王征帆,孫曉霞,劉霞,李莎,劉妮,謝丹丹,齊春梅
(渭南師范學院 化學與生命科學學院,陜西 渭南 714000)
陜西關(guān)中地區(qū)歷史文化悠久,當?shù)厝嗣竦娘嬍澄幕幸捕加胁墒骋安说牧晳T,在長期的生存發(fā)展中,人們采集野菜為時鮮菜肴的同時,也對野菜的生長、食用及藥用方面積累了豐富的經(jīng)驗,養(yǎng)成了采食野菜治病養(yǎng)生、調(diào)劑飲食的習慣。隨著人們生活質(zhì)量的提高,野菜作為一種營養(yǎng)高污染低的綠色健康食材而受到人們青睞。據(jù)報道野菜中富含豐富的膳食纖維、維生素和常量或微量元素,可增加膳食營養(yǎng),益于身體健康,對冠心病、直腸癌等疾病有較好的預防作用。野菜中所含的各種維生素及蛋白質(zhì)、糖、核黃素、微量元素等和一般的栽培蔬菜相比,其所占比例均高于甚至遠遠超過同科同屬的栽培蔬菜[1]。
鐵與人體的健康密不可分,是人體必需的多種微量金屬元素中的一種。鐵不僅參與身體中的血紅蛋白、肌紅蛋白、細胞色素氧化酶等多種酶的合成,還與這些酶的活化性能有關(guān)系,是這些酶合成不可缺少的重要組成成分。缺鐵會影響身體中多種酶的正常工作,進而影響氧和二氧化碳的儲存、運輸以及釋放和影響身體的能量代謝等。鐵對人體免疫功能及神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育有重要作用,缺鐵會導致抵抗力下降、食欲減退、易疲勞煩躁、精神不振,影響嬰幼兒腦及身體正常發(fā)育[2]。野菜作為一種清香可口并且低污染高營養(yǎng)的綠色食材,有很高的藥用價值,所以測定野菜中鐵元素的含量有重要的意義。
NH4Fe(SO4)2·12H2O、濃硝酸、濃硫酸、30%過氧化氫、鹽酸、鹽酸羥胺、鄰二氮菲、NaAc、NaOH均為分析純;苜蓿、薺菜、刺莧、灰菜、苦苦菜、洋槐花、蒲公英均采摘于陜西渭南地區(qū)。
TU-1800PC 紫外分光光度計;BS2245 電子天平;DGB/200-002 臺式干燥箱;680 型電熱恒溫水浴鍋。
1.2.1 樣品的處理 將新鮮的各種野菜沖洗干凈,削碎后置入干燥的燒杯,在45 ℃下烘干,研成粉末狀。準確稱取苜蓿1.501 2 g、薺菜1.500 9 g、刺莖1.501 4 g、灰菜1.500 7 g、苦苦菜1.502 1 g、洋槐花1.502 3 g、蒲公英1.503 3 g 分別放入250 mL 錐形瓶中,加入15 mL 濃硝酸和2 mL 濃硫酸,10 mL 30%過氧化氫,將錐形瓶在電爐上煮沸至棕色,冷卻。滴加1 ~2 mL 濃硝酸,再煮沸。重復操作,直到溶液保持淡黃色[3]。停止加酸,并煮到冒白煙后再煮幾分鐘,冷卻,過濾。將清液置于燒杯中,用NaOH 溶液調(diào)pH 在4 ~6 之間,分別移入50 mL 容量瓶,蒸餾水定容,搖勻,作為樣品儲備液。
1.2.2 樣品測定 用移液管準確吸取樣品儲備液各20 mL,分別置于50 mL 容量瓶中,分別加入10%鹽酸羥胺1 mL,1 mol/L NaAc 5 mL,0.15%鄰二氮菲2 mL,每加一種試劑后搖勻。蒸餾水定容,搖勻后靜置15 h。在510 nm 波長處用1 cm 比色皿以0.0 mL鐵標準溶液為空白參比,測定各樣品的吸光度。
準確吸取10 μg/mL 鐵標準溶液0.0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0 mL 依次加入到50 mL 容量瓶,分別依次加入鹽酸羥胺1 mL,NaAc 5 mL 及鄰二氮菲2 mL,蒸餾水定容搖勻,靜置10 min。用1 cm 比色皿以0.0 mL 鐵標準溶液空白參比,在510 nm 波長下測量溶液的吸光度。以鐵含量(μg)為橫坐標,吸光度A 為縱坐標繪制標準曲線。得到標準曲線方程為Y = 0.213X + 0.003 (R2=0.999 2)。
