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    巨細胞病毒對人群發(fā)生高血壓的影響

    2015-04-14 03:01:42馬晨蕓王克翔
    海南醫(yī)學 2015年12期
    關鍵詞:滴度受試者特異性

    馬晨蕓,王克翔

    (上海市第七人民醫(yī)院醫(yī)學檢驗科,上海200137)

    巨細胞病毒對人群發(fā)生高血壓的影響

    馬晨蕓,王克翔

    (上海市第七人民醫(yī)院醫(yī)學檢驗科,上海200137)

    目的探討巨細胞病毒對人群發(fā)生高血壓的影響。方法收集2011年2月至2013年6月來我院接受治療的168例高血壓患者的血液標本作為觀察組,同時收集160例體檢正常者的血液標本作為對照組。檢測并比較兩組患者血漿標本中的巨細胞病毒特異性中和抗體、巨細胞病毒特異性IgG和IgM及巨細胞病毒UL93 DNA。結果觀察組患者巨細胞病毒UL93DNA、巨細胞病毒特異性IgG和IgM的陽性率分別為73.21%、70.83%和4.20%,對照組患者分別為57.50%、49.38%和2.50%,觀察組患者巨細胞病毒UL93DNA和IgG的陽性率高于對照組(P<0.05),而兩組間巨細胞病毒特異性IgM陽性率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。觀察組患者血漿巨細胞病毒特異性中和抗體的幾何滴度平均為(40.12±19.89),對照組為(59.96±24.85),兩組患者間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論高血壓患者的巨細胞病毒感染率高于健康人群,高血壓患者巨細胞病毒特異性中和抗體水平降低明顯,這均表明巨細胞病毒感染與人群發(fā)生高血壓存在相關性。

    巨細胞病毒;高血壓;特異性中和抗體;幾何滴度

    高血壓是威脅人類健康的主要疾病之一。很早以前人們就確定高血壓是心血管疾病的一種危險因素,但由于原因不明的原發(fā)性高血壓患者占95%以上,因此在臨床上很難對高血壓做到早發(fā)現及早治療[1]。高血壓是環(huán)境因素及遺傳因素共同作用的一種復雜性疾病,我國研究人員2011年報道了原發(fā)性高血壓和人巨細胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)的感染有關[2]。HCMV是皰疹病毒科B亞科的一種,巨細胞病毒含有約235 kb,與其他皰疹病毒比較而言是其中最大的一種[3]。人群中HCMV的感染率很高,在發(fā)達國家HCMV的感染率約為60%;而在發(fā)展中國家或在社會經濟較低的團體及某些特殊的人群中,HCMV的感染率會超過95%[4]。本研究以高血壓患者和體檢正常者的血液標本作為研究對象,探討巨細胞病毒感染對人群發(fā)生高血壓的影響。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料選取2011年2月至2013年6月來我院治療的168例高血壓患者的血液標本作為觀察組,同時收集160例體檢正常者的血液標本作為對照組。所選高血壓患者的診斷符合2010年中國高血壓的防治指南[5]。采集所有研究對象的外周血5 ml (EDTA抗凝),離心后收集血漿,放于-20℃保存。

    1.2 方法使用美國Biocheck公司提供的HCMV IgG和IgM的ELISA試劑盒,具體操作步驟按說明書來檢測所有研究對象血漿中HCMV IgG和IgM的陽性率。HCMV IgG陽性的標本再采用間接免疫熒光染色技術來進行HCMV特異性中和抗體的檢測,其具體步驟參考曹元應等的文獻報道[1]。采用PCR技術來擴增HCMV UL93 DNA片段:5'-GGC AGC TAT CGT TGG GA-3'為其上游外側引物;5'-GAT CCG ACC CAT TGT CTA AA-3'為其下游外側引物,通過35個循環(huán)擴增后得到長度為522 bp的產物。然后取2 μl擴增的外側產物為原料進行內側擴增,為5'-TTA GCG CGT GAC CTG TTA CG-3'為其上游內側引物;5'-TCT AAA TTG TTA CGC AGT CCG-3'為下游內側引物,通過35個循環(huán)擴增后得到長度為249 bp的產物。本研究中參考HCMVAD169株基因的序列(GenBank:FJ527563)并利用Premier5.0軟件來進行引物設計,最后請上海生工生物工程股份有限公司來合成此引物。用安徽醫(yī)科大學微生物學教研室保存的從培養(yǎng)物中提取的HCMV AD169株病毒作為陽性對照,取5 μl PCR產物用2.5%的瓊脂糖凝膠跑電泳,其陽性為出現特征性條帶,并請上海生工生物工程股份有限公司對陽性結果進行DNA的測序。

