針刺及人參煎劑對(duì)疲勞模型大鼠抗疲勞作用實(shí)驗(yàn)研究

馬 斯，陳以國(guó)

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽(yáng) 110032)

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針刺及人參煎劑對(duì)疲勞模型大鼠抗疲勞作用實(shí)驗(yàn)研究

馬 斯，陳以國(guó)

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽(yáng) 110032)

目的：研究針刺及人參煎劑的抗疲勞作用，為針?biāo)幉⒂玫闹委熜Ч峁├碚摶A(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：將大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、針刺組、中藥組及針?biāo)幗M5組，每組10只，建立大鼠疲勞模型，分別給予相應(yīng)藥物或針刺處理，觀察比較各組大鼠血中乳酸(BLA)、乳酸脫氫酶(LDH)、肝糖原(LG)、肌糖原、血尿素氮(BUN)及ATP等各指標(biāo)情況。結(jié)果：與模型組比較，針?biāo)?、針刺、藥物組大鼠血中BLA、BUN含量顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；LDH活力明顯升高，LG、ATP含量顯著增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論：針刺及人參煎劑均具有抗疲勞作用，且針?biāo)幗Y(jié)合使用抗疲勞作用最強(qiáng)。

針?biāo)幗Y(jié)合；電針；人參皂苷；抗疲勞作用

疲勞是一種主觀不適的感覺(jué)，為機(jī)體長(zhǎng)期過(guò)度勞累，體力及腦力勞動(dòng)強(qiáng)度達(dá)到一定程度所產(chǎn)生的生理現(xiàn)象，可導(dǎo)致機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力下降、工作效率降低、差錯(cuò)率升高等[1]。若疲勞癥狀得不到及時(shí)緩解，日積月累便會(huì)導(dǎo)致“過(guò)勞”情況的發(fā)生，最終導(dǎo)致慢性疲勞綜合征。疲勞產(chǎn)生的原因包括能源物質(zhì)缺乏，如肌糖原、肝糖原、ATP過(guò)度消耗；乳酸、丙酮酸等致疲勞物質(zhì)積累；大腦保護(hù)性運(yùn)動(dòng)抑制作用，使機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力下降，產(chǎn)生疲勞感，從而保護(hù)機(jī)體因過(guò)度運(yùn)動(dòng)而造成身體傷害[2]。為此，筆者采用血清乳酸及乳酸脫氫酶活性、血清尿素氮、肝(肌)糖原、ATP含等作為考察指標(biāo)，研究針刺和人參煎劑的抗疲勞作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與試劑

1.1 動(dòng)物

清潔級(jí)Wistar大鼠，室溫(27.0±2.0)℃，采用紫外線(xiàn)定期消毒空氣，墊料高壓滅菌。動(dòng)物自由飲水和攝食，飲冷開(kāi)水，食用每日新鮮蒸熱的標(biāo)準(zhǔn)混合飼料。

1.2 試劑及儀器

乳酸試劑盒、乳酸脫氫酶、血清尿素氮試劑、肝(肌)糖原試劑盒、ATP酶試劑盒。

HH-2型數(shù)顯恒溫水浴鍋、V-1200紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、C4-12離心機(jī)、游泳缸(110cm×60cm×70cm)、溫度計(jì)、秒表及電子稱(chēng)等。

2 方法

2.1 動(dòng)物分組及疲勞模型建立

將40只清潔級(jí)Wistar大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后隨機(jī)分為5組，即空白組、模型組、針刺組、中藥組及針?biāo)幗M，每組8只。除空白組外，其余各組大鼠分別置于(21.0±2.0)℃游泳箱中游泳，水深40cm，每次于大鼠力竭即其頭部完全沒(méi)入水中10s不露出水面時(shí)將其撈起，撈起后將其腹部朝上而不能自行翻轉(zhuǎn)，可見(jiàn)大鼠呼吸深快、反應(yīng)遲鈍，頭朝上握持時(shí)雙下肢及尾部自然下垂。用布擦拭，風(fēng)筒吹干，每日1次，連續(xù)15天，造模期間飲食減半，飲水正常。

2.2 處理方法

造模5天后，針刺組、中藥組及針?biāo)幗M大鼠同時(shí)施加處理因素，以10天為1個(gè)療程。針刺組大鼠選取疲勞相關(guān)背腧穴及心俞、脾俞、腎俞，選用日本“KB短針”(0.12mm×7mm)，順經(jīng)30°角斜刺，刺入皮下2mm，接6805-A型電針儀，施以疏密波，頻率為2Hz，強(qiáng)度以大鼠背部微微顫動(dòng)為宜，留針20min，每日1次，連續(xù)10次。以上穴位選取參照全國(guó)針灸學(xué)會(huì)實(shí)驗(yàn)針灸研究會(huì)制定的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物針灸穴位圖譜》取穴。按照人與鼠的劑量換算方法，每只大鼠人參煎劑的灌胃劑量為0.15mL/天，每日1次，連續(xù)進(jìn)行10次。針?biāo)幗M大鼠同時(shí)施加以上兩種處理因素，藥物組大鼠僅灌胃人參煎液，模型組、空白組大鼠可灌胃等量生理鹽水或捆綁固定以保持外界因素一致。

