,降低料重比,0.6 %的中草藥飼料添加劑添加效果優(yōu)于0.4 %的水平。風(fēng)味測(cè)定中發(fā)現(xiàn),在80 ℃處理吸附后通過(guò)氣-質(zhì)聯(lián)用分析能檢出化合物有100多種,其中Ⅱ組的豬肉中揮發(fā)性化合物數(shù)量最多,對(duì)照組最少,Ⅲ組的豬肉居中;能夠確定化學(xué)分子式和化學(xué)名稱的化合物占所有化合物的60 %以上,其中Ⅱ組確定的化合物最多,其次是Ⅲ組,對(duì)照組最少;不能鑒別的化合物占總化合物的比例在13 %~16 %之間。添加中草藥飼料添加劑后,豬肉中的能檢測(cè)到的揮發(fā)性化合物數(shù)量增多。
關(guān)鍵詞:中草藥;合作豬;半放養(yǎng);HS-SPME-GC-MS;肉質(zhì)風(fēng)味
中圖分類號(hào):S831.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1001-0769(2015)04-0054-06
隨著我國(guó)畜牧業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整的加快,我國(guó)牛羊肉及禽肉產(chǎn)量和消費(fèi)量迅速提高,豬肉產(chǎn)量和消費(fèi)量平穩(wěn)增長(zhǎng)[1]。豬肉的風(fēng)味是由肌肉中各種物質(zhì)相互作用而產(chǎn)生的水溶性滋味物質(zhì)和揮發(fā)性香味物質(zhì)共同形成的,因此,凡是能影響肌肉組成或者風(fēng)味形成反應(yīng)過(guò)程的因素對(duì)肉的風(fēng)味都會(huì)產(chǎn)生影響,研究發(fā)現(xiàn)影響豬肉風(fēng)味的主要因素有遺傳、飼料、營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境等[2]。中草藥飼料添加劑是以中草藥的物性、物味、物間關(guān)系的傳統(tǒng)理論為主導(dǎo),輔以飼料和飼料工業(yè)等學(xué)科理論和加工技術(shù)而制成的純天然飼料添加劑,它有與食物同源、同體、同用的特點(diǎn),既含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),又能防病治病,毒副作用小,無(wú)耐藥性和殘留,是一種應(yīng)用前景廣闊的綠色優(yōu)質(zhì)新型飼料添加劑[3,4]。
固相微萃?。⊿PME)技術(shù)是一項(xiàng)試樣分析前處理新技術(shù),由加拿大Waterloo大學(xué)的Arthur和Pawliszyn首創(chuàng)。近年來(lái)SPME廣泛用于不同基質(zhì)樣品中揮發(fā)性成分的分析研究[5],現(xiàn)被廣泛應(yīng)用于藥物、煙草分析,還有各種食品風(fēng)味的分析工作中,如水果、酒精、飲料、咖啡等[6,7]。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)被廣泛應(yīng)用于復(fù)雜組分的分離與鑒定,其具有氣象色譜的高分辨率和質(zhì)譜的高靈敏度,是生物樣品中藥物與代謝物定性定量的有效工具。Kaskonienè等人通過(guò)頂空固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜法(HS-SPME-GC-MS)對(duì)蜂蜜中93種化合物鑒定,得到的化合物包括醇類、酮類、醛類、羧酸類、萜烯類、烴類、苯和呋喃衍生物等[8]。本試驗(yàn)采用 HS-SPME-GC-MS技術(shù),給甘肅省合黎山區(qū)半放養(yǎng)合作豬飼料中添加不同含量的中草藥飼料添加劑,研究其在同等飼養(yǎng)條件下生產(chǎn)性能和肉質(zhì)風(fēng)味的差異。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料與設(shè)計(jì)