    1.3 統(tǒng)計學方法應用軟件GraphPad.Prism. v5.0分析HCMV的幾何滴度,其余數據采用SPSS16.0軟件包進行統(tǒng)計分析,計量資料以均數±標準差(±s)表示,兩組間比較采用獨立樣本t檢驗,計數資料比較采用χ2檢驗,以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結果

    2.1 兩組受試者的一般資料比較兩組患者的年齡、性別、體重指數、吸煙與飲酒等方面比較差異均無統(tǒng)計學意義(P<0.05),而在其他心血管疾病上觀察組明顯高于對照組(P<0.05),見表1。

    表1 兩組受試者的一般資料比較(±s)

    表1 兩組受試者的一般資料比較(±s)

    組別觀察組(n=168)對照組(n=160) t或χ2值P值男/女89/79 85/75 0.081 0.856年齡(歲) 41.25±5.34 39.89±3.58 0.351 0.924體重指數(kg/m2) 61.19±6.14 59.89±3.48 0.547 0.651吸煙[例(%)] 39(23.21) 38(23.75) 2.574 0.145飲酒[例(%)] 51(31.88) 49(30.63) 2.617 0.096伴隨其他心血管病[例(%)] 37(22.02) 10(6.25) 8.274 0.001

    2.2 兩組受試者的HCMVUL93 DNA、HCMV IgG及IgM檢測陽性率比較觀察組患者的HCMV IgG和HCMV UL93 DNA陽性率均高于對照組(P<0.05),而HCMV IgM陽性率兩組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表2。

    表2 兩組受試者的HCMVUL93 DNA、HCMV IgG及IgM檢測陽性率比較[例(%)]

    2.3 兩組受試者HCMV特異性中和抗體檢測結果比較對HCMV IgG陽性的兩組受試者的血漿標本采用快速微量中和實驗進行抗體滴度檢測,結果顯示,觀察組患者血漿樣品的50%中和滴度的幾何平均數為(32.58±12.55),低于正常對照組的(63.01±21.03),其差異有統(tǒng)計學意義(P=0.028),見圖1。

    圖1 HCMV特異性中和抗體

    3 討論

    高血壓為環(huán)境因素及遺傳因素共同作用的復雜疾病,許多因素均能影響高血壓的發(fā)生。除傳統(tǒng)公認的影響因素外,睡眠、巨細胞病毒感染、糖尿病、尿酸等也是導致高血壓的重要因素[6]。人巨細胞病毒(HCMV)是普遍存在的只會感染人類的一種病原體,HCMV與血管炎性疾病密切相關,它可以破壞血管壁的完整性,進而會導致血管內皮細胞和平滑肌細胞的功能紊亂[7];HCMV還可以潛伏于唾液腺、腎臟、乳腺及白細胞中,等待宿主機體的免疫功能低下時,可被激活感染,進而能導致多種器官的疾病[8]。已有動物實驗證實HCMV可以直接引起小鼠的動脈血壓升高,引起小鼠血漿某些炎性因子的含量增加,導致血管緊張素Ⅱ上升,進而引起血管的收縮,提示HCMV與高血壓之間存在著某種聯系[9]。

    本研究結果顯示,高血壓患者的HCMV UL93 DNA和HCMV IgG陽性率分別為73.21%與70.83%,明顯高于正常人的57.50%與49.38%,這種結果表明HCMV的感染和高血壓的發(fā)生存在一定的聯系,這與曹元應等[1]的研究結果相符合。高血壓患者的HCMV IgM比血壓正常人的高些,但是兩組間的差異沒有統(tǒng)計學意義,這可能是因為HCMV IgM代表了HCMV的近期感染,而HCMV IgG代表著HCMV的既往感染,其特異性及敏感性均很高。