2.1.1 測定波長的選擇 按實驗方法配制鐵空白參比,對Fe2+與鄰二氮菲發(fā)生反應生成的橘紅色絡合物溶液在200 ~800 nm 范圍內(nèi)進行光譜掃描,獲得溶液的吸收光譜圖。發(fā)現(xiàn)該絡合物溶液的最大吸收波長出現(xiàn)在510 nm 附近。因此,選擇在510 nm下測定其吸光度,可表征其含量。
2.1.2 酸度的控制 取6 個50 mL 容量瓶分別加1 mL 標鐵溶液、1 mL 鹽酸羥胺、2 mL 鄰二氮菲溶液,搖勻。分別加1 mol/L NaOH 溶液0.00,0.50,1.00,1.50,2.00,2.50 mL,蒸餾水定容,搖勻后放置10 min。以蒸餾水為空白參比,在波長510 nm 處測定各溶液吸光度。由實驗可知,pH 在4 ~6 時,溶液吸光度最大。因此,測定體系pH 控制在4 ~6 處。
2.1.3 顯色劑用量控制 準確移取配制好的鐵標準溶液和鹽酸羥胺溶液各1.00 mL 于50 mL 容量瓶中,6 份。在6 個容量瓶中分別加入顯色劑鄰二氮菲溶液0. 50,1. 00,1. 50,2. 00,2. 50,4. 00 mL 和NaAc 溶液55 mL,以純化水定容,放置10 min 左右。在510 nm 波長下測定其吸光度。結(jié)果表明,當顯色劑用量增大時,體系吸光度值也增大,但達到1.50 mL后趨于穩(wěn)定。因此,選擇顯色劑用量為2.00 mL。
2.1.4 測定時間的控制 準確移取配制好的鐵標準溶液1.00 mL,鹽酸羥胺溶液1.00 mL,鄰二氮菲溶液2.00 mL,NaAc 溶液5 mL 于50 mL 容量瓶中,純化水定容、搖勻,在510 nm 波長下每間隔1 min讀取1 次吸光度測定值。結(jié)果表明,在1 ~4 min內(nèi),吸光度值迅速增加;在4 ~8 min 內(nèi),吸光度值緩慢增加;10 min 以后,吸光度基本無變化。因此,每次檢測控制時間在10 min 后檢測。
準確移取各種樣品溶液20 mL,進行吸光度測定,并通過標準曲線求出各樣品中鐵的含量,結(jié)果見表1。
表1 七種野菜鐵含量的測定結(jié)果Table 1 The determination result of iron element in seven kinds of wild vegetables
由表1 可知,這些野菜菜葉都含有豐富的鐵元素,其中苜蓿葉的含量達到122.75 mg/kg,苦苦菜次之,薺菜最少。與文獻中報道的一般蔬菜中鐵元素含量[4]進行對比,發(fā)現(xiàn)大多數(shù)的野菜菜葉中鐵元素含量均高于普通蔬菜。
采用鄰二氮菲分光光度法對陜西關(guān)中地區(qū)常見的幾種野菜菜葉中鐵含量進行了測定。結(jié)果表明,這些野菜菜葉都含有豐富的鐵元素,其中苜蓿含鐵量較高,其次為苦苦菜、蒲公英、洋槐花,灰菜、刺莧、薺菜鐵含量略低。采用分光光度法測定野菜中的鐵元素的含量,方法簡便、快速、準確,其測定結(jié)果對指導人們以野菜為食材進行補鐵以及野菜的進一步開發(fā)提供了依據(jù)。
[1] 王秋燕,趙麗輝.野菜的營養(yǎng)價值及醫(yī)療功效[J]. 長春師范學院學報,1999,18(5):54-56.
[2] 曾琦斐. 微量元素與人體健康[J]. 中國科技信息,2008(3):158-159.
[3] 何建英,陳丹云. 鄰二氮菲分光光度法測定豆類中的鐵含量[J].河北化工,2003(5):61-62.
[4] 劉回,田亞紅. 鄰菲羅啉分光光度法測定蔬菜中鐵的含量[J].化學與生物工程,2009,21(2):32-34.