淺談微生物快速檢驗(yàn)技術(shù)及臨床應(yīng)用

文英芬

【中圖分類號(hào)】R446 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2095-6851（2018）03--02

隨著近幾年抗生素的濫用，導(dǎo)致了出現(xiàn)大量嚴(yán)重的耐藥菌株，加上新的病原微生物的出現(xiàn)，給臨床診斷和治療帶來了極大的困擾。嚴(yán)峻的現(xiàn)實(shí)給病原微生物的檢測和診斷提出了更高的要求。世界衛(wèi)生組織（WHO）對(duì)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室提出：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室盡可能把目標(biāo)集中在快速診斷方面。傳統(tǒng)的微生物檢驗(yàn)法最突出的弱點(diǎn)是慢，難以實(shí)現(xiàn)快速診斷與治療，已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足對(duì)各種病原微生物的診斷以及流行病學(xué)的研究[1]。實(shí)現(xiàn)更準(zhǔn)確、更快速的檢出與監(jiān)測病原體成為目前臨床微生物檢驗(yàn)亟待解決的問題。隨著各種生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展和相關(guān)學(xué)科的不斷發(fā)展，特別是免疫學(xué)、病原微生物耐藥性檢測技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)、病原微生物的檢驗(yàn)對(duì)近年來微生物的快速檢驗(yàn)技術(shù)研究進(jìn)展現(xiàn)狀作了一些探索，現(xiàn)在綜述如下。

一、免疫學(xué)方法在快速檢測微生物臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用

免疫學(xué)技術(shù)是利用特異性檢測病原微生物，簡化了病原微生物的鑒定步驟。該方法應(yīng)用單克隆抗體結(jié)合各種形式的放射免疫分析、酶免疫分析以及熒光免疫分析、化學(xué)發(fā)光免疫分析、生物發(fā)光免疫分析等，足以免去細(xì)菌或病毒培養(yǎng)過程和完成微生物感染的快速診斷。這些方法已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的分型和鑒定，應(yīng)用酶聯(lián)免疫技術(shù)制造技術(shù)有利于推動(dòng)進(jìn)一步簡化和準(zhǔn)確。

二、細(xì)菌耐藥性監(jiān)控

與國外相比，我國細(xì)菌耐藥監(jiān)測工作還存在較大差距，一方面，國內(nèi)此項(xiàng)工作開展不夠普遍；另外有些監(jiān)測工作還缺乏規(guī)范性的連續(xù)性，我們不僅要進(jìn)行各醫(yī)院的監(jiān)測，還要協(xié)助有關(guān)部門進(jìn)行地區(qū)性監(jiān)測，甚至全國范圍的監(jiān)測，進(jìn)一步與國際接軌和交流，鑒于目前耐藥性問題及耐藥性問題的日趨嚴(yán)重，應(yīng)準(zhǔn)確地做好常規(guī)的抗生素敏感試驗(yàn)，并保存有關(guān)的菌種和數(shù)據(jù)以便進(jìn)一步分析[2]。

三、分子生物學(xué)技術(shù)在快速檢測微生物中的應(yīng)用

目前的病原微生物的鑒定已不再局限于外部形態(tài)結(jié)構(gòu)及生理特性等一般檢驗(yàn)上，而是立足于核酸水平的檢測上，使人們對(duì)微生物的認(rèn)識(shí)逐漸轉(zhuǎn)換為微生物的檢測也從生化、免疫方法轉(zhuǎn)向基因水平檢測。在眾多的檢測技術(shù)中，核酸雜交和聚合酶鏈反應(yīng)已應(yīng)用于病原菌的快速檢測，特別是基因芯片技術(shù)給微生物學(xué)檢測帶來新的革命。病原微生物有很多時(shí)候出現(xiàn)多重耐藥，基因芯片可對(duì)臨床用藥和新藥開發(fā)具有指導(dǎo)意義，但目前基因芯片技術(shù)限制了分子檢測技術(shù)在臨床病原微生物中的應(yīng)用[3]。