    本研究結果還顯示,采用快速微量中和實驗對兩組受試者中HCMV IgG抗體均陽性的血漿標本進行抗體滴度檢測,高血壓患者血漿樣品的50%中和滴度的幾何平均數明顯低于正常人群,提示高血壓患者對HCMV特異性體液免疫功能明顯地降低,這與已有研究相符合,這樣的結果進一步證實體液免疫在預防先天性HCMV感染方面起著重要預知作用,同時能使我們聯想到HCMV抗體陽性的孕婦能為其子宮內的胎兒提供一定的保護作用,這與先天性HCMV感染的概率在一定程度上有所減少有關。

    綜上所述,高血壓的發(fā)病是由于受到諸如睡眠、巨細胞病毒感染、尿酸及糖尿病等多種因素的影響,高血壓患者巨細胞病毒的感染率明顯高于健康人群,表明巨細胞病毒感染與人群發(fā)生高血壓存在相關性。

    [1]曹元應,甘霖,趙俊,等.高血壓患者人巨細胞病毒感染率及其血漿中和抗體水平分析[J].第二軍醫(yī)大學學報,2014,35(1)∶37-42.

    [2]Li S,Zhu J,Zhang W,et al.Signature microRNA expression profile of essential hypertension ans its novel link to human cytomegalovirus infection[J].Circulation,2011,124(5)∶175-184.

    [3]劉剛,李書琴,胡恩赑,等.人巨細胞病毒的定量檢驗和臨床意義[J].現代生物醫(yī)學進展,2012,12(33)∶6597-6600.

    [4]Griffiths PD,Emery VC,Milne RC.Cytomegalovirus.In∶Douglas D,Richmand,Whitley RJ,editors[M].Clinical virology.3rded. ASM Press,2009∶475-506.

    [5]劉力生.中國高血壓防治指南2010[J].中華高血壓雜志,2011,19 (6)∶701-704.

    [6]李云,楊鵬,吳壽嶺.高血壓危險因素研究進展[J].實用預防醫(yī)學,2014,21(4)∶511-513.

    [7]Li C,Samaranayake NR,Ong KL,et al.Is human cytomegalovirus infection associated with hypertension?The United States National Health and Nutrition Examination Survey 1999-2002[J].PLoS One,2012,7(7)∶e39760.

    [8]Howard BV,Comuzzie A,Devereux RB,et al.Cardiovascular disease prevalence and its relation to risk factors in Alaska Eskimos [J].Nutr Metab Cardiovasc Dis,2010,20(5)∶350-358.

    [9]Cheng J,Ke Q,Jin Z,Wang HL,et al.Cytomegalovirus infection causes an increase of arterial blood pressure[J].Plos Pathog,2009, 5∶e1000427.

    Effect of cytomegalovirus on the occurrence of hypertension in human.

    MA Chen-yun,WANG Ke-xiang. Department of Medical Laboratory,Shanghai Seventh People's Hospital,Shanghai 200137,CHINA

    ObjectiveTo explore the effect of human cytomegalovirus(HCMV)on the occurrence of hypertension.MethodsBlood samples were collected from 168 hypertensive patients(the experimental group)from February 2011 to June 2013 and 160 normal subjects(the control group).The HCMV specific neutralizing antibodies,HCMV UL93 DNA,HCMV IgG and HCMV IgM of the two groups were detected and compared.ResultsThe positive rates of HCMV UL93 DNA,HCMV IgG,HCMV IgM were 73.21%,70.83%and 4.20%in the experimental group and 57.50%,49.38%,2.50%in the control group,with statistically significant differences in HCMV UL93 DNA,HCMV IgG(P<0.05)and no statistically significant difference in HCMV IgM(P>0.05).The geometric titer of plasma HCMV specific neutralizing antibodies was(40.12±19.89)in the experimental group and(59.96±24.85)in the control group, and the difference between the two groups was statistically significant.ConclusionThe HCMV infection rate in hypertensive patients is higher than that in health people,and the geometric titers of plasma HCMV specific neutralizing antibodies is lower in hypertensive patients.There is a correlation between hypertension and HCMV infection.

    Cytomegalovirus;Hypertension;Specific neutralizing antibodies;Geometric titers

    R544.1

    A

    1003—6350(2015)12—1786—03

    2014-08-25)

    浦東新區(qū)衛(wèi)生系統(tǒng)優(yōu)秀青年醫(yī)學人才培養(yǎng)計劃項目(編號:PWRq2012-35)

    馬晨蕓。E-mail:huditwyt@126.com

    doi∶10.3969/j.issn.1003-6350.2015.12.0639

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