2.3 生化指標(biāo)測(cè)定

將四組大鼠置于(21.0±2.0)℃游泳箱中不負(fù)重游泳1h，休息30min后，腹靜脈采血，離心，抽取血清備用；同時(shí)立即摘取肝臟，采用生理鹽水漂洗，濾紙拭干備用。采用相應(yīng)的試劑盒檢測(cè)肝糖原、肌糖原、血乳酸、乳酸脫氫酶、血尿素氮及ATP含量。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 結(jié)果

3.1 針刺及人參煎劑對(duì)各組大鼠肝(肌)糖原、ATP含量影響

與空白組比較，模型組大鼠運(yùn)動(dòng)后肝糖原、肌糖原及ATP含量均明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，說(shuō)明大鼠運(yùn)動(dòng)后糖原及ATP均有不同程度的消耗。與模型組比較，中藥組、針刺組及針?biāo)幗M大鼠肝糖原、肌糖原及ATP含量均明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。說(shuō)明針刺及人參煎劑灌胃均可通過(guò)提高大鼠糖原及ATP含量而達(dá)到抗疲勞作用，且針?biāo)幗M改善疲勞作用最明顯。見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠肝糖原、肌糖原、ATP含量比較 ±s)

注：與空白組比較，*P<0.01；與模型組比較，#P<0.01；與針?biāo)幗M比較，△P<0.01。

3.2 針刺及人參煎劑對(duì)各組大鼠血尿素氮、血乳酸及乳酸脫氫酶的影響

與空白組比較，模型組大鼠運(yùn)動(dòng)后血尿素氮及乳酸含量明顯升高，乳酸脫氫酶活性明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與模型組比較，針刺組、中藥組和針?biāo)幗M大鼠BUN及BLA含量降低顯著，而LDH活性明顯升高，其中針刺組、針?biāo)幗M大鼠血乳酸及尿素氮含量較模型組下降更為明顯(P<0.01)。針?biāo)幗M大鼠血乳酸含量與空白組比較差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，針刺組、中藥組及針?biāo)幗M大鼠乳酸脫氫酶含量均顯著高于模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，表明針刺及人參煎劑均可提高機(jī)體對(duì)乳酸的清除能力。見(jiàn)表2。

組別例數(shù)(n)BUN(nmol·L-1)LDH(U·mL-1)IL-BLA(mmol·L-1)空白組823.39±2.753.95±370.103.03±0.73模型組838.09±2.70*1.42±583.55*5.51±1.04*中藥組831.14±2.25*#△2.54±268.16*#△4.40±1.09*#△針刺組830.92±1.78*#△2.66±389.22*#△4.21±0.95*#△針?biāo)幗M826.93±3.48*#3.10±478.70*#3.18±0.42*#

注：與空白組比較，*P<0.01；與模型組比較，#P<0.01；與針?biāo)幗M比較，△P<0.01。

4 討論

本研究結(jié)果表明，與模型組比較，針刺組、中藥組及針?biāo)幗M大鼠血乳酸、血尿素氮及ATP含量均明顯降低，乳酸脫氫酶及肝糖原、肌糖原含量明顯升高，表明針刺和人參煎劑均具有一定的抗疲勞作用。糖原作為重要的運(yùn)動(dòng)能量來(lái)源，以肝糖原和肌糖原的形式儲(chǔ)存在人體內(nèi)，糖原儲(chǔ)備量對(duì)機(jī)體的耐力和運(yùn)動(dòng)能力具有直接影響。當(dāng)機(jī)體高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)2h后，組織中肌糖原含量急劇下降，疲勞感幾乎與肌糖原消耗殆盡同時(shí)出現(xiàn)。因此，糖原存儲(chǔ)越多，機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力及耐受力越強(qiáng)[3]，越不容易產(chǎn)生疲勞。當(dāng)機(jī)體持久或劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)，肌糖原被大量消耗，為保證運(yùn)動(dòng)消耗能量的供給，此時(shí)血糖轉(zhuǎn)化為肌糖原，為維持體內(nèi)血糖濃度平衡，肝糖原被大量分解入血轉(zhuǎn)化為血糖[4]。隨著糖原等能量物質(zhì)逐漸衰減，機(jī)體開(kāi)始分解脂肪及蛋白質(zhì)以保證能量供給，蛋白質(zhì)分解產(chǎn)能所形成的產(chǎn)物即為BUN。在運(yùn)動(dòng)過(guò)程中，ATP在磷酸肌酸的作用下合成并釋放能量，以供肌肉做收縮運(yùn)動(dòng)，其是肌肉中存儲(chǔ)的除糖原、蛋白質(zhì)及脂肪外的又一種能源物質(zhì)[5]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，針刺背腧穴及灌胃人參煎劑均可增加運(yùn)動(dòng)后大鼠糖原及ATP含量，促進(jìn)能源物質(zhì)合成及存儲(chǔ)，為機(jī)體提供所需能量而發(fā)揮抗疲勞作用，同時(shí)可通過(guò)降低血尿素氮含量而增強(qiáng)機(jī)體對(duì)運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的耐受性。在劇烈運(yùn)動(dòng)過(guò)程中，糖酵解速度過(guò)快而使乳酸代謝產(chǎn)物堆積是造成疲勞的因素之一。LDH是一種糖酵解酶，存在于組織細(xì)胞質(zhì)中，其可催化乳酸脫氫，對(duì)乳酸起到清除作用，因此LDH活性的高低對(duì)疲勞的消除也起到關(guān)鍵作用[6]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與模型組比較，其余三組大鼠乳酸含量均明顯下降，且乳酸脫氫酶含量明顯升高，說(shuō)明針刺背腧穴及人參煎劑可能是通過(guò)增強(qiáng)LDH活性、消除肌組織中多余的乳酸且減少BLA生成而發(fā)揮抗疲勞作用的。

祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為疲勞與五臟關(guān)系密切，尤以心、脾、腎為甚?！端貑?wèn)·疹論》曰：“心主身之血脈”，心之陽(yáng)氣旺盛、陰血充盈，使臟腑肌肉、四肢百骸得到氣血的充分濡養(yǎng)而不產(chǎn)生疾病，且心主神志的功能得到心血的滋養(yǎng)而正常發(fā)揮主宰臟腑組織各項(xiàng)功能的作用，此時(shí)機(jī)體表現(xiàn)為精力充沛、思維清晰、反應(yīng)靈敏、飲食睡眠正常、七情調(diào)和等。脾為后天之本，主運(yùn)化水谷精微，是精、氣、血、津液化生來(lái)源，脾氣旺盛則精神充沛、肢體強(qiáng)壯有力。《素問(wèn)·本神》曰：“脾氣虛則四肢不用”，脾氣虧虛則氣血生化不足，四肢得不到氣血滋養(yǎng)而痿廢不用。腎具有封藏精氣的功能，主司人體生長(zhǎng)發(fā)育與生殖。《靈樞·海論》曰：“髓海不足，則腦轉(zhuǎn)耳鳴，脛酸眩冒，目無(wú)所見(jiàn)，懈怠安臥。” 腎藏精，主骨生髓，髓海不足，則眩暈、耳鳴、行走無(wú)力、視物昏花、倦怠嗜臥。背俞穴是五臟之氣直接輸注于背腰部的腧穴，與臟腑病理生理息息相關(guān)，針刺之可調(diào)節(jié)臟腑功能，調(diào)暢臟腑氣機(jī)，使因疲勞所致的臟腑氣機(jī)紊亂、氣血運(yùn)行失調(diào)及陰陽(yáng)失衡恢復(fù)正常，機(jī)體得到氣血濡養(yǎng)而疲勞得解。因此，筆者選取與心、脾、腎三臟相對(duì)應(yīng)的背腧穴進(jìn)行針刺。人參的抗疲勞作用已被公認(rèn)，其能提高糖原利用度、增加組織對(duì)葡萄糖的攝取、防止乳酸堆積、增強(qiáng)機(jī)體對(duì)氧氣的攝取并減緩耗氧速度，顯著提高機(jī)體的缺氧耐受力[7]。其還可保護(hù)因腦缺氧所致的神經(jīng)細(xì)胞損傷，調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)而發(fā)揮抗疲勞作用[8]。但目前對(duì)人參抗疲勞的研究?jī)H限于單味藥，本實(shí)驗(yàn)對(duì)針?biāo)幗Y(jié)合的治療方法進(jìn)行了研究，為疲勞的治療提供了新思路。

綜上所述，針刺與人參煎劑灌胃結(jié)合的抗疲勞作用優(yōu)于單一治療方法，針?biāo)幗Y(jié)合治療已成一種趨勢(shì)并廣泛應(yīng)用于臨床。針刺療法無(wú)毒副作用，與中藥配伍，可相輔相成、取長(zhǎng)補(bǔ)短，發(fā)揮協(xié)同治療作用。

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(責(zé)任編輯：尹晨茹)

2014-12-12

馬斯(1987-)，女，遼寧中醫(yī)藥大學(xué)碩士研究生，研究方向?yàn)獒槾虣C(jī)理。

R285

A

1673-2197(2015)06-0014-02

10.11954/ytctyy.201506006