四、分子生物傳感器在快速檢測微生物中的應(yīng)用

分子生物傳感器是將新興的傳感器技術(shù)和分子診斷技術(shù)相結(jié)合而成的一種新技術(shù)，為現(xiàn)代臨床診斷發(fā)展的一個(gè)新方向。生物傳感器在感染類疾病診斷、藥物篩選等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用。其中臨床中用于病原體檢測的DNA生物傳感器最為常見。據(jù)報(bào)道，最新制成的生物傳感器，僅需20s時(shí)間即可檢測出微量SARS病毒、天花病毒及炭疽桿菌等的存在，從而達(dá)到早期、快速診斷的目的[4]。

五、病原微生物的自動(dòng)化系統(tǒng)在快速檢測微生物中的應(yīng)用

近年來，隨著計(jì)算機(jī)技術(shù)的不斷發(fā)展，對(duì)病原微生物的鑒定技術(shù)朝著微量化、系列化、自動(dòng)化的方向發(fā)展，從而開辟了微生物檢測與鑒定的新領(lǐng)域。最有代表性的是AMS微生物自動(dòng)分析系統(tǒng)，可實(shí)現(xiàn)基本同常規(guī)檢測鑒定，單檢測所需時(shí)間4～8h。

六、加強(qiáng)與臨床的聯(lián)系，做到信息暢通

各醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)醫(yī)師應(yīng)和臨床醫(yī)護(hù)人員一道，根據(jù)微生物檢驗(yàn)規(guī)范的規(guī)定，研討和制定本院微生物標(biāo)本采集、保存和運(yùn)送的具體要求。要廣泛宣傳，取得支持，認(rèn)真實(shí)施。要建立健全標(biāo)本驗(yàn)收制度，對(duì)于不合格的標(biāo)本要堅(jiān)決退回，說明原因，要求重送。關(guān)于標(biāo)本的采集要求，要向醫(yī)護(hù)人員做一些深入細(xì)致的宣教。如懷疑病人患有感染性系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)綜合征，需要采血進(jìn)行培養(yǎng)，有相當(dāng)一些醫(yī)生不分析病人的發(fā)熱規(guī)律，不考慮是否用過抗生素，只采1份血送檢，結(jié)果常常培養(yǎng)陰性。這里強(qiáng)調(diào)的是“主動(dòng)”參與對(duì)話，作為檢驗(yàn)人員，你應(yīng)是檢驗(yàn)結(jié)果的主導(dǎo)者，你應(yīng)知道這個(gè)結(jié)果是陽性、陰性、有價(jià)值或無價(jià)值、是否要重做或繼續(xù)觀察。當(dāng)然，臨床醫(yī)生也有不懂得新的檢測項(xiàng)目或者少用的生澀項(xiàng)目，這些都有需要你去主動(dòng)與臨床聯(lián)系，向他們說明這一檢驗(yàn)結(jié)果的價(jià)值和意義，這樣做應(yīng)該說明你對(duì)結(jié)果很有主見，很有信心，你主動(dòng)解釋，應(yīng)該是你的自信心的表現(xiàn)，同樣如此，自信心必須建立在堅(jiān)實(shí)的知識(shí)面的基礎(chǔ)上。臨床醫(yī)生在開化驗(yàn)單時(shí)應(yīng)告訴實(shí)驗(yàn)室人員有關(guān)患者的推測性診斷，以便使試驗(yàn)人員能據(jù)此選擇合理的檢驗(yàn)程序和試驗(yàn)方法，并能指導(dǎo)臨床正確采集恰當(dāng)?shù)臉?biāo)本，改變過去那種臨床送什么標(biāo)本、檢查哪些項(xiàng)目全都由醫(yī)生說了算的局面[5]。當(dāng)實(shí)驗(yàn)室開始有結(jié)果時(shí)，必須及時(shí)通知臨床醫(yī)生，以便讓他們隨時(shí)評(píng)價(jià)診斷和治療方案。另外實(shí)驗(yàn)室人員對(duì)危重和疑難癥患者，需要親自去進(jìn)行床邊觀察，參加病例討論，接受臨床醫(yī)生就診治方面的咨詢；要參加感染性疾病的會(huì)診，討論有關(guān)診治方面的問題，提出有效方案，尤其對(duì)檢出細(xì)菌的種類和耐藥情況作出說明，提出防止耐藥性和醫(yī)院感染的警報(bào)和措施。

總之，微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)應(yīng)在提高微生物檢驗(yàn)的技術(shù)水平上下功夫，快速地做好追蹤和控制，有利于微生物技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)上更好的服務(wù)。

參考文獻(xiàn)

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