所有豬統(tǒng)一在甘肅高臺(tái)六禾生態(tài)養(yǎng)殖場(chǎng)飼養(yǎng),圈舍保持干燥清潔,自由飲水,通風(fēng)良好。試驗(yàn)豬隨機(jī)從繁育的合作豬中篩選,試驗(yàn)分3組,選擇生長(zhǎng)發(fā)育正常、體重(5.29±1.02)kg左右的生長(zhǎng)階段豬開(kāi)始試驗(yàn),每組2個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)8頭,公母各半。試驗(yàn)豬每天下午2:00~4:00在野外(豬場(chǎng)范圍內(nèi)、合黎山下)放牧2 h,適當(dāng)投放一些豬可以采食的牧草、塊根、塊莖類,試驗(yàn)期為100 d。試驗(yàn)結(jié)束后,各組隨機(jī)選擇6頭試驗(yàn)豬進(jìn)行屠宰測(cè)定,從尾部數(shù)起,留倒數(shù)第一、二肋骨部的背最長(zhǎng)肌處肉樣做揮發(fā)性風(fēng)味化合物測(cè)定。
各試驗(yàn)組的具體設(shè)置為:Ⅰ組:對(duì)照組,飼喂基礎(chǔ)日糧;Ⅱ組:基礎(chǔ)日糧中添加0.4 %中草藥添加劑;Ⅲ組:基礎(chǔ)日糧中添加0.6 %中草藥飼料添加劑。
1.2 試驗(yàn)日糧
中草藥飼料添加劑由當(dāng)歸、黃芪、丹參、山楂、地榆和馬齒莧等11味中草藥組成,均購(gòu)于甘肅蘭州黃河藥材市場(chǎng)。中草藥飼料添加劑配方及制備工藝參照國(guó)家發(fā)明專利《天然植物飼料添加劑及其制備方法》(專利號(hào):201110292217.0)制作。中草藥飼料添加劑的制備是將上述藥材除去雜質(zhì)后按比例混合均勻,經(jīng)超微粉碎法加工(粉碎粒度在200~300目之間)。
基礎(chǔ)日糧配方按照NRC(2012)推薦水平配制而成。日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。
1.3 試驗(yàn)方法
1.3.1樣品處理與萃取步驟
① 先將裝有肉樣且密封的玻璃瓶置于室溫下40 min,然后置于80 ℃恒溫箱恒溫40 min活化;②從裝有肉樣并密封的玻璃瓶中取6 g樣品放入頂空瓶中;③推手柄桿使纖維頭伸出針管,將纖維頭置于樣品上部空間(頂空方式),萃取時(shí)間40 min,即用固相微萃取器(SPEM)常溫吸附;④縮回纖維頭,然后將針管退出樣品瓶;⑤取出SPME針管插入GC-MS進(jìn)樣口,推手柄桿,伸出纖維頭,熱脫附樣品進(jìn)行色譜柱分析,采用手動(dòng)SPME進(jìn)樣器;⑥縮回纖維頭,移去針管。
1.3.2 所用儀器設(shè)備
100 μm PDMS萃取頭(美國(guó)SUPELCO)配85 mm聚丙烯酸酯纖維頭(cat.NO.5-7304)。PEG20M毛細(xì)管色譜柱,長(zhǎng)30 m,內(nèi)徑0.25 mm,液膜厚0.25 μm,載氦氣,不分流,恒流0.8 mL/min,進(jìn)樣口溫度250 ℃,接口溫度250 ℃,柱溫起始溫度35 ℃保持5 min,以5 ℃/min升溫至230 ℃,保持8 min。Finnigan Tracs MS 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。
1.3.3 質(zhì)譜條件
離子源溫度200 ℃,電離方式EI,電子能量70 eV,掃描質(zhì)量范圍33 amu ~500 amu。
1.3.4 數(shù)據(jù)分析
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析和鄧肯氏多重比較,并進(jìn)行Pearson相關(guān)分析。
2 結(jié)果與分析
2.1不同中草藥飼料添加劑組豬的生長(zhǎng)性能
相鄰字母表示差異顯著(P<0.05),相隔字母表示差異極顯著(P<0.01)。
由表2可以看出,Ⅱ、Ⅲ組的ADG比Ⅰ組分別提高了 8.33 %(P<0.05)、13.26 %(P<0.05),料重比分別降低了1.63 %(P>0.05)、2.24 %(P<0.05).可見(jiàn),添加中草藥飼料添加能顯著提高半放養(yǎng)模式下合作豬的日增重,降低料肉比,而且隨著添加水平的提高,效果更明顯。
2.2 不同中草藥飼料添加劑組豬肉風(fēng)味化合物及相對(duì)含量比較
由表3可見(jiàn),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組豬肌肉中揮發(fā)性風(fēng)味化合物種類相同的物質(zhì)有65種,但其相對(duì)含量不同,分別為60.48 %、61.58 %、60.87 %,其中相同化合物相對(duì)含量最高的是Ⅱ組,其次是Ⅲ組,Ⅰ組最低。從相對(duì)含量上來(lái)說(shuō),基礎(chǔ)日糧中添加中草藥飼料添加劑后,豬肌肉中揮發(fā)性風(fēng)味化合物相對(duì)含量增加了1.83 %(P>0.05)、0.64 %(P>0.05)。
2.3 不同中草藥飼料添加劑對(duì)豬肌肉不同風(fēng)味化合物及相對(duì)含量的影響比較
由表4可見(jiàn),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組豬肌肉中揮發(fā)性風(fēng)味化合物不同的物質(zhì)中,含有揮發(fā)性風(fēng)味化合物種類最多的Ⅱ組有31種,最少的對(duì)照組有29種,且相對(duì)含量不同,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組不同揮發(fā)性化合物的相對(duì)含量合計(jì)分別是23.90 %、24.75 %、24.32 %,其中不同化合物相對(duì)含量最高的是Ⅱ組,最低的是Ⅰ組。
Ⅱ組所含有的揮發(fā)性化合物2-己酮、氯仿、丁酸甲酯和3,5-二甲基-呋喃在Ⅰ、Ⅲ組豬的肌肉中沒(méi)有被檢出;Ⅱ、Ⅲ組豬肌肉中均檢測(cè)出乙酸,且含量較高,而在Ⅰ組中卻未檢測(cè)出;1-辛烯-3-醇在Ⅰ、Ⅲ組豬肌肉中均被檢測(cè)出,而在Ⅱ組卻未檢測(cè)出;所有化合物中數(shù)量最多是醛類,其次是醇類,然后是酸類、碳?xì)浠衔锖屯悾€含有少量的稀類、呋喃和苯等。
由表3、4可見(jiàn),Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組所有揮發(fā)性化合物的相對(duì)含量合計(jì)分別是84.38 %、86.33 %、85.18 %,分別有15.62 %、13.67 %、14.82 %為未鑒定出化合物名稱的部分,其中Ⅰ組未鑒定出名稱的揮發(fā)性化合物的相對(duì)含量最大,其次為Ⅲ組;Ⅱ組鑒定出的成分的相對(duì)含量最多。
2.4 不同中草藥飼料添加劑組豬肌肉中風(fēng)味化合物成分和數(shù)量
根據(jù)美國(guó)PE公司的GC-MS所帶的Wiley、Nist等15個(gè)化合物“圖書(shū)館”提供的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,測(cè)定結(jié)果表明:從色譜圖上出現(xiàn)峰度和有一定保留時(shí)間的化合物超過(guò)100種,能夠確定化學(xué)分子式的化合物占所有化合物的79 %以上,其中Ⅱ組肌肉中能確定的揮發(fā)性風(fēng)味化合物最多,達(dá)96種,其次是Ⅲ組,為95種,Ⅰ組肌肉中僅確定了94種;不能鑒別的化合物占總化合物的百分比在16.81 %~20.83 %之間。
2.5不同中草藥飼料添加劑組的豬肉風(fēng)味化合物類型
由表6可見(jiàn),通過(guò)對(duì)豬肉所有揮發(fā)性化合物的分析認(rèn)為,豬肉揮發(fā)性化合物主要包括如下10個(gè)類型:碳?xì)浠衔?、醇類、醛類、酸類、酮類、酯類、硫化物、呋喃類、酚類等化學(xué)成分,還有少量其他類型的化合物,例如烯類、吡咯等。揮發(fā)性化合物中屬碳?xì)浠衔锞佣?,其次是酸類、醛類和醇類等,而諸如含硫化合物、苯環(huán)類、呋喃類、噻唑類及酚類等則很少。
各組共有化合物相對(duì)含量的總量均分布在60.0 %~62.0 %之間,說(shuō)明其未知的具有差異性的揮發(fā)性風(fēng)味化合物還比較多,有待于更深入的研究其在風(fēng)味形成中的具體作用和協(xié)同作用。
3 討論
(1) 王宏軍等研究六神曲、枳殼等11味中草藥組成的復(fù)方添加劑對(duì)荷包豬生長(zhǎng)性能及肉品質(zhì)的影響,試驗(yàn)結(jié)果顯示,日糧中添加0.1 %~0.3 %中草藥能顯著促進(jìn)荷包豬日增重,顯著降低料肉比,改善煮熟豬肉的易咬入度和風(fēng)味(P<0.05)[9]。大量研究表明,中草藥添加劑具有天然性、多功能性、無(wú)毒副作用和無(wú)抗 藥性的優(yōu)點(diǎn),不僅可提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能,且能顯著改善其產(chǎn)品的品質(zhì)和風(fēng)味[10]。這跟本試驗(yàn)的研究結(jié)果一致。
(2) 風(fēng)味是肉質(zhì)的重要食用指標(biāo),支配著人們對(duì)肉產(chǎn)品的選擇和喜好。肌肉中的這些物質(zhì)相互作用而產(chǎn)生的水溶性滋味物質(zhì)和揮發(fā)性香味物質(zhì)共同形成了榮昌豬肉獨(dú)特的風(fēng)味品質(zhì)[2]。本研究發(fā)現(xiàn),豬肉揮發(fā)性化合物主要包括如下類型:碳?xì)浠衔?、醇類、醛類、酸類、酮類、酯類、硫化物、呋喃類、酚類、苯環(huán)類、噻唑類等化學(xué)成分,揮發(fā)性化合物中屬碳?xì)浠衔锞佣啵浯问撬犷?、醛類和醇類等,而諸如含硫化合物、苯環(huán)類、呋喃類、噻唑類及酚類等則很少。
(3) 錢(qián)敏等用SPME-GC-MS分析豬肉味香精,鑒定出44種主要揮發(fā)性香氣成分,主要為呋喃類、烴類、醛類、酮類、噻吩、噻唑類等,其中醛類和呋喃類最多,是形成豬肉風(fēng)味的主要成分[11,12]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)的主要特征風(fēng)味化合物有3-甲基-1-丁醇、2-戊基-呋喃、辛酸、1-壬酸、己醛、2-戊基-呋喃和氟代三甲基硅烷等。添加0.4 %中草藥添加劑組的豬肉中所含有的揮發(fā)性化合物2-己酮、氯仿、丁酸甲酯和3,5-二甲基-呋喃;添加0.4 %、0.6 %中草藥添加劑組的豬肉中均檢測(cè)出乙酸,且含量較高,而在對(duì)照組中卻未檢測(cè)出。所有化合物中數(shù)量最多是醛類,其次是醇類,然后是酸類、碳?xì)浠衔锖屯?,還含有少量的稀類、呋喃和苯等。
4 結(jié)論
(1) 添加中草藥飼料添加能顯著提高半放養(yǎng)模式下合作豬的日增重,降低料肉比,而且隨著添加水平的提高,在合作豬日糧中添加0.6 %的中草藥飼料添加劑效果優(yōu)于0.4 %的添加效果。
(2) 本試驗(yàn)通過(guò)HS-SPME-GC-MS測(cè)定分析能檢出的揮發(fā)性風(fēng)味化合物有100多種,添加0.4 %中草藥添加劑組的豬肉中最多;能夠確定化學(xué)分子式和化學(xué)名稱的化合物占所有化合物的79 %以上,其中添加0.4 %中草藥添加劑組的豬肉中能確定的揮發(fā)性風(fēng)味化合物最多,其次是添加0.6 %中草藥添加劑組的豬肉。
(3) 添加0.4 %中草藥添加劑組的豬肉中所含有的揮發(fā)性化合物有2-己酮、氯仿、丁酸甲酯和3,5-二甲基-呋喃;添加0.4 %、0.6 %中草藥添加劑組的豬肉中均檢測(cè)出乙酸,且含量較高。所有化合物中數(shù)量最多是醛類,其次是醇類,然后是酸類、碳?xì)浠衔锖屯?,還含有少量的稀類、呋喃和苯等。
參考文獻(xiàn):(12篇,略)